Module 4 - Les méthodes classiques

Question 1

Qu’est-ce qu’une culture de bactéries?

Answer 1

Une culture de bactéries est un groupe de bactéries dans un milieu nutritif capable de fournir tous les éléments nécessaires à sa croissance et sa multiplication.

Question 2

Les cultures de bactéries peuvent être qualifiées de deux façons, lesquelles?

Answer 2

1) Pures
2) Mixtes

Question 3

Qu’est-ce que des cultures de bactéries pures?

Answer 3

La culture sera composée d’une seule souche de bactérie

Question 4

Qu’est-ce que des cultures de bactéries mixtes?

Answer 4

La culture peut comprendre plusieurs souches ou espèces différentes de bactéries

Question 5

Les cultures peuvent être fait en milieu liquide ou en milieu solide de quelle façon?

Answer 5

en ajoutant une sorte de gélatine appelée agar au milieu liquide. L’agar est un agent gélifiant extrait d’une algue rouge marine qui est aussi utilisé en cuisine, entre autres, dans la préparation de confitures en remplacement de la pectine

Question 6

Quels sont les 7 principaux rangs taxinomiques (science qui permet de classer les organsimes vivants)?

Answer 6

Règne/Embranchement/Classe/Ordre/Famille/Genre/Espèce

Question 7

Comment savoir l’espèce d’une bactérie?

Answer 7

On pourrait dire que les bactéries, tout comme nous, sont identifiées par un nom et un prénom. Leur « nom de famille » est généralement donné en premier, s’écrit avec une majuscule et représente le genre auquel appartient la bactérie. Leur « prénom » suit, s’écrit avec une minuscule et représente l’espèce

Question 8

Qu’est-ce que la bactérie Escherichia Coli?

Answer 8

Elle fait partie de notre flore intestinale. Certains individus portant ce nom peuvent parfois nous rendre malades parce que leur gènes sont un peu différents de leurs semblables.

Question 9

Qu’est-ce que la bactérie Staphylococcus aureus?

Answer 9

C’est une bactérie retrouvée normalement sur la peau et dans le nez des humains et qui peut aussi parfois causer des infections

Question 10

Qu’est-ce que la bactérie Listeria monocytogenes?

Answer 10

C’est une bactérie qu’on trouve dans plusieurs espèces animales et qui peut être nocive pour l’humaine. La voie d’entrée chez l’humain se fait via l’ingestion de nourriture contaminée par cette bactérie. Elle est particulièrement dangereuse pour les femmes enceintes, car elle pourrait provoquer un avortement spontané (d’où pourquoi on ne peut pas manger de fruits de mer)

Question 11

Qu’est-ce qu’une souche bactérienne?

Answer 11

Le terme souche définit les descendants d’un isolat en culture pure. On peut, par exemple, retrouver l’espèce Escherichia coli dans l’intestin de tous individus. Par contre, l’isolat de mon intestin peut etre génétiquement légèrement différent de celui de quelqu’un d’autre. Il y aura donc la souche moi et la souche autre faisant tout deux partie de l’espèce. C’est pourquoi certaines souches peuvent être dangereuse et d’autres pas

Question 12

Qu’est-ce qu’une colonie bactérienne?

Answer 12

Lorsqu’un échantillon est étalé sur un milieu de culture gélosé contenu dans une boite de pétri, les bactéries présentes dans l’échantillon de départ sont diluées sur la surface du milieu de culture au fur et à mesure de leur étalement avec le fil à boucle de telle sorte qu’à la fin du processus, on finit par obtenir des cellules isolées. Avec le temps, les bactéries se multiplieront localement et finiront par former des amas de cellules visibles à l’oeil nu qu’on appelle des colonies

Question 13

Quelle est la principale raison qui nous a pousser à cultiver les bactéries?

Answer 13

La principale raison est d’en apprendre d’avanatge à leur sujet et pouvoir reconnaitre les bactéries responsables des maladies. Cependant, il fallait trouver une façon de séparer les bactéries les unes des autres pour déterminer le rôle et les caractéristiques d’une espèce en particulier, pusique plusieurs pouvaient cohabiter un même endroit. La cultivation a aussi permis de quantifier les bactéries

Question 14

Comment isoler les bactéries?

Answer 14

L’isolement par striation

Question 15

Qu’est-ce que la méthode de l’isolement par striation?

Answer 15

Cette méthode consiste à prélever un échantillon contenant potentiellement la bactérie recherchée à l’aide d’un instrument qui s’appelle le fil à boucle. Ensuite, on utilise ce fil pour étaler l’échantillon par striation sur un milieu solide.

