LP2 Flashcards
Investigarea în laborator a celulelor sangvine
●Hemoleucograma
●Frotiu de sange periferic
●Teste de fagocitoza si alte teste functionale
Caracteristicile hemoleucogramei
-investigatie automata
-folosita pt masurarea si diferentierea cel sanguine
-ofera informatii cantitative
CBC oferă următoarele informații:
• Leucocite (WBC): numărarea și diferențierea acestora
• Numărul de eritrocite (RBC)
• Numărul de plachete/ trombocite (PLT)
• Concentrația hemoglobinei (HGB)
• Hematocrit (HCT)
• Indici eritrocitari (MCV, MCH, MCHCH, RDW)
Indicații pentru efectuarea unei hemoleucograme
●Investigație calitativă a leucocitelor – imunitate înnăscută și adaptativă
●Investigație de rutină pentru capacitatea de transport a oxigenului (HGB)
●Diagnostic suspectat sau monitorizarea anemiei
●Diagnostic suspectat sau monitorizarea infecțiilor
●Suspiciune de afecțiuni hematologice (de exemplu, leucemii)
●Investigația hemostazei (echimoze, hemoragii, tromboze, etc.)
●Monitorizarea diverselor patologii
●Monitorizarea efectului diverselor tratamente asupra măduvei osoase sau a celulelor sanguine
Hemoleucograma – metoda de măsurare a WBC
citometria în flux - o metodă prin care celulele sunt analizate individual prin trecerea “una câte una” prin fața a unul sau mai multe lasere. Lumina transmisă și refractată este analizată pentru determinarea tipului de celulă și a dimensiunilor celulare.
Forward scatter (FSC)
Lumină transmisă “înainte” (180°)
• Este proporțională cu suprafața celulei și deci cu dimensiunea acesteia
Side scatter (SSC)
Lumina refractată sau “împrăștiată” (90°)
• Este proporțională cu gradul de complexitate internă a celulei (ex: organite, granulații)
Hemoleucograma – metoda de măsurare RBC si PLT
focalizarea hidrodinamică și impedanța
Hemoleucograma – metoda de măsurare a HGB
HGB este determinată separat după lizarea eritrocitelor, pe baza unui test colorimetric.
Caracteristicile frotiului de sange periferic PBS
-investigatie microscopica
- coloratie MGG
- ofera informatii referitoare la aspecte calitative ale cel sanguine
Singurele celule eritroide prezente în mod normal în sângele periferic
eritrocitele (99%) și reticulocitele (1%)
Frotiul de sânge periferic (PBS) – aspectul normal
• CBC nu prezintă anomalii.
• PBS arată un număr normal de celule sanguine, cu proporții normale între diferitele tipuri de leucocite (WBC).
• Se observă o cantitate normală (scăzută) de celule sanguine imature (reticulocite și neutrofile nesegmentate / în bandă).
• PLT sunt prezente pe frotiu.
• RBC prezintă dimensiuni, forme și colorit normale.
Policromatofilia
Policromatofilia este cauzată de un număr crescutde eritrocite imature (reticulocite) eliberate din măduva osoasă.
• Pe un frotiu de sânge periferic colorat MGG, reticulocitele apar ca eritrocite ușor mai mari, de culoare gri-albăstruie, datorită colorării moleculelorreziduale de ARN citoplasmatic. Cantitatea normalăde reticulocite (RET) este <1%.
Cauzele policromatofiliei
●compensatorie ca răspunsla liza eritrocitelor (de exemplu, în anemia cu celuleîn seceră, talasemie, reacție la transfuzii de sânge, tumori, infecții, lupus, valvă cardiacă mecanică, splină hiperactivă sau medicamente)
●răspuns la pierderi de sânge (hemoragii)
Cauzele policromatofiliei
compensatorie ca răspunsla liza eritrocitelor (de exemplu, în anemia cu celuleîn seceră, talasemie, reacție la transfuzii de sânge, tumori, infecții, lupus, valvă cardiacă mecanică, splină hiperactivă sau medicamente)
●răspuns la pierderi de sânge (hemoragii)
Policromatofilia – colorația pentru reticulocite
●albastru de metilen nou
●albastru de cresil strălucitor
-Acestecoloranți se leagă de agregatele de ribozomi și mitocondriireziduale care formează material granular aglomerat, numit reticulină.
Reticulocitele in anemie
• În anemie, reticulocitele sunt eliberate din măduva osoasădupă 2-3 zile și ating un vârf în zilele 5-7.
• În anemie, procentul de reticulocite (RET%) poate fi falscrescut din cauza scăderii numărului total de eritrocite(RBC). Astfel, este necesară o corecție a numărului de reticulocite în funcție de valorile hematocritului, calculatăprin indicele de producție a reticulocitelor (RPI = Reticulocyte Production Index).
Formula pentru RPI este:
RPI = RET% x (HCT pacient / HCT normal) x 0.5
Valori normale RPI
0.5-2.5%.
RPI in anemie
• În anemie, RPI crește proporțional cu pierderea de HGB. Dacă RPI este normal sau scăzut în timpul anemiei, răspunsul măduvei osoase la anemie este inadecvat.
