Module 4 - Les méthodes classiques Flashcards
Qu’est-ce qu’une culture de bactéries?
Une culture de bactéries est un groupe de bactéries dans un milieu nutritif capable de fournir tous les éléments nécessaires à sa croissance et sa multiplication.
Les cultures de bactéries peuvent être qualifiées de deux façons, lesquelles?
1) Pures
2) Mixtes
Qu’est-ce que des cultures de bactéries pures?
La culture sera composée d’une seule souche de bactérie
Qu’est-ce que des cultures de bactéries mixtes?
La culture peut comprendre plusieurs souches ou espèces différentes de bactéries
Les cultures peuvent être fait en milieu liquide ou en milieu solide de quelle façon?
en ajoutant une sorte de gélatine appelée agar au milieu liquide. L’agar est un agent gélifiant extrait d’une algue rouge marine qui est aussi utilisé en cuisine, entre autres, dans la préparation de confitures en remplacement de la pectine
Quels sont les 7 principaux rangs taxinomiques (science qui permet de classer les organsimes vivants)?
Règne/Embranchement/Classe/Ordre/Famille/Genre/Espèce
Comment savoir l’espèce d’une bactérie?
On pourrait dire que les bactéries, tout comme nous, sont identifiées par un nom et un prénom. Leur « nom de famille » est généralement donné en premier, s’écrit avec une majuscule et représente le genre auquel appartient la bactérie. Leur « prénom » suit, s’écrit avec une minuscule et représente l’espèce
Qu’est-ce que la bactérie Escherichia Coli?
Elle fait partie de notre flore intestinale. Certains individus portant ce nom peuvent parfois nous rendre malades parce que leur gènes sont un peu différents de leurs semblables.
Qu’est-ce que la bactérie Staphylococcus aureus?
C’est une bactérie retrouvée normalement sur la peau et dans le nez des humains et qui peut aussi parfois causer des infections
Qu’est-ce que la bactérie Listeria monocytogenes?
C’est une bactérie qu’on trouve dans plusieurs espèces animales et qui peut être nocive pour l’humaine. La voie d’entrée chez l’humain se fait via l’ingestion de nourriture contaminée par cette bactérie. Elle est particulièrement dangereuse pour les femmes enceintes, car elle pourrait provoquer un avortement spontané (d’où pourquoi on ne peut pas manger de fruits de mer)
Qu’est-ce qu’une souche bactérienne?
Le terme souche définit les descendants d’un isolat en culture pure. On peut, par exemple, retrouver l’espèce Escherichia coli dans l’intestin de tous individus. Par contre, l’isolat de mon intestin peut etre génétiquement légèrement différent de celui de quelqu’un d’autre. Il y aura donc la souche moi et la souche autre faisant tout deux partie de l’espèce. C’est pourquoi certaines souches peuvent être dangereuse et d’autres pas
Qu’est-ce qu’une colonie bactérienne?
Lorsqu’un échantillon est étalé sur un milieu de culture gélosé contenu dans une boite de pétri, les bactéries présentes dans l’échantillon de départ sont diluées sur la surface du milieu de culture au fur et à mesure de leur étalement avec le fil à boucle de telle sorte qu’à la fin du processus, on finit par obtenir des cellules isolées. Avec le temps, les bactéries se multiplieront localement et finiront par former des amas de cellules visibles à l’oeil nu qu’on appelle des colonies
Quelle est la principale raison qui nous a pousser à cultiver les bactéries?
La principale raison est d’en apprendre d’avanatge à leur sujet et pouvoir reconnaitre les bactéries responsables des maladies. Cependant, il fallait trouver une façon de séparer les bactéries les unes des autres pour déterminer le rôle et les caractéristiques d’une espèce en particulier, pusique plusieurs pouvaient cohabiter un même endroit. La cultivation a aussi permis de quantifier les bactéries
Comment isoler les bactéries?
L’isolement par striation
Qu’est-ce que la méthode de l’isolement par striation?
Cette méthode consiste à prélever un échantillon contenant potentiellement la bactérie recherchée à l’aide d’un instrument qui s’appelle le fil à boucle. Ensuite, on utilise ce fil pour étaler l’échantillon par striation sur un milieu solide.
