MECANISMOS INTRACELULARES DE DEGRADAÇÃO Flashcards
o que é uma chaperone
Chaperone - qualquer proteína que interage, estabiliza ou auxilia outra proteína na aquisição da sua
conformação funcional ativa, sem ser parte da sua estrutura final
O que é uma HSP
HSP (Heat Shock proteins) - família de proteínas produzidas na célula em resposta a condições
stressantes, nomeadamente a elevadas temperaturas
Constituição da HSP60. Como se chama nas bactérias.
• Barril com duplo heptâmero (HSP60/ GroEL) - 14 proteínas na zona central • Fecho heptamérico superior e inferior (HSP10/GroES) - Zonas no polo inferior e superio nas bactérias - No caso das bactérias, têm a designação GroEL/GroES para designar dois componentes muito característicos da proteína
O que é um aggressoma
agregado de proteínas sem
configuração correta em células eucarióticas
O que fazem as enzimas E1, E2 e E3
E1: Ativadora de ubiquitina
E2: Conjugadora de ubiquitina
E3: Lígase de ubiquitina
Quando é que as proteínas vão para os proteassomas. Qual a constituição destes.
• Caso a proteína não consiga adquirir o folding/seja oxidada e forme
uma agressoma, será endereçada para o proteassoma, marcada pela
ubiquitina
• O proteassoma tem uma estrutura aproximadamente cilíndrica onde se
identificam diversos componentes
• 20S catalytic core complex - constituído por 2 frações β entre 2 frações α
• 19S regulatory complex
O que faz o proteassoma (passos)
- A proteína entra no proteassoma, onde a sua cadeia de poli-ubiquitina se liga
- Sofre unfolding e translocação por uma ATPase ring
- Na zona catalítica (20S proteasome), encontram-se peptídases e moléculas com ação de tripsina/
quimotripsina (enzimas proteolíticas). Também tem uma ação de caspase - conjunto de enzimas
proteolíticas que têm como propriedade destruir proteínas quebrando ligações peptídicas a seguir a um aspartato - Deste processo, resultam produtos de péptidos
Passos da microautofagia. o que é a microautofagia seletiva.
- Entidades particuladas são diretamente engolfadas pelo lisossoma
- Formação de uma invaginação
- Entidade rodeada inicialmente por uma pequena membrana que depois é degradada por enzimas hidrolíticas.
Seletiva:
• Seleção por proteínas que têm um determinado sinal (na figura, é o
KFERQ)
• Em interação com um chaperone (neste caso, o HSC70)
O que acontece na CMA (chaperone-mediated autophagy). Passos da CMA.
• Ocorre uma interação entre a chaperone e uma proteína superfície da membrana lisossomal chamada LAMP2
1. Reconhecimento do sinal KFERQ que contém substrato pela chaperone
HSC70 no citosol
2. Ligação do complexo substrato-chaperone ao monómero LAMP2A
3. Oligomerização do LAMP2A, formando o translocão
4. Translocação do substrato para dentro do lisossoma
5. Degradação do substrato
O que é a LAMP2A
LAMP2A (lysosome-associated membrane protein type 2A) - glicoproteína da
membrana lisossomal que interage com as chaperones
Passos da macroautofagia. que tipos de macroautofagia existem.
- Envolvimento de partícula a digerir
- Formação do autofagossoma
- Fusão do autofagossoma com o lisossoma
- Formação do autolisossoma que vai degradar o conteúdo
3 tipos: a granel/não seletiva, auxiliada por chaperones e mitocondrial
Iniciação da autofagia não seletiva, e respetivas proteínas intervenientes
- Iniciação
• Para iniciar a autofagia não seletiva, é necessário a formação de uma entidade com dupla membrana (inicialmente aberta e depois fecha)
Fagóforo - entidade inicialmente aberta, formada por lípidos provenientes do recrutamento do retículo endoplasmático;
Proteínas Atg - localizadas no citosol e desempenham um papel importante na maturação do autofagossoma (lipidação);
mTORC - entidade multimérica que se julga ter um papel crucial na regulação do metabolismo intracelular.
Fosforila o complexo associado ao substrato inicial (ULK1, FIP2000, Atgs) em sítios negativos, inibindo-o
AMPK - cínase que fosforila os substratos em sítios positivos, ativando o complexo
Jejum/privação de nutrientes → a célula passa a nutrir-se a si mesma, começa a digerir-se a si própria
com o intuito de sobreviver. Nestas condições, ocorre o bloqueio do mTORC.
• Com o bloqueio do mTORC, o complexo será fosforilado pela AMPK e ativado, iniciando o processo de macroautofagia
Nucleação da autofagia não seletiva, e respetivas proteínas intervenientes
• Aquisição de uma membrana já sustentada (fagóforo já presente)
• Conta com a contribuição de várias moléculas que conduzem à formação do complexo Atg14
• Ocorre a expressão de um fator Bcl-2 anteriormente
bloqueado pelo Beclin 1
Bcl-2 - fator interessante na morte celular programada.
Importante quando a célula não consegue reparar o seu DNA, defeitos que não podem ser reparados. Nesta situação, é uma molécula anti-apoptose.
Elongação/expansão do fagóforo da autofagia não seletiva, e respetivas proteínas intervenientes
• Formação de oligómeros de Atg 12/5/16
LC3 - proteína existente no citoplasma que, por ligação ao Atg4, é ativada através da ligação à fosfatidiletanolamina - forma-se a LC3-fosfatidiletanolamina (LC3-II)
O que é um autofagossoma
organelo temporário com dupla membrana que, quando completo, apresenta a LC3-
fosfatidiletanolamina quer na membrana externa quer na membrana interna
