La biologie des lymphocytes T (chapitre 8) - Hugues Lacoste Flashcards
Expliquer le trajet des lymphocytes T.
Les lymphocytes T partent de la moelle osseuse et passent par le thymus avant de se diriger vers les organes lymphoïdes secondaires
Qu’est ce qu’un lymphoblaste?
Un lymphocyte plus gros qu’on peut voir dans un frottis sanguin.
Nommer les 3 molécules de surface présent chez les lymphocytes T.
- TCR
- Complexe CD3
- CD4 (Th) ou CD8 (Tc)
Expliquer la structure du TCR.
Composé de chaînes alpha et bêta qui contiennent des régions variables et des régions constates.
Expliquer la structure et le rôle du complexe CD3.
Molécules de transmission de signaux intracellulaires
–>Composé de chaînes delta, épsilon, gamma et zéta
–>La partie zéta se rétrouve dans le cytoplasme
Nommer les 2 composantes de la structure du récepteur CD4 ou CD8.
Cette récepteur contient des régions variables et des régions constantes.
Qu’est ce que la superfamille des immunoglobulines?
Molécules du système immunitaire reliées entre eux (ex: TCR, BCR Ig, MHC, molécules CD)
Nommer les deux facteurs qui créent la spécificité des TCRs.
- Combinaisons variables de chaînes polypeptides
- Régions V, D, J et C
Chaque individu possède un énorme « répertoire » de TCRs différents pour permettre de fournir une protection adéquate contre la multitude d’antigènes qui doivent être détectés par les cellules T
Qu’est ce qui forme le répertoire germinale?
Le répertoire germinale est formé des 1015 possibilités de lymphocytes avec des TCRs créer par les réarrangements de l’ADN (à partir de l’épissage de l’ARN pour chaque chaîne alpha ET bêta) et des régions V, D, J et C. Ceci crée des TCR capable de protéger l’organisme contre une multitude d’antigènes.
–>Le nombre élevé de permutations et combinaisons des régions V, (D) et J au niveau de l’ADN amène la diversité (ou répertoire) de TCR.
Un TCR est-il spécifique pour une seule combinaison de CMH/ peptide?
NON! Les lymphocytes T ne sont pas monospécifiques pour une seule combinaison peptide/CMH mais plutôt pour une même séquence de résidus de contact clés à des positions spécifiques.
Dans image: Mêmes résidus de contact aux mêmes positions dans les 3 différentes séquences d’acides aminées de 3 différents antigènes
Où se fasse le développement et la maturation des lymphocytes T? Qu’est ce qui se passe à la taille du répertoire de TCR ici?
Dans le cortex et la medulla du thymus. Pendant la maturation des lymphocytes, il y a
apoptose de 99% des lymphocytes immatures/thymocytes
–> Réduction de la taille du « répertoire » de TCR –> 1015 →107
Expliquer les 6 étapes impliqués dans la formation de lymphoctes T matures.
- Lymphocyes T immatures produites dans la moelle rentre dans le thymus sans un récepteur CD4, CD8 ou TCR.
- Lymphocyes T immatures vont exprimé les récepteurs CD4, CD8 ou TCR (doubles-positifs).
- Les lymphoctes T immatures vont subir une séléction positive par les cellules épithéliales thymiques:
–>Sélection pour les thymocytes ayant un TCR fonctionnel + affinité modérée pour MHC de classe I ou II
- Les lymphoctes T immatures ensuite subir une séléction négative par les cellules dendritiques thymiques:
- -> Apoptose des thymocytes ayant un TCR auto-réactif + affinité élevée pour MHC de classe I ou II - Perte de soit le CD4 ou le CD8 pour sortir avec des lymphocytes CD4+TCR+ ou CD8+TCR+
- Les thymocytes passent de double-positifs à simple positifs (CD4+ ou CD8+) avant de rejoindre la circulation selon quel type de CMH qu’ils rencontrent
Nommer deux espèces qui ont des lymphocytes T soit doubles positifs ou doubles négatifs.
Porcins : majorité (60%) sont double-positifs
Bovins: une proportion significative sont double-négatifs
Nommer les 3 parties impliqués dans l’activation des lymphocytes T/présentation de l’antigène.
- MHC
- Peptide
- TCR
Où se passe l’activation systémique des cellules T?
