Hoofdstuk 4 Microscopy; staining; Classificatie Flashcards
In wat worden Micor-organisme gemeten?
-Micrometer µm (10-6)
-Nanometer nm (10-9)
Wat is Microscopy?
Het gebruik van licht of elektronen om objecten te vergroten
Wat voor soorten licht worden gebruikt bij microscopy?
-Visible light (400nm - 700nm)
-Ultraviolet (UV) light
Welke soorten Wavelength of Radiation zijn er?
-Gamma rays
-X-rays
-UV licht
-Zichtbaar licht
-Infra-rood
-Micro-wave
-Radio en telivisie golven
Van wat is zichtbaar licht gemaakt?
Een smalle band van straling
Wat is Magnification?
Schijnbare toename in grootte van een object
Aangewezen als een cijfer en X (keer)
Hoe gebeurt het vergroten bij Magnification?
Met glazen lenzen (lichtmicroscopie) of magnetische lenzen (elektronenmicroscopie)
Wat is Resolution?
Oplossend of scheidend vermogen
-Mogelijkheid om 2 uit elkaar gelegen punten als afzonderlijke punten te onderscheiden
-Hoe beter de resolutie, hoe beter punten van elkaar onderscheiden kunnen worden
Wat is het scheidend vermogen van het Oog?
100µ of 0.1 mm
Wat is het scheidend vermogen van de beste lichtmicroscopen?
0.2µm
Van wat is De Resolution afhankelijk?
-De golflengte van de elektromagnetische straling
-Numerieke apertuur van de lens (vermogen van de lens om licht te capteren)
Wat is de Formule van Resolutie?
R = 0.61 x Golflengte gedeeld door de Numerieke apertuur
Wat doen kortere golflengte?
Geven een betere resolutie
Wat is Contrast?
Verschil in lichtintensiteit tussen 2 objecten of tussen een object en zijn achtergrond
Voor wat is contrast belangrijk en hoe kan je het verhogen?
-Voldoende contrast is belangrijk voor een goede resolutie
-Kleuren van objecten verhoogt het contrast met de achtergrond
-Gebruik van licht in fase kan ook het contrast verhogen
Wat is een Licht microscoop?
Elk type microscoop die licht gebruikt om monsters of stalen te observeren
Wat zijn de verschillende types van licht microscopen?
-Helderveld microscopen
-Donkerveld microscopen
-Fase-contrast microscopen
-Differentiële interferentie contrast microscopen
-Fluorescentie microscopen
-Confocale microscopen
Wat zijn helderveld microscopen?
Donkere voorwerpen zijn zichtbaar tegen een heldere achtergrond
Geef kenmerken van een Enkelvoudige microscoop (helderveld)
1 enkele lens
Vergelijkbaar met vergrootglas
(vb microscopen van antoni van leeuwenhoek)
Hoe werken samengestelde microscopen? (helderveld)
-Meerdere lenzen voor vergroting
-Licht gaat door specimen en komt zo in het objectief terecht
-Bezitten 1 of 2 oculaire lenzen (monoculair, binoculair)
-Totale vergroting (vergroting objectief x vergroting oculair)
-Meestal condensor aanwezig (bundelt lichtstralen door het specimen)
Voor wat wordt Immersie-olie gebruikt bij samengestelde helderveld microscopen?
-Vergroot de resolutie
-Licht kan in lucht zo sterk gebonden worden dat het niet wordt opgevangen door het objectief met de sterkste vergroting - Immersie olie gaat deze breking tegen
Wat zijn Donkerveld microscopen?
Heldere voorwerpen zijn zichtbaar tegen een donkere achtergrond
Wat zijn kenmerken van Donkerveld microscopen?
-Enkel licht dat gebroken of gereflecteerd wordt door het specimen komt in het objectief terecht
-Verhoogt contrast
-Bruikbaar om kleine en kleurloze cellen te onderzoeken
Wat doen Fase-contrast microscopen?
-Accentueert de diffractie van het licht dat door een specimen gaat (contrast wordt gecreëerd door lichtgolven die uit fase lopen)
-Laat onderzoek van levende organismen toe