Quelle est la première limite de la méthode de striation?
1) Si la bactérie recherchée est majoritaire dans l’échantillon de départ, on obtiendra des colonies isolées de cette bactérie puisque cette méthode d’isolement est essentiellement une méthode de dilution et que seules les bactéries présentes en grande quantité dans l’échantillon original vont conduire à des colonies isolées.
Quelle est la deuxième limite de la méthode de striation?
2) Si la bactérie recherchée est minoritaire dans l’environnement, on n’obtiendra pas de colonies isolées de cette bactérie. Il conviendra alors d’utiliser une technique d’enrichissement avant de strier sur un milieu solidifié. Il est aussi possible d’utiliser un milieu solide dit sélectif, c’est-à-dire un milieu qui contient des substances qui favorisent la bactérie recherchée et/ou inhibient ses compétitrices
À quoi servent les techniques d’enrichissement en milieu liquide?
Elles sont destinées à augmenter la proportion relative d’une bactérie en favorisant sa croissance, sa survie ou sa séparation physique des autres membres de sa communauté ou en inhibant ou tuant les bactéries indésirables sans affecter l’organisme recherché
Donnez un exemple de l’efficacité de l’enrichissement
L’isolement de bactéries lactiques à partir des fèces humaines. Ces bactéries sont moins nombreuses dans l’intestin. Si on prend un échantillon de fèces et qu’on l’étale sur milieu solide, on n’arrivera jamais à obtenir des colonies isolés de bactéries lactiques. Ils faut donc jouer avec le fait qu’elles peuvent résister a des conditions acides. Il faut donc qu’on ajoute à l’échantillon un milieu de culture nutritif liquide
Par quelle méthode doit-on isoler la bactérie aérobie majoritaire dans son environnement?
Striation sur milieu solide
Par quelle méthode doit-on isoler la bactérie anaérobie majoritaire dans son environnement?
Striation directe sur milieu solide dans une chambre ou jarre anaérobie
Par quelle méthode doit-on isoler la bactérie aérobie minoritaire dans son environnement?
Technique d’enrichissement suivie d’une striation sur milieu solide ou striation directe d’un milieu sélectif s’il en existe un
Par quelle méthode doit-on isoler la bactérie anaérobie minoritaire dans son environnement?
Technique d’enrichissement suivie d’une striation sur milieu solide ou striation directe d’un milieu sélectif s’il en existe un et incubation dans une chambre ou jarre anaérobie
Comment quantifier les bactéries?
Les mérthodes de quantification sont essentiellement similaires aux méthodes d’isolement à quelques différences près. On fera de dilutions d’une même suspension bactérienne. On étalera ensuite un volume connu de chacune de ces dilutions sur la surface d’un milieu de culture en boite de pétri, puisqu’on veut ici obtenir un nombre de colonies qui puisse être compté. Pour des raisons de statistiques, le nbr de colonies doit se situer entre 30 et 300
Pourquoi doit-on identifier les bactéries?
Au départ, on a voulu identifer les microorganismes essentiellement pour les besoins de la médecine. En effet, il est extrêmement important d’identifer rapidement le coupable en cas d’infection afin de pouvoir appliquer les mesures adéquates pour la contrer
Que peut on dire sur l’identification des bactéries par microscopie?
Avec la microscopie optique, non-seulement peut-on observer la morphologie du microorganisme vivant, mais aussi sa motilité ou la présence de structures internes telles les spores ou les granules de matériel de réserves utile en cas de période de disette.
Quel test peut-on utiliser pour déterminer si les bactéries sont à Gram positif ou Gram négatif?
La coloration de Gram
Comment se passe l’identification à l’aide de tests biochimiques?
Chaque genre bactérien possède son empreinte digitale biochimique. Les méthodes biochimiques reposent principalement sur la recherche d’enzymes responsables de réactions biochimiques particulières, sur l’utilisation d’un substrat particulier ou sur la présence de produits spécifiques issus des réactions du métabolisme de la bactérie. La présence de ce produit terminal est révélée soit par le changement de couleur d’un indicateur traduisant un changement de pH, soit pas l’addition de réactifs conduisant à une réaction colorée
