Les types de photométrie

Question 1

Quels sont les types de photométrie?

Answer 1

*Photométrie d’absorption et de transmission
*Photométrie d’émission
*Photométrie de diffusion

Question 2

Que permet la photométrie?

Answer 2

Étude qualitative et quantitative de substances physiologiquement importantes

Question 3

Que peuvent faire les substances à doser?

Answer 3

*Absorber
*Transmettre
*Diffuser (dévier)
*Émettre

de la lumière

Question 4

Qu’est-ce que les méthodes photométriques peuvent mesurer?

Answer 4

*Intensité d’un faisceau lumineux qui traverse la substance (transmission)
*Intensité de la lumière émise par la substance (émission (ex. fluorescence)
*Quantité de lumière diffusée par la substance (ex. turbidimétrie et néphélométrie)

Question 5

Qu’est-ce qui détermine le type de photométrie employée?

Answer 5

Les propriétés d’interactions de la substance dosée avec la lumière

Question 6

Quels sont les types de photométrie pour une substance qui absorbe et transmet de la lumière à une certaine longueur d’onde et proportionnellement à sa concentration?

Answer 6

*Absorption
*Transmission

Question 7

Quel est le type de photométrie pour une substance qui émet une intensité de fluorescence à une certaine longueur d’onde et proportionnellement à sa concentration?

Answer 7

*Émission
*Ex. quantification de l’ADN

Question 8

Quel est le type de photométrie pour une substance qui diffuse une lumière incidente proportionnellement à sa concentration?

Answer 8

*Diffusion
*Ex. néphélométrie

Question 9

Quels sont les principes qui soutiennent la photométrie d’absorption et de transmission?

Answer 9

*Mesure l’importance de l’absorption de la lumière par une substance en solution
*La relation mathématique entre l’absorption et la transmission est A = -logT

Question 10

De quelle manière mesure-t-on l’importance de l’absorption de la lumière par une substance en solution?

Answer 10

*Un faisceau lumineux traverse une substance en solution placée dan un contenant transparent
*Le faisceau lumineux cède une partie de son énergie aux molécules de la substance qui l’absorbent et qui deviennent excitées
*L’intensité du faisceau lumineux transmis diminue
*Le spectrophotomètre mesure la diminution de l’intensité lumineuse
*Cette diminution d’intensité lumineuse est proportionnelle à la concentration de la substance

Question 11

Expliquez la loi de Beer

Answer 11

*Jusqu’à une certaine concentration, l’absorbance augmente de façon proportionnelle à la concentration
*À une certaine concentration, l’absorbance n’augmente plus: il s’agit du plateau

Question 12

Expliquez la loi de Lambert

Answer 12

*Jusqu’à une certaine longueur du trajet optique, l’absorbance augmente de façon proportionnelle à la la longueur du trajet optique
*À une certaine longueur du trajet optique, l’absorbance n’augmente plus: il s’agit du plateau

Question 13

L’absorbance a-t-elle des unités?

Answer 13

Non

Question 14

Décrivez l’interaction de la lumière avec la matière en photométrie d’absorption et de transmission

Answer 14

*Les molécules de la matière absorbent les photons de la lumière
*Cela provoque une réorganisation énergétique interne des molécules (énergie électronique, énergie de vibration, énergie de rotation)
*Un type particulier de molécules (matière) absorbe la lumière de longueur d’onde déterminée d’après le niveau énergétique potentiel de la molécule
*L’absorption se fait par quantité définie d’énergie

Question 15

Quelles doivent être les caractéristiques de la solution absorbante?

Answer 15

*Homogène
*Transparente
*Placée dans un contenant qui ne cause pas de variation d’intensité du faisceau
*La concentration de la solution étudiée doit être inférieure à une certaine limite (selon la loi de Beer)

Question 16

Quelles doivent être les caractéristiques du faisceau lumineux?

Answer 16

*Monochromatique
*Intensité constante et suffisamment grande
*La longueur d’onde de la lumière incidente doit correspondre à la longueur d’onde d’absorption maximale de la solution (selon la courbe spectrale)
*Présence ou absence de lumière parasite

Question 17

Décrivez l’interaction de la lumière avec la matière en photométrie d’émission

Answer 17

*La substance à étudier doit d’abord absorber l’énergie thermique ou lumineuse (souvent les rayons UVs, car plus courte longueur d’onde donc plus énergétique)
*Les molécules deviennent excitée et instable
*Les molécules retournent à un niveau inférieur d’énergie afin d’être plus stables
*La transition électronique cause l’émission d’énergie lumineuse (qui porte une quantité définie d’énergie)
*Mesure de l’intensité de cette émission
*Détermination de la concentration de la solution (à l’aide d’une courbe étalon)

Question 18

Décrivez l’interaction de la lumière avec la matière en photométrie de diffusion

Answer 18

*Étude de substances en suspension dans un liquide
*Phénomène physique de déviation partielle de la lumière (diffusion)
*Les particules en suspension diffusent une partie de la lumière incidente l’empêchant de traverser complètement la suspension
*Diminution de la lumière transmise
*La quantité de lumière diffusée est proportionnelle au nombre de particules en suspension (néphélométrie)
*L’intensité du faisceau lumineux transmis est inversement proportionnel au nombre de particules en suspension (turbidimétrie)

Question 19

Qu’est-ce que la turbidimétrie?

Answer 19

*Mesure de la quantité de lumière bloquée par les particules en suspension
*Mesure de l’intensité du faisceau transmis

Question 20

Qu’est-ce que la néphélométrie?

Answer 20

Mesure de l’intensité de la lumière diffusée à angle droit (90 degrés)

Question 21

Par quel appareil est mesurer la turbidimétrie?

Answer 21

Spectrophotomètre d’absorption moléculaire

Question 22

Par quels appareils est mesurer la néphélométrie?

Answer 22

Fluorimètre ou néphélomètre