Manipulación de genes Flashcards
La inyección del gen de interés en un huevo fertilizado de un animal donados
El gen debe ser insertado antes que la primera división celular de tal modo que todas las celulas del animal contengan el gen
Microinyeccion del DNA en pronucleos en los huevos fertilizados
Modificiones al azar:
+variantes
+ectopicas
+inesperadas
+patrones de expresion suboptimas
Manipulacion de genes
Las celulas madre embrionarias se obtienen del blastocisto
Mantienen las celulas en cultivo de factores inhibitorios de la diferenciacion
Se manipulan via recombinacion homologa
Son reintroducidas en
blastocitos receptores
Modificaciones genéticas en celulas madre embrionicas
Sobreviven pocos huevos
inyectados
El gen se inserta al azar en los cromosomas
No todas las celulas del animal reciben el gen
El gen no se expresa lo suficiente
Problemas de la microinyeccion del DNA en pronucleos en los huevos fertilizados
Núcleo de una celula somatica
Óvulo sin núcleo
Las células deben de estar en la etapa G0/G1
Transferencia nucleo a celula somatica (clonacion)
Repeticiones palindrómicas cortas agrupadas presentes en bacterias y regularmente interespaciadas provenientes de virus que han atacado la bacteria
CRISPR-Cas
- Pequeños fragmentos de DNA viral o plásmidos se incorporan al genoma
bacteriano con gran cantidad de secuencias palindromicas cortas agrupadas y regularmente interespaciadas - Transcripción y generación de un RNA no codificante (pre-crRNA), se procesa mediante unas proteinas (Cas)
- Formación del crRNA maduro
- Ensamble de proteína Cas y el crRNA
Proceso CRISPR-Cas
Manera de manipular el genoma sin alterar la secuencia genética subyacente.
+Mutar DNA
+Insertar DNA
+Remover fragmentos DNA
Función CRISPR-Cas
Aplicaciones CRISPR-Cas
Permitir diseño de terapias genicas
Terapia celulas
