MASSON 060224

Question 1

A quoi sert l’analyse de l’ADN ?

Answer 1

Visualisation
détermine quantité
digestion de cette séquence par enzyme de restriction
clonage
séquencage

Question 2

A quoi servent les enzymes de restriction ?

Answer 2

Pour clonage et/ou rechercher mutation, polymorphismes sans séquencer

Question 3

Pour rallonger l’ADN il faut obligatoirement quoi ?

Answer 3

Une fonction hydroxyle disponible, libre

Question 4

Pour la réplication d’ADN on a besoin d’une ?

Answer 4

ADN polymérase

Question 5

on parle de “spot” quand ?

Answer 5

Dans analyse en micro-puces ADN

Question 6

Les puces à ADN c’est pour quoi ?

Answer 6

La transcriptomique et la génomique

Question 7

Inconvénients des micros puces à ADN ?

Answer 7

Il faut des séquences complémentaires à des séquences connues d’avance ainsi si les mutations, les transcris que l’on cheche à invalider sont méconnus il ya pb

Question 8

Séquencage au débit combien de génération ?

Answer 8

3

Question 9

Avec du séquencage au débit on est capable de séquencer quoi ?

Answer 9

L’intégralité des séquences du génome bactérien ou d’exomes

Question 10

Quel est le facteur limitant du seq haut débit ?

Answer 10

Amplification clonale

Question 11

Comment détecter l’incorporation d’un nucléotide lors du séquençage ?

Answer 11

Par changement de pH

Question 12

Dans le séquençage haut débit 3 ème génération le désoxynucléotide comporte quoi ?

Answer 12

Un hexaphosphate sur lequel est fixé un fluorochrome

Question 13

Exome représente combien de % du génome ?

Answer 13

1,5%

Question 14

Biologie moléculaire def ?

Answer 14

Etude des molécules d’intérêt biologique

Question 15

Quelle est la méthode d’amplification la plus populaire ?

Answer 15

PCR

Question 16

Les grandes étapes de l’analyse de l’ADN ?

Answer 16

Extraction des acides nucléiques
amplification ( PCR, clonage…)
analyse

Question 17

ADN def ?

Answer 17

Toutes cellules eucaryote possédant un noyau et/ou des mitochondries

Question 18

Tyoe d’amplification ?

Answer 18

Ciblée = PCR
OU
globale

Question 19

Les principes généraux de la purification/extraction ?

Answer 19

1 Lyse
2 Précipitation
3 Précipitation
4 Lavages
5 réhydratation et solubilisation

Question 20

Quelle est l’enzyme qui permet d’amplifier l’ADN et d’en faire des copies ?

Answer 20

ADN polymérase

Question 21

Caractéristiques PCR ?

Answer 21

• réplications successives
• amplification exponentielle

Question 22

A quel moment la technique PCR se démocratise car s’automatise ?

Answer 22

Quand il y a développement d’une ADN polymérase résistante aux températures élevées ! TAQ POLYMERASE = “thermus aquaticus”

Question 23

De quoi à-t-on besoin pour une PCR ?
5 ingrédients

Answer 23

ADN polymérase
Source ADN à amplifier = substrat
Désoxynucléotides
Amorces / primers
MgCl2

Question 23

Les 3étapes de la PCR ?

Answer 23

Dénaturation 95°
Hybridation 50-60°
Elongation 72°