immunotoxicité Flashcards
déf immunotox
modification indésirable ou inappropriée de la fct et de la structure du système immunitaire après exposition à une substance étrangère
nommer les 4 domaines de l’immunotox
- immunosupression/immunodépression
- immunostimulation
- hypersensibilité
- auto-immunité
de quoi peut résulter l’immunosuppression
l’utilisation de :
- corticostéroides d’immunosuppresseurs
- anticancéreux cytotoxiques
V ou F : l’immunosuppression diminue la résistance aux pathogènes
V
infection + fréquente chez les patients immunocompromis
infection du tractus respiratoire
incidence des infections respiratoires chez les patients immunocompromis
10-50% chez les transplantés
bactéries impliquées dans les infections respiratoires
- S. pneumoniae
- S. aureus
- Candidas
nommer le 2e site d’infection le plus fréquent chez les immunosupprimés
tractus digestif
infection du tractus digestif : manifestations
diarrhées récurrentes
l’immunosuppression amènent d’autres risques d’infection, nommer lesquels
- CNS
- la peau
V ou F : l’immunosuppression augmente le risque de cancers associés aux virus
V
V ou F : une aug de risque de cancer est observée avec certains agents anti-néoplasiques
F, quelque soit le med immunosuppresseur
nommer les conséquences pour la santé des effets immunotoxiques
- rx de type grippal
- syndrome cytokinique aigu
- tempête cytokinique
l’immunostimulation est liée à l’utilisation de quels med
- cytokines
- certains vaccins
- immunothérapie cancer
effet immunotoxique le plus fréquent des med
rx d’hypersensibilité
rx d’hypersensibilité : nommer les manifestations cutanées
- éruption cutanée (érythème)
- photoallergie
- syndrome stevens-johnson et nécrolyse sévère
rx d’hypersensibilité : manifestation cutanée la + fréquente
érythème
mécanisme cellulaire de l’érythème
les signaux de danger liés à l’infection déclenchent les cytokines pro-inflammatoires ce qui mène à l’inflammation (destruction des kératino¢)
rx d’hypersensibilité : photoallergie
exposition aux UV induit la conversion du med en métabolites qui se lient à des macromolécules pour induire une allergie
manifestations cutanées : nbr de jours avant que les manifestations se développent après l’expo au soleil
5-10 jours
manifestations cutanées : symptomes du syndrome de stevens-johnson et la nécrolyse toxique sévère
type grippal avec des érythèmes douloureux qui dégénèrent en lésion
manifestations cutanées : syndrome de stevens-johnson et la nécrolyse toxique sévère peuvent être induits par quoi?
- ipilimumab
- patients covidés traités à l’hydroxychloroquine
rx d’hypersensibilité : nommer la manifestation hématologique
anémie hémolytique
rx d’hypersensibilité : symptômes de la manifestation hématologique
- hémolyse intra-vasculaire avec hémoglobinémie et hémoglobinurie
- douleurs abdos et dorsales
- migraines
- fièvre
- N/V
- choc et dysfct rénale
mécanisme ¢ de l’anémie hémolytique
complexe protéine med/métabolite réagit avec les protéines ou la surface de l’érythro¢ ce qui active le complément
rx d’hypersensibilité : nommer la manifestation vasculaire
choc anaphylactique
choc anaphylactique
accroissement rapide de la perméabilité vasculaire se qui se traduit par une perte d’une grande qt de fluide intra-vasculaire dans l’espace extravasculaire
effet de l’histamine sur le système vasculaire
forte contraction des muscles lisses dans les bronches et autour des artères coronaires
auto-immunité : types d’effets possibles
- systémiques
- spécifiques pour des organes
nommer 3 maladies auto-immunes
- syndrome de lupus
- thyroidites auto-immune
- aplasie auto-immune
syndrome de lupus
perte de tolérance pour les antigènes du soi entraîne l’activation des ¢ B et des auto-AC pour les ADN sb ou db (on produit AC contre chromatine/ADN)
lupus : symptômes induits par les med
- myalgie
- effusions pleurales/péricardiales
- arthrite
- fièvre, perte de poids
- faiblesse muscu
- AC anti-nucléaires et anti-ADN sb
nommer des med pouvant induire le lupus