Anemia feripriva- hemograma
RBC normal
HGB scăzut
MCV scăzut
MCH scăzut
RDW crescut
+ fier scazut
feritina scazuta
transferina crescuta cu saturatie scazuta
Anemia feripriva - frotiu
Eritrocitele par extrem de variate în formă, dimensiune și culoare, creând un tablou general haotic și dezordonat
●hipocromie
●microcitoza
●poikilocitoza
●anizocitoza
Talasemia definitie
Talasemiile sunt boli genetice care duc la scăderea sintezei de hemoglobină (HGB).
Talasemia- CBC si PBS
Pe hemogramă (CBC) și frotiul de sânge periferic (PBS), talasemia poate semăna cu anemia feriprivă
RBC tinde să fie normal sau chiar crescut; anizocitoza este mai puțin evidentă; iar celulele-țintă sunt o constatare tipică.
Talasemia analize chimice
Deoarece eritrocitele sunt sensibile, talasemia poate duce la hemoliză. Astfel, analizele chimice pot evidenția LDH și bilirubina crescute și haptoglobina scăzută.
Talasemia diagnostic
- testare genetica
- electroforeza hemoglobinei
Anemia megaloblastica - CBC
RBC este scăzut
MCV și MCH sunt crescute
MCHC este normal
RET este scăzut din cauza distrugerii crescute a precursorilor fragili în măduva osoasă
Anemia megaloblastică - PBS
-număr crescut de neutrofile hipersegmentate (vezi imaginea).
-Anizocitoza și poikilocitoza pot apărea, dar nu sunt caracteristice
-RET este scăzut din cauza distrugerii crescute a precursorilor fragili în măduva osoasă
Anemia megaloblastică analyze chimice
Deoarece anemia megaloblastică este un tip de anemie hemolitică intramedulară, nivelurile de LDH pot fi, de asemenea, crescute, dar nu și cele de bilirubină sau haptoglobină.
Anemia hemolitică (hemoliza intravasculară) cauze
-incompatibilitate ABO
-boli autoimune
-intoxicații
-boli metabolice sau cauzate de daune fizice în circulația capilară
Frotiul de sânge periferic – anemia hemolitică
-eritrocitele pot deveni mai mici și sferice (sferocite) = schiziocite
-fragmentemai mici de eritrocite
-reticulocitele (RET) vorfi eliberate în circulație în număr mai mare
Anemia hemolitică- teste biochimice
creșterea LDH și bilirubinei și scăderea haptoglobinei.
Eitrocitele nucleate (NRBC; eritroblaști) normal pe PBS
NRBC pe un PBS pot fi normale doar la nou-născuți, până la 5 zilepost-partum, și mai ales la nou-născuții prematuri. Totuși, la copii și adulți, nu ar trebui să fie prezenteNRBC în sânge. Dacă câteva NRBC scapă din măduva osoasă, acestea sunt eliminate de splină.
Eritrocitele nucleate (NRBC; eritroblaști) pe PBS cauze patologice
●bariera măduvă-sânge este afectată (leucemie, limfom, tuberculoză etc
●nevoieurgentă de eritrocite în circulație (de exemplu, anemie severă, hipoxie)
●disfuncție splenică sau lipsa splinei, NRBC pot apărea și ele însânge, nemaifiind înlăturate.
Fagocitele
❖Neutrofile (NEU)
❖Monocite (MO) și Macrofage (MQ)
❖Celule dendritice – celule prezentatoare de antigen responsabile în bună parte pentru inițiera răspunsului imun specific
Alte celule ale sistemului imun înnăscut
❖Bazofile – conțin granule toxice implicate în reacțiile alergice
❖Mastocite – similare cu bazofilele
❖Celule Natural killer (NK) – implicate în apărarea antivirală și antitumorala
❖Eozinofile – conțin multe substanțe folosite pentru distrugerea paraziților (peroxidaze, proteina bazică majoră, proteine cationice)
Devierea (mieloidă) la stânga
Devierea (mieloidă) la stânga reprezintă o creștere a numărului de celule mieloide imature, în special a neutrofilelor nesegmentate(celule “în bandă”
Pe hemoleucogramă se observă un număr crescut de leucocite (leucocitoză) cu neutrofilie. Analizoarele pot atenționa asupra prezenței unor granulocite imature
Pe hemoleucogramă se observă un număr crescut de leucocite (leucocitoză) cu neutrofilie. Analizoarele pot atenționa asupra prezenței unor granulocite imature
Devierea la stânga poate fi reactivă- celule
●NEU nesegmentate
●eventual metameielocite
●mielocite rare.
Deviere patologică- celule
●promielocite
●mieloblaste
Celule „hiatusul leucemic”
două populații de celule în periferie ●neutrofile normale – provenind din precursori non-maligni
●mieloblaști –celule maligne blocate în acest stadiu de maturare
Teste funcționale pentru evaluarea imunității celulare nespecifice
●Testul de chemotaxie
●Testul de fagocitoză
●Testul de distrugere intracelulară
Interpretarea indicelui de fagocitoză
0-10 – fagocitoză ineficientă (pacient susceptibil la infecții)
10-24 – capacitate de fagocitoză redusă
25-49 – capacitate normal de fagocitoză
50-75 – capacitate crescută de fagocitoză (infecție acută/ inflamație, activare fagocitară in vivo)