Dans le paracortex des noeuds lymphatiques
Expliquer l’activation systémique des cellules T. (5)
- Cellules dendritiques de la peau/muqueuses migrent vers les noeuds lymphatiques
- Les cellules dendritiques présentent les antigènes au lymphocytes T en circulation (500 intéractions/heure)
- 3 signaux d’activation des cellules T
- Signal 1: TCR-MHC/peptide: cause un influx de calcium
- Signal 2:
- CD4-CMHII/CD8-CMHI
- CD28-CD80/86 - Signal 3: récepteur-ligand (cytokines co-activation des JAKs/STATs)
–>Les JAKs vont phosphoryler les STATs pour leur permettre de migrer dans le noyau et initier la transcription de l’ADN
- Transformation des lymphocytes en lymphoblastes
- Sécrétion autocrine d’interleukine 2 (apès l’influx de calcium qui active les lymphocytes T par la voie autocrine + paracrine)
Vrai ou faux: l’Apoquel agit sur les cytokines qui sont dépendent des JAKs.
VRAI
Expliquer pourquoi on utilise la cyclosporine chez des chiens avec des dermatites atopiques.
Cas Clinique:
Démangeaisons et des lésions au niveau de la face (lèvres, yeux, oreilles), de la région périnéale (anus, vulve), des doigts (espaces entre les coussinets, base des ongles) et des grands plis (ventre, aisselles).
Infections secondaires par des bactéries (staphylocoques) ou des champignons (Malassezia).
Le traitement d’un chien atopique repose à la fois sur le traitement de ces infections (antibiotiques, antifongiques) et sur le contrôle des allergies (cyclosporine et glucocorticoïdes).
Le cyclosporine (comme Atopica) cause une inhibition des lymphocytes T et ainsi diminue la transcription d’IL-2 via le complexe avec cyclophiline qui bloque la calcineurine.
La sequestration de calcineurine inhibe la transcription des gènes pour l’expression de l’IL-2
Les lymphocytes T sont les effecteurs de l’immunité adaptative (adaptiveimmunity). Ceux-ci peuvent amener une réponse de type humorale ou une réponse de type à médiation cellulaire (CMI) selon les cytokines présentes dans leur environnement.Concernant l’immunité adaptée, lequel de ces énoncés est clairement faux ?
a) L’activation d’un «TCR» possédant une restriction envers une molécule de CMH (MHC) de classe II amènera une réponse humorale ou une réponse à médiation cellulaire (CMI) via la molécule co-stimulatrice CD4.
b) L’activation d’un «TCR» possédant une restriction envers un CMH (MHC) de classe I amènera une réponse cytotoxique via la molécule co-stimulatrice CD8.
c) Les lymphocytes T circulent à travers les organes lymphoïdes secondaires (ex. noeuds lymphatiques) via le système vasculaire et le système lymphatique. Le principal lieud’activation se fait au niveau du paracortex des nœuds lymphatiques grâce à des interactions spécifiques avec des cellules dendritiques (cellules présentatrices d’antigène) ayant auparavant patrouillé le tissu environnant.
d) L’activation d’un lymphocyte T suite à une liaison de son «TCR» débute par l’influx intracellulaire de calcium (Ca++) et la production autocrine d’interleukine 10 (IL-10) et de TGF-bêta.
d) L’activation d’un lymphocyte T suite à une liaison de son «TCR» débute par l’influx intracellulaire de calcium (Ca++) et la production autocrine d’interleukine 10 (IL-10) et de TGF-bêta.
FAUX! Production autocrine d’interleukine 2 (non (IL-10) et TGF-bêta)
Nommer le cytokine qui aide dans la prolféraion clonale des lymphocytes T.
L’interleukine 2
Nommer 3 fonctions générales des sous-types des Th.
- Immunité humorale (anticorps)
- CMI: Immunité à médiation cellulaire (cytotoxicité)
- Immuno-inhibition (ex: Treg)
Nommer les 3 cytokines impliqués dans l’immunité à médiation cellulaire (cytotoxicité)
IL-2, IFN-gamma et TNF-alpha
Qu’est ce que l’immuno-inhibition?
