KULTUR KALUS DAN SUSPENSI SEL TUMBUHAN

Question 1

Apa yang dimaksud dengan kalus

Answer 1

Massa sel yang relatif tak-terdiferensiasi, hasil proliferasi sel yang pesat

Question 2

Medium dasar untuk inisiasi kalus

Answer 2

MS, SH, Nitsch, WP, Y3

Question 3

Inisiasi kalus pada umumnya memerlukan

Answer 3

fitohormon eksoden, terutama auksin dan sitokinin

Question 4

Proliferasi kalus yang pesat sering terjadi pada jaringan yang

Answer 4

tidak menyentuh media

Question 5

Jenis kalus yang sulit diinduksi jadi organ atau embrio

Answer 5

Kalus lembek dan basah

Question 6

Kalus keras dan kompak terjadi karena

Answer 6

polisakarida dinding sel tinggi lebih banyak pektin dan hemiselulosa

Question 7

Cara mengubah kalus keras menjadi kalus remah

Answer 7

Perlakuan tambahan dengan diberikan auksin kuat dan subkultur berkali-kali

Question 8

Apa yang dimaksud dengan kultur suspensi sel

Answer 8

Jenis kultur dimana sel tunggal/agregat sel tumbuh dan memperbanyak diri dalam medium cair pada lingkungan aseptik dan terkendali

Question 9

Pemeliharaan kultur suspensi sel

• Dibuat dengan memindahkan … ke dalam medium cair pada labu Erlenmeyer.
• Umumnya digoyang (agitated) dengan kecepatan … untuk
  meningkatkan … dalam medium dan memecah ….
• Pertama kali dimasukkan ke dalam labu Erlenmeyer baffles untuk
  ….

Answer 9

• kalus remah yang tumbuh-pesat
• 90-120 rpm, kadar O2, agregat sel.
• memperkecil ukuran agregat sel.

Question 10

Pemeliharaan kultur suspensi sel 2

• Disaring untuk mendapatkan …
• Volume medium … dari volume labu Erlenmeyer.
• Kerapatan awal (initial density) sel sangat penting untuk … dan untuk mendapatkan …

Answer 10

• ukuran sel yang seragam.
• 1/5 – 1/4
• pembentukan koloni, pertumbuhan berulang dari suspensi baru.

Question 11

Pengukuran pertumbuhan kalus

Answer 11

1. Bobot segar
2. Bobot kering
3. Analisis pencitraan
4. Packed cell volume (PVC)
5. Jumlah sel (hemositometer)
6. Cell Volume after Sedimentation (CVS)

Question 12

UJI VIABILITAS SEL
* Pengamatan persentase viabilitas (daya hidup) sel sangat penting untuk
…
* Sel dianggap viabel (hidup) bila mempunyai kemampuan untuk …
* Uji viabilitas berdasarkan pada …

Answer 12

• mencegah tercampurnya kultur dengan sel mati.
• tumbuh dan berkembang.
• integritas membran sel atau aktivitas
  metabolisme sel (enzim).

Question 13

Pewarnaan dengan larutan Evans blue

Answer 13

sel mati warna biru, sel hidup putih

Question 14

Pewarnaan dengan larutan FDA (Fluorescein diacetate)

Answer 14

sel hidup berwarna
fluoresen hijau dengan UV

Question 15

Tetrazolium: MTT (dimetiltiazol difenil tetrazolium bromida) dan TTC (trifenil
tetrazolium klorida)

Answer 15

sel hidup berwarna merah, tetrazolium direduksi oleh enzim dehidrogenase
menjadi formazan (merah)

Question 16

Kultur sel berskala besar
* Peningkatan volume kultur sel dan organ tanaman sangat penting
dalam usaha …
* Penelitian awal skala kecil di … yang
diletakkan pada shaker, namun produksi komersial harus dilakukan di …

Answer 16

Kultur sel berskala besar
* usaha komersialisasi produk.
* labu Erlenmeyer 10 – 100 mL,
bioreaktor.

Question 17

Suspensi sel tanaman berhasil dibiakkan dalam bioreaktor yaitu

Answer 17

kultur sel Echinacea purpurea dan Taxus brevifolia (sebagai anti-kanker).

Question 18

Masalah utama pada Kultur sel berskala besar

Answer 18

perimbangan antara pengadukan untuk mencampur
medium dan mencegah sel menggumpal.

Question 19

Masalah lain pada Kultur sel berskala besar

Answer 19

penggumpalan agregat sel, penempelan sel-sel pada
dinding bejana, dan terbentuk busa (foaming).