Méthodes d'étude des cellules et tissu 2

Question 1

Qu’est-ce qu’un Knock Out (KO) ?

Answer 1

C’est lorsqu’on inhibe l’expression d’un gène

Question 2

Qu’est-ce qu’un Knock In (KI) ?

Answer 2

C’est lorsqu’on augmente l’expression d’un gène

Question 3

Quel est l’objectif du SiARN ?

Answer 3

Un KO

Question 4

Qu’est-ce qu’un SiARN ?

Answer 4

C’est un ARN artificiel double brin de 20 à 24 nucléotides qui va être envoyé dans la cellule

Question 5

En quoi consiste la SiARN ?

Answer 5

Après avoir été injecté, il circule par voie sanguine, entre dans la cellule, s’échappe de l’endocytose, libère les brins, le complexe RISC va s’assembler avec, se débarrasser du brin sens et qui va chercher l’ARNm complémentaire au brin anti-sens dont il va se débarrasser et ainsi de suite

Question 6

Schéma de SiARN

Answer 6

Schéma de SiARN

Question 7

Quel est l’objectif du système Cre/Lox ?

Answer 7

Un KO total ou conditionnel

Question 8

Quelles sont les préparations pour le système Cre-Lox ?

Answer 8

Une lignée de souris avec le gène qui code la CRE recombinase et une lignée de souris avec le gène d’intérêt entourée de séquences LoxP

Question 9

En quoi consiste le système Cre-Lox ?

Answer 9

Le croisement des deux souris spéciales, qui va donc exprimer la CRE gene, la Cre recombinase va donc se servir d’un des LoxP pour exciser le gène d’intérêt en une boucle

Question 10

Comment rendre le KO du système Cre-Lox spécifique ?

Answer 10

Il faut que la souris codant la Cre Recombinase soit en aval d’un promoteur “cellule spécifique”, donc les Cre recombinases vont s’activer que dans certaines cellules

Question 11

Qu’est-ce qu’un NEX ?

Answer 11

C’est un exemple de promoteur de “neurone spécifique”

Question 12

Quel est l’avantage du système Cre Lox ?

Answer 12

C’est un système qui permet d’inhiber l’expression que dans des tissus spécifiques sans que ça ne touche des organes dont l’expression du gène est essentiel à sa survie

Question 13

Comment faire une surexpression d’un gène avec le système Cre-Lox ?

Answer 13

En faisant en sorte que la Cre recombinase excise une séquence stoppante

Question 14

Que permet le système CRISPR/Cas9 ?

Answer 14

Il permet relativement spécifiquement de couper un gène (mais c’est pas super abouti)

Question 15

Comment exciser une séquence d’ADN grâce au système CRISPR/Cas9 ?

Answer 15

En utilisant 2 CRISPR/Cas9 dans le même sens