À l’aide de l’IL-10 et le TGF-bêta, les cellules Th calment la réaction immunitaire (important à la fin de la rxn pour évité des dommages cellulaires/tissulaires)
Nommer quelques caractéristiques des lymphocytes CD4+ Th1. (Récepteur qu’ils intéragissent avec, type d’immunité, cellules qu’ils activent, anticorps produits, cytokines impliqués (3).)
Récepteur qu’ils intéragissent avec: alpha-bêtaTCR-MHC class II
Type d’immunité: Immunité cellulaire
Cellules qu’ils activent: Les CD8+ T cell
Anticorps produits: IgG1 et 3 (ADCC via FcR)
Cytokines impliqués:
IL-2
Interféron gamma
TNF alpha
Nommer quelques caractéristiques des lymphocytes CD4+ Th2. (Récepteur qu’ils intéragissent avec, type d’immunité, cellules qu’ils activent, anticorps produits (3), cytokines impliqués (4).)
Récepteur qu’ils intéragissent avec: alpha-bêtaTCR-MHC class II
Type d’immunité: Immunité humorale
Cellules qu’ils activent: Les CD79+ B cell
Anticorps produits: IgGs, IgA et IgE
Cytokines impliqués:
- IL-4
– IL-5
– IL-9
– IL-13
Qu’est ce que la déviation (polarisation) immunitaire?
Les Th1 et les Th2 s’antagonisent mutuellement et proviennent du même précurseur. Les cytokines qu’elles produisent inhibent la prolifération de l’autre.
Nommer 4 facteurs qui influencent la polarisation de la réponse (est-ce qu’on choisit Th1 ou Th2?)
1. Nature de l’antigène dans l’CPA***
• PAMPs et PRRs impliqués
• Profil cytokines et leurs JAKs/ STATs associées
- Type d’CPA
• Cellule dendritique, macrophage ou lymphocyte B - Stade de la réponse immunitaire
- Environnement tissulaire
- ->Hormones ou cytokines présentes localement
Nommer deux exemples d’antigènes qui stimulent la transformation des lymphocytes T CD4+ naifs en Th1.
Bactéries, virus
Nommer deux exemples d’antigènes qui stimulent la transformation des lymphocytes T CD4+ naifs en Th2.
Levures, pollen
Vrai ou faux: le carcinome spinocellulaire se retrouve plus chez le chat que le chien, et plus chez les chats blancs (13.4 x plus élevé que les chats non-blancs). Elle cause des lésions bilatérales.
Kératose actinique (lumière) ou solaire (soleil)
– Épaississement de la couche cornée de l’épiderme
– Exposition prolongée aux UVB
– Condition pré-cancéreuse
– 20% de risque de progresser en carcinome (Hu)
Vrai
Expliquer le traitement pour les carcinomes spinocellulaires/kératose actinique.
L’immunothérapie est utilisé pour cette maladie. Le médication stimule le Toll-like receptor 7 des cellules de Langerhans pour induire la production de IFN alpha, IL-6 et TNF-alpha. Ces cytokines induisent des réactions Th1.
Nommer les 4 étapes de la cytotoxicité?
- Reconnaissance
- Adhésion
- Cytolyse
- Détachement
Nommer 3 situations où les cellules T cytotoxiques et les cellules NK seraient actives.
- Infection virale
- Cancer
- Greffe
Expliquer la reconnaissance par les cellules NK.
Ces cellules font partie du système inné. Dans les peau et les muqueuses, elles font une reconnaissance non-spécifique. Les cellules NK intéragissent avec 3 récepteurs/substances à la surface des cellules:
- Carbohydrates
- MHC classe I (agit comme un récepteur d’inhibition)
- FcR/IgG (ADCC)
Expliquer la reconnaissance par les cellules T CD8+.
Ces cellules font partie du système adapté. Ils circulent dans la vascularisation et les vaisseaux lymphatiques.
–>La cellule présentatrice d’antigène activé ayant déjà rencontré un CD4+ Th1 ayant sécrété un patron de cytokines de type Th1 (augmentation du MHC classe I et augmentation de IL-12 augmente l’activation des CD8
–> IL-2 et IFN-gamma produits par les CD4+ Th1 avoisinants
–>Reconnaissance spécifique – TCR-MHC classe I (la cellule infecté va diminuer sa production de CMH)
Expliquer la phase d’adhésion chez les NK et les CD8+. (2)
- Formation d’interdigitations membranaires et de jonctions sérrées crée un microenvironnement intercellulaire étroit
- Polarisation de l’exocytose des granules cytoplasmiques
Nommer les 3 molécules impliquées dans la cytolyse par apoptose.
