DNA Recombinante Flashcards
Es un mecanismo de defensa de las bacterias frente a la entrada de
ADN foráneo.
Son endonucleasas
Enzimas de restricción
Que hacen las enzimas de restricción con el ADN propio y el foraneo?
Degradan ADN extraño
No degradan el ADN propio
Secuencias de DNA derivadas de más de una fuente
DNA recombinante
Reconocen secuencias palindromicas
Cortan enlaces fosfodiester del DNA en secuencias específica
Producidas por bacterias
Endonucleasas de restricción
Nomenclatura de las enzimas de restriccion
Primera letra del genero de la bacteria
Segunda y tercera letra nombre de la especie
EcoRY13
Escherichia coli I
Reconocen secuencias cortas 4 a 8 pb
El sitio de reconocimiento es igual al sitio de corte
Endonucleasas de restricción tipo II
Cortes en diferente posicion de enzimas de restricción
3 a 5nt de diferencia
Cortes Cohesivos
Cortes simétricos en ambas cadenas
Corte Romo
Molécula dsDNA con capacidad de albergar un fragmento de DNA exógeno.
Vector
Sitio ORI (origen de replicacion)
Sitio multiple de clonación
Marcadores
Clonación de vector
Secuencia especifica que es reconocida por las enzimas de restricción para poder insertar el DNA complementario
Sitio multiple de clonacion
Resistencia antibióticos
Gen lacZ.- β-galactosidasa
Proteína verde fluorescente
Marcador de selección
Origen de replicación
Sitio múltiple de clonación
Marcador de selección
Promotor
IRES (Sitio de entrada a ribosoma)
Secuencia de poliA
Expresión de vector
dsDNA
Circulares
Separados del DNA cromosomico
Bacterias, levaduras
Origen de replicación
Gen de resistencia antibiotica
Región de DNA exógeno
Plásmidos
En que lugar se unen las enzimas del huesped y que inician?
ORI
Inician replicación
Virus que infectan a las
bacterias.
Se modifica genéticamente
Bacteriofagos
Vectores híbridos:
se combina el DNA de un
plásmido con el de un
bacteriófago.
Empaquetamiento=Cos
Cósmidos
Plásmido al que se le incorpora el origen de replicacion de un
fago
No tienen sitios cos
Largos
Fagemidos
BAC (bacterias)
YAC (levaduras)
Cromosomas artificiales
Enzimas modificadas
geneticamente
Reconocen secuencias
especificas en un dsDNA
Dos monomeros:
+Uno reconoce la secuencia
+Nucleasa
Nucleasas programables
Función de las nucleasas programables
Corregir y editar defectos congénitos
Fragmento DNA introducido en un plásmido.
Transformación E.coli
Células hijas tienen el plásmido recombinante
Clonación
Los anticuerpo monoclonales son producidos por:
Tecnología de hibridoma
Que es lo que ayuda a indentificar a las celulas transformadas?
Marcador de selección
Proceso por el cual un DNA foraneo es introducido a una bacteria, se llama:
Transformacion