Question 16

Quelle est la première limite de la méthode de striation?

Answer 16

1) Si la bactérie recherchée est majoritaire dans l’échantillon de départ, on obtiendra des colonies isolées de cette bactérie puisque cette méthode d’isolement est essentiellement une méthode de dilution et que seules les bactéries présentes en grande quantité dans l’échantillon original vont conduire à des colonies isolées.

Question 17

Quelle est la deuxième limite de la méthode de striation?

Answer 17

2) Si la bactérie recherchée est minoritaire dans l’environnement, on n’obtiendra pas de colonies isolées de cette bactérie. Il conviendra alors d’utiliser une technique d’enrichissement avant de strier sur un milieu solidifié. Il est aussi possible d’utiliser un milieu solide dit sélectif, c’est-à-dire un milieu qui contient des substances qui favorisent la bactérie recherchée et/ou inhibient ses compétitrices

Question 18

À quoi servent les techniques d’enrichissement en milieu liquide?

Answer 18

Elles sont destinées à augmenter la proportion relative d’une bactérie en favorisant sa croissance, sa survie ou sa séparation physique des autres membres de sa communauté ou en inhibant ou tuant les bactéries indésirables sans affecter l’organisme recherché

Question 19

Donnez un exemple de l’efficacité de l’enrichissement

Answer 19

L’isolement de bactéries lactiques à partir des fèces humaines. Ces bactéries sont moins nombreuses dans l’intestin. Si on prend un échantillon de fèces et qu’on l’étale sur milieu solide, on n’arrivera jamais à obtenir des colonies isolés de bactéries lactiques. Ils faut donc jouer avec le fait qu’elles peuvent résister a des conditions acides. Il faut donc qu’on ajoute à l’échantillon un milieu de culture nutritif liquide

Question 20

Par quelle méthode doit-on isoler la bactérie aérobie majoritaire dans son environnement?

Answer 20

Striation sur milieu solide

Question 21

Par quelle méthode doit-on isoler la bactérie anaérobie majoritaire dans son environnement?

Answer 21

Striation directe sur milieu solide dans une chambre ou jarre anaérobie

Question 22

Par quelle méthode doit-on isoler la bactérie aérobie minoritaire dans son environnement?

Answer 22

Technique d’enrichissement suivie d’une striation sur milieu solide ou striation directe d’un milieu sélectif s’il en existe un

Question 23

Par quelle méthode doit-on isoler la bactérie anaérobie minoritaire dans son environnement?

Answer 23

Technique d’enrichissement suivie d’une striation sur milieu solide ou striation directe d’un milieu sélectif s’il en existe un et incubation dans une chambre ou jarre anaérobie

Question 24

Comment quantifier les bactéries?

Answer 24

Les mérthodes de quantification sont essentiellement similaires aux méthodes d’isolement à quelques différences près. On fera de dilutions d’une même suspension bactérienne. On étalera ensuite un volume connu de chacune de ces dilutions sur la surface d’un milieu de culture en boite de pétri, puisqu’on veut ici obtenir un nombre de colonies qui puisse être compté. Pour des raisons de statistiques, le nbr de colonies doit se situer entre 30 et 300

Question 25

Pourquoi doit-on identifier les bactéries?

Answer 25

Au départ, on a voulu identifer les microorganismes essentiellement pour les besoins de la médecine. En effet, il est extrêmement important d’identifer rapidement le coupable en cas d’infection afin de pouvoir appliquer les mesures adéquates pour la contrer

Question 26

Que peut on dire sur l’identification des bactéries par microscopie?

Answer 26

Avec la microscopie optique, non-seulement peut-on observer la morphologie du microorganisme vivant, mais aussi sa motilité ou la présence de structures internes telles les spores ou les granules de matériel de réserves utile en cas de période de disette.

Question 27

Quel test peut-on utiliser pour déterminer si les bactéries sont à Gram positif ou Gram négatif?

Answer 27

La coloration de Gram

Question 28

Comment se passe l’identification à l’aide de tests biochimiques?

Answer 28

Chaque genre bactérien possède son empreinte digitale biochimique. Les méthodes biochimiques reposent principalement sur la recherche d’enzymes responsables de réactions biochimiques particulières, sur l’utilisation d’un substrat particulier ou sur la présence de produits spécifiques issus des réactions du métabolisme de la bactérie. La présence de ce produit terminal est révélée soit par le changement de couleur d’un indicateur traduisant un changement de pH, soit pas l’addition de réactifs conduisant à une réaction colorée