- Granules cytoplasmiques (perforine, granzymes, fragmentines)
- Cytokines (TNF-alpha, +/- IFN-gamma)
- FAS ligand (molécule de surface)
Nommer le rôle de la perforine.
Crée des pores dans la membrane plasmique = lyse osmotique
Nommer le rôle des granzymes.
Active les caspases dans la cellule cible pour initier l’apoptose.
Expliquer le lien entre l’immunologie et le cas d’un histiocytome canin.
Tumeur cutanée des cellules dendritiques de Langerhans
- Solitaire ou multiple
- Chiens de 3 ans et moins
• Condition bénigne
– Excision curative
– Régression spontanée
Dans le rapport de cytologie de cette histiocytome, on va voire que des petits lymphocytes sont présent dans l’échantillon. Ainsi, le système immunitaire est entraîn d’éliminer le tumeur à l’aide d’une infiltration par des cellules immunitaires. Si on regarde le tissu au microscope, on va voir beaucoup de lymphocytes CD8+ qui essayent de progresser la régréssion de l’histiocytome.
Nommer 4 caractéristiques générales des lymphocytes T mémoires.
- Mémoire durable
- Circulation sélective (contiennent des récepteurs «homing», restent où ils sont activés)
- Stimulation périodique
- Réponse immunitaire adaptatif (vaccination, deuxième infection)
Nommer 3 substances qui vont faire la stimulation périodique des lymphocytes T mémoire.
- Réservoir d’antigènes (Ag)
- Réaction croisée avec Ag
- Ré-exposition aux même Ag
Où est-ce que les lymphocytes T gamma delta double négatif se développent? Où est-ce qu’ils se trouvent après leur maturation?
Développement intrathymique
Distribution muco-cutanée (bactéries)
- Épithélium de muqueuse canine gamma delta
- Lamina propria de muqueuse canine gamma delta
- 1/3 des lymphocytes T spléniques du chien
Vrai ou faux: les lymphocytes gamma delta double négatif on un complexe CD3, sont CD4/CD8 négatifs, sont MHC-indépendant et font partie de l’immunité innée.
Vrai
Nommer le type de cellules T gamma delta présent chez les bovins.
Les lymphocytes gamma delta WC1+ (similaire au Th1)
Nommer les 2 molécules qu’on retrouve à la surface des lymphocytes B.
1. BCR=sIg (anticorps)
– s = « surface membrane »
– IgD et IgM: Cellules B naïves
2. Complexe CD79 (similaire au CD3)
– Reconnaissance
• Épitope antigénique intact
Expliquer comment on crée la diversité du BCR.
Les réarrangements des gènes V (D) J grâce à la V (D) J recombinase qui permet l’épissage alternatif de l’ARN pour joindre une région constante mu ou delta pour créer des IgM ou des IgD de surface respectivement.
Nommer les caractéristiques générales des lymphocytes T et des lymphoctes B (types de récepteurs, besoin de présentation ou non d’antigène, type d’antigène reconnus)
Nommer les deux voies d’activation du lymphocyte B.
- Thymus-indépendant (relativement peu commune)
- Thymus-dépendant (relativement commune)
Nommer quelques caractéristiques de la voie d’activation des lymphocytes B thymus-indépendant. (4)
- Antigène composé de polymères à structure répétitive amenant une liaison transversale des BCRs
- Absence d’un Th CD4
- Production d’IgM (sous forme de pentamères, bonne pour la neutralisation)
- Sur 2-7 jours
Nommer quelques caractéristiques de la voie d’activation des lymphocytes B thymus-dépendant. (4)
- Antigène reconnu à la fois par les BCRs du lymphocyte B et par les TCRs d’un lymphocyte T helper
- Présence d’un Th CD4
- Production d’IgG, IgA ou IgE
- Sur 4-10 jours
Nommer les 3 signaux présents lors de la voie de l’activation des lymphocytes B Thymus-dépendant.
