Apoptose Flashcards
Qu’est-ce que l’apoptose ?
C’est une mort cellulaire programmée
Pourquoi la cellule, l’organisme a-t-il besoins de programmer sa mort ?
- maintien d’un stock de cellules
- éliminer la cellule endommagée
Quelle est la durée de vie moyenne de cellules intestinales et de globules rouges ?
- cellules intestinales : 7 jours
- globules rouges : 3 mois
Quelle est la durée de vie moyenne de globules blancs neutrophiles et de plaquettes ?
- globules blanc neutrophiles : 5 jours
- plaquettes : 8 jours
Quelle est la durée de vie moyenne des cellules de la peau, osseuses et nerveuses ?
- peau : 2 à 3 semaines
- osseuses : 30 ans
- nerveuses ne sont pas remplacées
Qu’est-ce que la différenciation ?
C’est le processus dans lequel une cellule perd certaines aptitudes pour gagner d’autres spécifiques à son tissu et lui conférant une fonction
Qu’induit l’anomalie de fonction ?
La maladie
Qu’est-ce que la prolifération ?
C’est la production de cellules différenciées / fonctionnelles
Qu’induit l’absence de prolifération ou trop de prolifération ?
La maladie
Qu’est-ce que la survie ?
C’est le maintien des cellules différenciées
Qu’induit l’absence de survie et une survie trop importante ?
- absence de survie : apoptose, maladie
- survie importante : maladie
Comment assurer les fonctions de l’organe ?
Il faut maintenir le nombre des cellules différenciées nécessaire
Comment est maintenu ce nombre ?
Avec l’association de deux types de signaux :
- de maintien de la survie cellulaire
- qui inhibent les signaux de la mort cellulaire
Décrivez le processus pour induire une activité cellulaire
Des facteurs externes et internes vont être intégrés et induire une réponse : prolifération, quiescence (perte de capacité division), différenciation, senescence et possiblement des morts programmées
Combien de types de morts cellulaires existe-t-il ?
Il en existe une dizaine de types différents
Quels sont les 3 exemples de types de morts ?
Apoptose, autophagie, nécrose
Quelles sont les modifications morphologiques de l’apoptose ?
- condensation de la chromatine
- pas de vacuoles cytoplasmiques
- phagocytose par les cellules avoisinantes
Quelles sont les modifications morphologiques de l’autophagie ?
- pas de condensation de la chromatine
- vacuolisation importante du cytoplasme
- accumulation de vacuoles autophagiques
- peu de phagocytose par les cellules avoisinantes in vivo
Quelles sont les modifications morphologiques de la nécrose ?
- condensation au hasard de la chromatine
- gonflement irréversible du cytoplasme
- rupture des membranes
- les organelles intra cellulaires se désintègrent
- une “inflammation” se crée autour
Comment se déroule la mort cellulaire par apoptose ?
- condensation de la chromatine le long de l’enveloppe nucléaire
- condensation du cytoplasme
- bourgeonnement de l’enveloppe nucléaire
- fragmentation de l’ADN
- formation de corps apoptotiques formés de fragments de noyau et de membrane nucléaire
- phagocytose par les cellules avoisinantes
Quelle est la différence entre la nécrose et l’apoptose ?
La nécrose induit une membrane perforée et donc une désintégration de la cellule = explosion et une réponse inflammatoire alors que dans l’apoptose, la membrane reste intacte et il n’y a pas de réponse inflammatoire
Comment pouvons-nous mesurer la viabilité des cellules ?
a) Test au bleu trypan : les cellules bleues sont les cellules en nécrose (membrane perforée)
b) Coloration du noyau au May Grunwald Giemsa (MGG) des cellules en apoptose : pas de membrane nucléaire
Que se passe-t-il au cours de l’apoptose au niveau de la membrane ?
Il y a externalisation de la phosphatidylsérine
Comment exploiter cette information pour la mesure de cellules en apoptose ?
On peut employer l’Annexine V qui peut se fixer au phosphatidylsérine et en utilisant de l’iodure de propidium (agent intercalant des acides nucléiques hydrophiles) entrant ou non dans la cellule
Quelles mesures obtenons-nous pour les cellules vivantes ?
Annexine V négative et IP (PI) ne rentre pas dans la cellule
Quelles mesures obtenons-nous pour les cellules en apoptose ?
Annexine V positive et IP ne rentre pas dans la cellule
Quelles mesures obtenons-nous pour les cellules en nécrose ?
IP entre dans la cellule et peuvent être annexine V positive aussi
Quelle méthode d’analyse est employée pour mesurer l’intensité de fluorescence ?
La cytométrie de flux
Quels sont les compartiments des morts cellulaires dans le graphe de l’analyse en cytométrie de flux ?
Quelle est la caractéristique biochimique de la mort par apoptose ?
L’ADN est clivé en fragments de 180 à 200 paires de bases
Comment se fait ce clivage ?
Par CAD, une DNAse activée par la caspase 3 et inhibée par ICAD inhibiteur de CAD
Quelle est l’une des protéines indispensables au déroulement de l’apoptose ?
Les caspases
Qu’est-ce que les caspases ?
