DINÂMICA DO TRÁFEGO INTRACELULAR Flashcards
No que consiste a secreção constitutiva
Secreção constitutiva - vesículas de transporte saem do TGN regularmente, contendo proteínas membranares e lípidos que
fornecem novos componentes para a membrana plasmática, enquanto algumas proteínas solúveis são secretadas para o meio extracelular.
No que consiste a secreção por estímulo
Secreção mediada por estímulo - presente em células secretoras especializadas onde proteínas solúveis e outras substâncias são inicialmente armazenadas em vesículas secretoras e posteriormente libertadas por exocitose.
Quando ocorre a secreção por estímulo e a constitutiva?
• A secreção constitutiva é contínua e imprescindível para a sobrevivência e manutenção da estrutura celular • A secreção mediada por estímulo encontra-se em células especializadas para secretarem rapidamente substâncias em falta: hormonas, neurotransmissores, enzimas digestivas, etc.
Em que sentido vão as vesículas que o Golgi forma continuamente (?)
Retrógado.
Como se formam corpos multivesiculares
Com a maturação dos endossomas, porções das suas membranas invaginam para o lúmen e formam
vesículas intralumenais. Por causa da sua aparência em microscopia eletrónica, chamam-se corpos
multivesiculares.
O que são as cavéolas, e quais as proteínas que as constituem
Cavéolas - outro tipo de vesícula pinocítica que consegue transportar moléculas através do células
endoteliais que formam o revestimento interno dos vasos sanguíneos
Estão presentes na membrana plasmática de quase todos os vertebrados e pensa-se que formam os lipid
rafts nessas membranas, ricos em colesterol, glicoesfingolípidos e proteínas ancoradas ao GPI.
Caveolinas.
Onde estão armazenados os transportadores de glicose das células adiposas e musculares até que a insulina estimule a célula?
Em endossomas de reciclagem.
Quais os 3 tipos de vesículas revestidas?
• COPI - vesículas que evaginam de compartimentos
do complexo de Golgi
• COPII - vesículas que emergem do ER
• Clatrina - transporte de material a partir da
membrana plasmática e entre compartimentos dos
endossomas/Golgi
Quais as GTPases associadas a cada tipo de vesícula? Onde se encontram estas proteínas quando inativas?
• ARF - proteínas responsáveis por montar
as COPI e clatrina na membrana do Golgi
• Sar1 - proteína responsável por montar as
COPII na membrana do ER
No citosol, ligadas ao GDP.
O que constitui cada triskelion?
3 cadeias
pesadas e 3 cadeias leves de clatrina.
Como se formam as vesículas de clatrina?
- A formação do revestimento induz curvatura na membrana → formação de um coated bud
- Proteínas adaptadoras ligam os triskelions de clatrina e recetores membranares da substância a ser
transportada → recrutamento seletivo de membrana e substância para a vesícula - Outras proteínas que dobram a membrana e proteínas de cisão são recrutadas ao colo da vesícula a
evaginar e é induzida curvatura - O revestimento é rapidamente perdido após a evaginação da vesícula
O que são Clathrin-coated pits
regiões especializadas da membrana que invaginam e formam vesículas cobertas de clatrina. Duram cerca de 1 minuto na célula
Ciclo de endocitose mediada por estímulo em vesículas de clatrina
- Complexos AP2 são recrutados a locais de ancoragem na membrana plasmática e inicia-se a
montagem da clatrina numa malha poligonal - Recetores carregando as cargos são concentrados em pits revestidos através de interações entre sinais
de tirosina nos domínios citoplasmáticos e as subunidades μ dos AP2 - A dinamina (GTPase) é recrutada aos pits por interações com a anfifisina, que se liga ao AP2 e à
clatrina e regula a invaginação da membrana e fissão para libertar as vesículas revestidas com a cargo
para dentro da célula - Sinaptojanina e outros uncoating factors desmontam os constituintes do revestimento e libertam as
vesículas de transporte para a fusão com endossomas
O que é a dinamina, e o que faz (em passos).
Dinamina - GTPase responsável pela libertação de
vesículas revestidas por clatrina
1. Polimerização da dinamina á volta do colo da vesícula
2. Hidrólise de GTP
3. A energia proveniente do passo anterior leva a uma
conformação na dinamina que estica o colo da vesícula até esta se libertar
O que é a HSP70 citosólica
chaperone constitutiva encontrada em
todos os eucariotas que usa energia proveniente da
hidrólise de ATP para a induzir despolimerização do coat
Endocytic pathway for internalizing low-density lipoproteins (LDL)
- Recetores de LDL à superfície da célula ligamse à proteína ApoB na camada fosfolipídica da
LDL e há formação de uma vesícula endocítica - Vesículas de clatrina invaginam utilizando o
mecanismo de dinamina - Libertação do revestimento (endossoma
precoce e fusão com um endossoma tardio). O
pH acídico leva à libertação das partículas LDL
dos seus recetores - Fusão do endossoma tardio com um lisossoma
e hidrólise dos lípidos e proteínas da LDL pelas
enzimas lisossomais - Recetor LDL é reciclado para a superfície da
célula e, devido ao pH do meio extracelular,
sofre mudanças na sua conformação que lhe
permite ligar novamente a uma LDL
O que é a transferrina e a ferrotransferrina. Ciclo da transferrina.
Transferrina - glicoproteína do sangue que transporta ferro do fígado (principal armazém de ferro no
organismo) e do intestino (local de absorção do ferro) para todas os tecidos
Ferrotransferrina - ligação da apotransferrina (sem ferro) a 2 iões Fe3+
1. Ligação da ferrotransferrina ao recetor membranar
2. Interação entre a cauda do recetor e o complexo
adaptador AP2 incorpora o complexo recetor-ligando
numa vesícula endocítica revestida por clatrina
3. A vesícula é despida do seu revestimento
4. Fusão da vesícula com o endossoma tardio e
libertação dos iões Fe3+ do complexo recetorferrotransferrina (devido ao pH ácido)
5. A apotransferrina permanece ligada ao seu recetor
a este pH e são reciclados juntos até à superfície
6. O pH neutro do meio extracelular leva a libertação
da apotransferrina
O que são, qual a função e qual o estado em que podem estar as proteínas RAB?
• GTPases monoméricas • Têm um papel central na especificidade do transporte vesicular • Alternam entre uma membrana e o citosol, dependendo do seu estado • GDP-bound state → inativas e ligadas a uma proteína que as mantém solúveis • GTP-bound state → ativas e associadas a uma membrana ou uma vesícula
Passos da atracagem de uma vesícula de transporte à membrana alvo
- As proteínas Rab ativas interagem com
Rab effectors que permitem a ligação de
ambas as membranas - As SNARE nas duas membranas ligamse, atracando a vesícula e catalisando a
sua fusão - Durante este processo, a RAB-GAP (não
aparece na figura) induz a hidrólise de GTP
pela Rab, ocorrendo a sua dissociação da
membrana e voltando ao citosol como
Rab-GDP - No citosol, fica ligada à GDI (mantêm a
Rab inativa)
Como se formam exossomas, qual a função.
Em certas circunstâncias, os corpos multivesiculares podem fundir com a membrana plasmática e libertar
vesículas intralumenais para o exterior da célula, chamadas exossomas.
Estes corpos possuem funções reguladoras no sistema imunitário - por exemplo: partículas de HIV
encontradas em exossomas podem funcionar como um “cavalo de tróia” capaz de transmitir o HIV ao ser
absorvido por outras células.