- minocycline
- hydrazine
- procainamide
thyroidites auto-immunes
impliquent les ¢ T et auto-AC
thyroidites auto-immunes : antigènes majeurs
- thyroperoxydase
- thyroglobuline
auto-immunité : thyroïdites auto-immunes : méds impliqués (5)
- IL-2
- IFN-a
- IFN-b
- alemtuzumab
- inhibiteurs de contrôle des LT
auto-immunité : aplasie auto-immune : expliquer le mécanisme
dév. d’AC neutralisant de l’EPO induisant une anémie sévère (nb de GR très bas)
inhibiteurs des pts de contrôle : effets secondaires/mécanismes (4)
- augmentation de l’activité de LT contre des AG présents au niveau de la tumeur et des tissus sains
- augmentation de la rép humorale (augmentation des niveaux d’ac existants)
- augmentation des niveaux de cytokines inflammatoires
- augmentation de l’inflammation médiée par le système du complément (causée par une liaison directe d’un anti-CLTA4 avec un CTLA4 exprimé sur un tissus sains)
histopathologie
évaluation quantitative/qualitative de la structure des organes lymphoides
histopathologie : organes et paramètres observés
organes : thymus, ganglions lymphatiques, rate, moelle osseuse, plaque de peyer
paramètre : variation du poids, modification de l’histologie ou de l’architecture
histolopathologie de la moelle osseuse et ce qu’on observe
- frottis
- on observe cellularité des lignées érythroides, myéloides, lymphoides et mégacaryo¢
hématologie et chimie clinique : comment faire l’énumération des cellules sanguines
- injection du médicament dans la souris
- prélèvement (au niveau de la queue)
- évaluation des sous populations de cellules sanguins (énumération)
hématologie et chimie clinique : comment faire l’étude des sous-population de lymphocytes périphériques
- injection du med dans la souris
- isolation de la rate ou du sang
- isolation des spléno¢
- incubation avec des mAbs spécifiques pour des marqueurs de sous-pop ou des réactifs en détectant les ¢ en apoptose
- analyse par cytométrie en flux
tests qu’on peut effectuer pour évaluer l’immunité humorale (2)
- essai PFC
- essai ELISA
évaluation des effets sur l’immunité humorale : expliquer le déroulement de l’essai PFC
- injection du méd dans la souris
- injection d’hématocytes de moutons
- attente de 5 jours
- isolement de la rate comprenant les splénocytes, les hématocytes de moutons et le complément de cobaye
- attente de 3h
- évaluation de la chambre de cunningham : comptage des plaques de lyse autour des cellules produisant des AC dirigés contre les hématies
essai PFC : indication d’une plaque de lyse
indique que GB produit un AC spécifique contre l’antigène de mouton
V ou F : l’essai PFC est un des + sensibles et prédictifs d’une immunosuppression
V
principe du test ELISA
- mesure les niveaux d’AC spécifiques produits après immunisation
1. injection du composé dans le modèle murin
2. immunisation : injection du KLH (AG dépendant des LT)
3. prélèvement du sérum des souris et isolation in vitro
3. Anti-immunoglobuline de souris couplés à un enzyme de détection, anticorps spécifique anti-KLH produit par la souris, Ag couplé au plastique (KLH)
tests qu’on peut effectuer pour évaluer l’immunité cellulaire (3)
- prolifération induite par un mitogène
- essai de cytotoxicité
- DHT (delayed type hypersensitivity)
évaluation de l’immunité cellulaire : principe de la prolifération induite par un mitogène
- injection du med dans le rat
- isolation de la rate
- isolation des spléno¢ et ajout de l’agent mitogène (stimule la prolifération)
- incuber 72h
- ajout de HdT
- mesure de l’incorporation du nt radioactif des cellules (signe qu’elles prolifèrent en présence de l’infection)
évaluation de l’immunité cellulaire : 1er essai de cytotoxicité
- injection du composé dans la souris
- isolation de la rate
- isolation in vitro des splénocytes et ajout d’une lignée histo-incompatible inactivée par la mitomycine C
- incubation pendant 5 jours
- incubation durant 4h avec la lignée de cible marquée au chrome 51