Ce sont des protéases à cystéine coupant les protéines (= substrat) après l’acide aminé Asp (Acide aspartique)
Combien y a-t-il de caspases chez l’homme ?
C’est une famille de 11 caspases
Comment sont les caspases dans la cellule pas en apoptose ?
Elles sont sous formes inactives : pro-caspases
Que nécessite leur activation ?
- le clivage du “prodomaine”
- la séparation des sous-unités
- la liaison des sous unités
Donc quelle est la structure d’une caspase ?
Elle est composée de 2 “préprotéines” : un assemblage de deux grande sous unités et des deux petites sous unités
Quelles sont les fonctions des caspases effectrices ?
- caspase 3 active la CAD en libérant ICAD, Cad va couper l’ADN et ainsi le fragmenter
- caspase 3 inactive des enzymes de réparation de l’ADN (PARP)
- caspase 6 dégrade les lamines qui participent à la structure du noyau et aux liaisons chromatine - membrane nucléaire
Comment est déclenchée la mort cellulaire par apoptose ?
- signaux extra cellulaires induisant la voie extrinsèque
- signaux intra cellulaire induisant la voie intrinsèque
Donner deux exemples de signaux extra cellulaires induisant l’apoptose
TNF et FAS ligand
Donner deux exemples de signaux intracellulaires induisant l’apoptose
- dommage de l’ADN
- stress intra cellulaire
Qu’est-ce qu’un signal extra cellulaire ?
C’est une protéine qui se lie à un récepteur membranaire spécifique
Comment se déroule la voie extrinsèque ?
- activation du domaine de la mort (DD)
- formation du DISC (complexe)
- activation successive de plusieurs caspases (8 d’abord)
- apoptose
Que comporte DISC ?
Il comporte une partie intracytoplasmique récepteur, des protéines adaptatrices et une procaspase 8
Qu’active la procaspase 8 ?
Elle active les procaspases 3 ,6 …
Qu’est-ce que la voie intrinsèque ?
C’est “l’activation” de la mitochondrie par des protéines intracellulaires telles que BAX
Comment est induite cette activation ?
Par la modification de la perméabilité membranaire de la mitochondrie
Comment se déroule la voie intrinsèque ?
1) libération du cytochrome C
2) fixation sur APAF-1
3) formation de l’apoptosome
4) recrutement de la pro-caspase 9
5) activation de la caspase 9
6) activation de la caspase 3
7) mort cellulaire par apoptose
Comment est due cette modification de la perméabilité de la membrane de la mitochondrie ?
Des complexes Bcl-2 - Bax vont se dissocier à cause de Bik qui va s’attacher et kidnapper Bcl-2 et Bax vont s’homomériser pour former un pore
Quelle est la relation entre les deux voies ?
Caspase 8 va activer Bid qui va induire la voie intrinsèque
Que forment les complexes Bcl-Bax ?
Un état d’équilibre entre survie et apoptose
Qu’est-ce que les protéines de la famille bcl ?
Elles favorisent la survie des cellules, elles sont anti-apoptotiques
Qu’est-ce que les protéines de la famille bax ?
Elles favorisent la mort des cellules, elles sont apoptotiques/proapoptotiques
Que forment les Bcl et Bax ?
Elles forment des homo ou hétérodimères
Que font les dimères ?
Ils se lient à la membrane externe de la mitochondrie et inhibent ou favorisent le relargage du cytochrome c
Quels domaines possèdent les protéines anti-apoptotiques ?
BH4 - BH3 - BH1 - BH2
Quels domaines possèdent les protéines proapoptotiques ?
BH3 - BH1 - BH2 et d’autres ne possèdent que BH3
Donner des exemples de signaux de survie
Bcl 2 et Akt
Qu’est-ce que p53 ?
C’est une protéine pro apoptotique transcriptionnelle activée par le stress, les dommages à l’ADN, les radiation ionisantes …
Qu’active les p53 ? (+ exemple)
Elles activent la transcription des gènes qui déclenchent l’apoptose comme Bax par exemple
Pourquoi y aurait-il trop d’apoptose ?
- l’apoptose des neurones augmente avec l’âge
- l’apoptose des cellules sanguines dans la moelle osseuse (qui représente 95% des cellules de l’organisme)
Pourquoi y aurait-il pas assez d’apoptose ?
A cause de l’augmentation des cancers par anomalies du processus d’élimination des cellules endommagées
Quelle protéine est surexprimée dans les cancers et qu’induit-elle ?
C’est la protéine Bcl2 qui va faire augmenter la survie des cellules cancéreuses
Pour quelle proportion des cancers a la p53 mutée ?
Une grande partie d’entre elles
Qu’induit la mutation de p53 ?
L’apoptose est diminuée, les cancers accumulent des cassures de l’ADN, une instabilité génomique, des anomalies de p53 et des facteurs de survie, et des facteurs de prolifération
A quoi visent les traitement anticancéreux et comment le faire ?
Ils visent à augmenter l’apoptose des cellules cancéreuses :
- en inhibant l’oncoprotéine responsable de la prolifération cellulaire
- en inhibant la protéine Bcl2