- BCR - épitope/antigène
- Signal 2
– CMH II - TCR/CD4+
– CD40 - CD40L - Cytokines co-stimulatrices selon la nature de l’antigène et le patron de cytokines (Th2 > Th1 = activation de la voie humorale= production d’anticorps)
Vrai ou faux: pendant l’activation du lymphocyte B (par voie thymus-dépendant) il y a un changement de classe d’immunoglobuline:
D/M → G, A, ou E de surface et sécrétés si un Th CD4+ est impliqué.
Vrai: cette changement de classe d’immunoglobulines est suivi par une prolifération clonale et une différenciation en plasmocytes et cellules mémoires.
Où se fait l’activation des lymphocytes B?
Dans le paracortex des noeuds lymphatiques.
La follicule primaire se transforme en follicule secondaire avec un centre germinatif (avec sa « dark » zone et sa « light » zone). Il y a prolifération des centrocytes dans la zone sombre et ensuite les centrocytes voyagent à la zone claire ou ils vont subir une sélection.
Si faible affinité/pas fonctionnel= apoptose
Si haute affinité = sélection positif par les cellules dendritiques folliculaires et production de cellules B mémoires et de plasmocytes.
Nommer 4 endroite où on retrouve les plasmocytes.
- Nœuds lymphatiques
- Rate
- Moelle osseuse
- Muqueuses
Expliquer les groupes sanguins chez les chats. (anticorps présents pour chaque groupe sanguin (A, B, AB) + facteur mik
A: anticorps contre B (faible quantité)
B: Anticorps contre A (forte quantité)
AB: pas d’anticorps
Mik: chats Mik- on des anticorps contre Mik
Nommer les 3 tests qu’on va faire avant une transfusion sanguine.
POUR A, B, AB:
- Test d’agglutination à l’aide d’un carte de typage
- Tpage par centrifugation (tube-based test)
POUR Mik + ou Mik -:
Test de crossmatch
Expliquer le test de crossmatch.
Cross-matching pour anticorps du receveur/donneur contre les GRs du donneur/receveur pour déterminer les incompatibilités mineures (Mik)
Vrai ou faux: le changement de classe d’immunoglobulines est un processus Thymus dépendant.
Vrai.
Qu’est ce que le changement de classe d’immunoglobulines?
2e réarrangement de gènes pour maximiser la réponse contre l’antigène. Ça implique la V(D)J recombinase
• Avant: sIgD et sIgM
• Après: sIgG, sIgA ou sIgE
Nature de l’antigène – Th1 vs Th2 (Profil de cytokines)
Qu’est ce que la réponse humorale secondaire?
Réponse qui implique les cellules B mémoires et un changement de classe des anticorps de IgM vers IgG pour avoire une affinité accrue contre l’antigène. On veut développer un plateau durable pour avoir une quantité cst de plasmocytes qui continuent à produire de l’anticorps.
La réponse immunitaire normale est ______(mono ou polyclonale).
Polyclonale:
Plusieurs clones de cellules T et B sont produits pour répondreaux différents épitopes antigéniques. Le sérum du patient contient des anticorps de spécificité et d’affinité variées
NOTE: anticorps monoclonaux produits par un clone de plasmocyte sont uniques et identiques (seulement par production en labo)
Cas clinique:
Domestique à poil court femelle opérée de 12 ans
Vomissements et diarrhée depuis 3 semaines
Référée en médecine interne pour une échographie +/- endoscopie du système digestif
Hématologie, biochimie et urologie commandées
FeLV- et FIV-
Qu’est ce qu’indique le pic monoclonal gamma?
La courbe gamma représente les immunoglobulines polyclonaux du sang. Si il y a un augmentation non uniforme/pic de cette courbe = augmentation d’un seule type d’immunoglobuline (piq monoclonale)
Résultats: on retrouve une augmentation des plasmocytes malins dans la moelle osseuse/rate
Nommer deux méthodes de détection de lymphocytes in vitro.
- Immunophénotypie
- Cytométrie par flux
Nommer deux méthodse d’évaluer la fonction des lymphocytes in vitro.
Tests de stimulations des lymphocytes (B et T)
1. Test de prolifération:
• Mitogènes
– ConA et PHA (T) – LPS (B)
– PWM (B et T)
- Antigène +/- APC
- Anticorps anti-CD3
2. Test de synthèse de protéines:
Analyse du surnageant de culture (ELISA)
– Anticorps
– Cytokines
