Konstruksi Vektor Ekspresi 1 (Restriksi)

Question 1

Isi dari premix dan vol nya

Answer 1

DNA 5mikroL
Sac 1 0,5mikroL
Hind III 0,5mikroL
Buffer 10x 2mikroL
ddH2O 12mikroL

Question 2

Langkah restriksi

Answer 2

Diberikan premix > inkubasi 37C overnight > freezer > elektroforesis

Question 3

Sac 1 memotong dimana

Answer 3

5’ GAGCT^C 3’

Question 4

Hind III memotong dimana

Answer 4

5’ A^AGCTT 3’

Question 5

Urutan dari RB-LB pada plasmid pGWB5

Answer 5

RB-NOsP-NPT II-NOsT-MmSOD-NOsT-HPT-LB

Question 6

MmSOD dipotong oleh

Answer 6

Hind III di bagian RB dan Sac1 di bagian LB

Question 7

Hind III dan Sac1 memotong DNA dengan pola

Answer 7

sticky end (ujung lengket)

Question 8

Fungsi buffer ekstraksi

Answer 8

mempermudah dalam memecahkan sel dan menentukan konsentrasi DNA yang dihasilkan

Question 9

Fungsi ddH2O

Answer 9

membersihkan dan meresuspensi campuran laruta

Question 10

Prinsip kerja dari enzim restriksi endonuklease adalah

Answer 10

menimbulkan pembelahan DNA spesifik situs yang tepat sehingga menghasilkan produk fragmentasi spesifik

Question 11

Jika dalam mix enzim lupa menambahkan enzim Sac1 maka yang terhadi pada vektor

Answer 11

vektor terpotong dan menghasilkan 1 fragmen DNA

Question 12

Gen yang dipotong dari plasmid pGWB5

Answer 12

MmSOD