- évaluation du nb de cells avec chrome 51 visible (seulement quand les cells sont lysées)
évaluation de l’immunité cellulaire : 2e essai de cytotoxicité
- injection du composé dans la souris
- isolation de la rate
- isolation in vitro des splénocytes et ajout d’une lignée histo-incompatible inactivée par la mitomycine C
- incubation pendant 5 jours
- activation de la procaspase en caspase 3
- évaluation de la mort cellulaire dans les cellules cibles par cytométrie en flux
évaluation de l’immunité cellulaire : principe de l’essai DTH
- sensibilisation de la souris avec un Ag (hématocytes de moutons, KLH, BSA, ovalbumine ou toxoïde tétanique)
- attente d’une période de 7-14 jours
- injection de l’AG dans la patte
- attente de 24h-48h
- mesure de l’enflure de la patte (montre la présence d’une rx inflammatoire)
tests qu’on peut effectuer pour évaluer l’immunité innée (2)
- phagocytose
- activité NK
immunité innée : principe du test de phagocytose par clairance
on utilise un test de CL pour mesurer l’élimination d’un pathogène par des phagocytes :
1. injection d’une suspension de listeria monocytogenes dans la souris traitée
2. attente de 2 jours
3. prélèvement de la rate
4. titration des L. monocytogenes
5. évaluation des LM restants (moins de L.M. restants dans le petri indique plus de phagocytose de pathogène)
immunité innée : principe du test de phagocytose par cytométrie en flux
- injection du modèle murin avec le médicament
- isolation de la rate
- isolation in vitro des splénocytes
- par cytométrie en flux, détection des particules phagocytées
immunité innée : principe du test de l’activité NK
- injection du modèle murin avec le médicament
- isolation de la rate
- isolation in vitro des splénocytes
- incubation avec des cellules cibles (par ex marquées au chrome 51)
- évaluation du rapport cellules effectrices/cibles
- mesure de la radioactivité libre
essai débattu entre les agences réglementaires
activité NK
effets sur la résistance de l’hôte : expliquer le modèle d’infection expérimentale
- injection IV d’une suspension de LM dans la souris (traitée)
- attente de 5-6 jours
- sacrifice des rongueurs pour isoler la rate et le foie
- titration des LM
- évaluation des restants
principe de l’essai PLNA
- injection du composé + véhicule dans les plantes des deux pattes postérieures
- attente de 7 jours
- prélèvement des ganglions lymphatiques drainants
- mesure des poids des ganglions drainants le composé ou le véhicule
évaluation préclinique du potentiel de rx d’hypersensibilité : expliquer la difficulté d’évaluation en toxico préclinique (4)
- mécanisme souvent inconnu
- rx souvent en rép à un mtb du composé ou à un complexe mtb-prot
- concerne en général une faible fraction des personnes traitées (à cause de la variation inter-individus)
- difficulté à obtenir des modèles animaux prédictifs
nommer les tests de prédiction de l’hypersensibilité médiée par l’IgE
- modèles d’anaphylaxie systémique
- anaphylaxie passive cutanée
- induction de rép IgE spécifique
tests de prédiction de l’hypersensibilité médiée par l’IgE : principe du modèle d’anaphylaxie systémique
- sensibilisation du cochon d’inde par injection du composé couplé à un porteur
- pause de 7 jours
- test de provocation par injection IV
- on mesure les désordres respiratoires, convulsion et mort
tests de prédiction de l’hypersensibilité médiée par l’IgE : principe du test de l’anaphylaxie passive cutanée
- sensibilisation par injection sous-cutanée du composé couplé à un carrier dans un cochon d’inde ou une souris
- attente de 7 jours
- transfert du sérum à un animal naïf
- injection d’un colorant (bleu d’evan) et provocation à l’aide du composé
- évaluation des tâches dues à l’extravasation du colorant (extravasation = transfert d’IgE dans le cas d’activation des mastocytes par des complexe AG-IgE)
expliquer le fonctionnement du test d’induction d’une rép IgE spécifique
- sensibilisation par injection sous cutanée ou iv du composé couplé à un carrier (ou par la voie respiratoire) dans le modèle murin
