LP5 Flashcards
Markeri de suprafață tipici NK
CD 16
CD 56
Markeri de suprafață tipici T helper
CD 3
CD 4
TCR
Markeri de suprafață tipici T citotoxic
CD 3
CD 8
TCR
Markeri de suprafață tipici NKT
TCR
CD 3
CD 56
Markeri de suprafață tipici T ƴɗ
TCR
CD3
Markeri de suprafață tipic Ly B
CD 19
CD 20
De ce semnale sunt induse subpopulatiile de Ly T
- Th 1 - semnale declanșate de infecții cu patogeni intracelulari
- Th 2 - induse de infecții parazitare (helminți)
- Th 17 - induse de semnale declanșate de patogeni extracelulari
Ce secreta fiecare subpopulatie de Ly Th
- Th 1 - IL-2, IL-12, IFN-y, TNF b
- Th 2 - IL-4, IL-5, IL-6, IL-10
- Th 17 - IL-17, IL-22
Ce fel de celule activeaza fiecare subpopulatie de Ly Th
- Th1- macrofage, Ly B
- Th2- eozinofile
- Th17- neutrofile
Limfocitoza fară modificări morfologice:
✓ După exercițiu fizic
✓ Stres
✓ Boli endocrin
✓ După splenectomie
✓ Altele…
Limfocitoza cu modificări morfologice:
✓ Modificări reactive: mononucleoză, toxoplasmoză, bruceloză, tuberculoză, sifilis, HIV, hepatită virală, CMV, sarcoidoză, COVID-19 etc
✓ Un număr crescut de limfocite mari și granulare pot apărea în infecțiile HIV, HBV, EBV etc.
✓ Vacuole pot apărea în limfocitele pacienților cu boli genetice de stocare a glicogenului
✓ Boli maligne limfoproliferative (ex: LLC, limfoame)
Scăderea numărului de celule Th poate apărea în:
✓Infecții recurente/ intercurente
✓HIV / SIDA
✓Leucopenii de diverse cauze
✓Tratament cu steroizi sau medicamente imunosupresoare
✓Exercițiu fizic excesiv
✓Intervenții chirurgical
✓Sarcină
✓Stres (fizic sau psihic/ emoțional)
✓Variații diurne – numărul Th CD4+ scade la prânz și crește seara
O scădere a numărului de celule Tc CD8+ poate apărea în:
✓Lupus eritematos sistemic
✓Tratament cu steroizi sau medicamente imunosupresoare
✓Uneori în unele infecții virale
O creștere a numărului de celule Tc CD8+ poate apărea în:
✓Boli autoimune
✓Infecții virale (ex: EBV, CMV, HIV)
✓Reacții de hipersensibilitate de tip IV (ex: rejet de organ – host vs graft)
Ce este imunofenotiparea?
Imunofenotiparea este o metodă folosită pentru identificarea și clasificarea celulelor pe baza markerilor de suprafață sau din interiorul celulei. Metoda se folosește de reacția dintre antigenul țintit (dacă este prezent) și anticorpi specifici pentru acel antigen, care sunt marcați cu trasori fluorescenți.
Ce poate detecta/ măsura citometria în flux?
- Proprietăți celulare (inclusiv celule bacteriene)
✓ Dimensiune, complexitate internă
✓ Conținut AND/ ARN
✓ Expresie genică (factori de transcripție)
✓ Receptori (de suprafață sau intracelulari)
✓ Proteine (de suprafață sau intracelulare)
✓ Molecule terapeutice - Particule solubile
✓ Macromolecule (ex: proteine)
✓ Vezicule (ex: exozomi)
Aplicații clinice și de cercetare ale citometriei în flux
- Imunofenotiparea de suprafață – detectarea/ cuantificarea markerilor celulari de suprafață
- Imunofenotiparea pentru markeri intracelulari
Imunofenotiparea de suprafață
✓ Caracterizarea populațiilor de limfocite (“limfograma”)
✓ Diagnosticul bolilor hematologice (sânge sau măduvă osoasă)
✓ Detectarea de celule rare (< 1:10.000)
✓ Detectarea unor markeri care sunt factori de risc pentru anumite boli
✓ Receptori de citokine
✓ Alte molecule de interes (în principal în domeniul cercetării)
Imunofenotiparea pentru markeri intracelulari
✓ Cuantificarea ADN și studiul ciclului celular
✓ Studii de apoptoză/ necroză
✓ Studii de cariotip
✓ Alte molecule din citoplasmă
✓ Proteine nuclear (histone)