- prélèvement
- mesure du niveau d’IgE spécifique par ELISA
tests pour mesurer l’hypersensibilité médiée par les ¢ T
- Magnusson et Kligman
- LLNA
hypersensibilité médiée par les ¢ T : principe du test de Magnusson et Kligman
- dans l’épaule rasée d’un cochon d’inde, injecté sous cutanément 0,1 mL du véhicule, du composé seul ou avec adjuvant (sensibilisation)
- attente de 7 jours
- rappel à l’aide d’un patch appliqué pour 48h
- attente de 15 jours
- provocation à l’aide d’un patch appliqué pour 24h
- mesure de la surface d’érythème et d’oedème
d’hypersensibilité médiées par les cellules T : expliquer le fonctionnement du test LLNA
- pendant les jours 1,2,3, application du composé ou du véhicule sur le dos de chq oreille
- au jour 6, injection IV de thymidine H3
- attente de 5h
- prélèvement des ganglions lymphatiques auriculaires et de mesure de l’incorporation de la thymidine (signe de prolifération cellulaire)
TGN1412 : complexe qui induit l’apoptose ou l’anergie
APC comprenant un domaine MHC connecté au TCR et CD4 de LT
TGN1412 : complexe qui induit la prolifération, différentiation et fonctions effectrices
APC avec :
CD80/86 lié à CD28 sur LT
MHC lié à TCR et CD4 sur LT
TGN1412 : mécanisme d’action
AC dirigé contre CD28 agissant comme super agoniste
TGN1412 : effet de l’administration chez des rongeurs
induit une activation et expansion préférentielle des cells TH2 et Treg
TGN1412 : effet bénéfique sur les rongeurs (EAE) dans quel cas
- sclérose en plasque
- arthrite induite par adjuvant
TGN1412 : dans quel cas on obtient un effet toxique
si on élimine les Treg
TGN1412 : comment a été traité la tempête cytokine induite
corticostéroïdes (effet immunosuppresseur)
TGN1412 : signes cliniques partagés par les volontaires
- fuite capillaire
- IRA
- détresse respiratoire
- coagulation intravasculaire disséminée
- érythème diffus
- desquamations tardive
- lymphopénie, monocytopénie, thrombocytopénie
- dommages hépatiques
- maux de tête
10 N/V, diarrhées
TGN1412 : cytokines impliquées dans la tempête cytokinique
- TNFa
- IFNy
- IL-1B
- IL-2
- IL-4
- IL-6
- IL-10
- IL-12
TGN1412 : quelles cellules sont coupables de la tempête cytokinique
LT CD4 et TEM
TGN1412 : effets sur les volontaires à long terme (6)
- prob de mémoire, expression verbale et attention
- anxiété, maux de tête et troubles de vision
- anomalies au niv des cells immunes et cytokines
- présence d’IL-17
- diarrhées et augmentation des Tyd
- IgE et prurit
fonctionnement des CAR
- on remplace les chaînes a et b par des domaines reconnaissant des protéines natives
TCR présent sur tt les lymphocytes, il reconnait l’AG et s’y fixe (ag présenté)
MHC1 présente un AG à une cell T qui s’y fixe et permet un rép adaptative - CAR va remplacer TCR : il va reconnaître l’AG même lorsque celui-ci n’est pas présenté par une cellule présentatrice
CAR : avantage par rapport à TCR, dirigé contre l’AG même en absence de MHC (donc reconnait AG même quand il n’est pas présenté par des cellules)
CTL019 (tisagenlecleucel) fonctionnement
CAR T cells dirigées contre CD19, visant les précurseurs des lymphocytes B dans la leucémie lymphoblastique aigue (ALL) réfractaire
cells qui ciblent CD19 (contre LB cancers mais aussi normal)
induit la lyse et induit la production de cytokines inflammatoires par d’autres cellules immunitaires
tisagenlecleucel : effets secondaires importants (3)
syndrome de relargage des cytokines
toxicité neurologique
décès en essai clinique
blinatumomab : effets secondaires (2)
- syndrome cytokinique aigue
- neurotoxicité
comment fabriquer tisagenlecleucel
- prélèvement des cellules sanguines d’un pt souffrant d’un lymphome à large cellules B diffus
- plasmaphérèse (séparation du plasma et du sang)
- isoler les PBMC
- activation des cellules par anti-CD3 et IL02
- attente de 6-8 jours
- transduction avec un rétrovirus combinant codant pour le CAR
- Réadministration des cellules au patient
