Histopatologi Flashcards
hvilke farge metoder bruker man for lever, nyrer og lunger, (som vi har om)
- Lever: GOMORI fargemetode (retikulære fibre)
*Nyre: PAS fargemetode (basalmembraner) - Lunge: Perls fargemetode (jern)
hvorfor og når bruker man spesialfargemetoder?
- Benyttes i praksis, når morfologiske metoder (HES, HE) ikke gir
tilstrekkelig informasjon om vevets sammensetning - Ønsker å se på spesifikke strukturer, eks retikulære fibre, basalmembraner
- Er spesifikk struktur normal eller unormal? eller er det unormale mengder av
molekyler/proteiner?, eks jern
Disse fargemetodene baseres på molekylære egenskaper i vevet og
danner grunnlag for ulike kjemiske reaksjonsprinsipper
hva er reaksjonsprinsippet for GOMORI, PERLS og PAS?
- GOMORI: farge basert på Red/Oks reaksjoner
- Perls: farge basert på Substitusjonsmetode
- PAS: farge basert på Periodic Acid Schiff`s reaksjon
ved hvilke tilstander kan man få endring på retikulinmønstre i leveren?
Gomori sølvsaltmetode for retikulære fibre
* Visualisering av leverens
mikroarkitektur
* Endringer fra normalt retikulinmønster
* Cirrose
* Nekrose
* Cancer
* regenerering
forklar reaksjon med sølvløsning og reduksjon i den argyrofile metoden
Proteinene på de retikulære fibrene har en del karbohydrater. Først tilsetter man noe som får karbohydratene til å bli til en aldehyd. Deretter gjør man et par trinn og man kan tilslutt få sølvioner til å binde seg til aldehydene med svake bindinger. Ved tilsettelse til formalin vil den virke som en katalysator som får flere sølvioner til å binde seg til aldehyde og dermed sterkere farge som kan observeres
hvorfor tilsettes gull molekyler etter tilsettelse av formalin?
etter formalin vil fargen til molekylet være for svart. vil ha store svarte streker som gjør det vanskelig å se på reikulocytt strukturen. tilsetter gull slik at den blir redusert så fast sølv blir til sølvioner og man får tynnere svarte streker
forklar litt om de forskjellige lagene til basalmembranen i glomerulus
- Lamina rara
- Karbohydratkomplekser
- Kontinuerlig med glycocalyx på overflateceller
- Lamina densa
- Flettverk av microfibriller
- Kollagen type IV, mindre mengde type V, assosiert med stor mengde strukturelt glykoprotein
mindre mengde proteoglycan - Lamina reticularis
- Kollagen type I og type III
- Fibrøse elementer
- Kontinuerlig med underliggende bindevevsfibre
hvordan fungerer PAS?
PAS (Periodic Acid Schiff’s)
Trinn 1: Oksidasjon av karbohydrater med periodsyre: dannelse av aldehydgrupper
Trinn 2: Påvisning av aldehydgrupper med Schiff’s reagens
* Schiff’s reagerer med aldehyder
* fjerning av svoveltrioksyd fra fargemolekylet gjendanner trifenylmetankromoforen og gir et farget produkt
* Skylling i vann- fjerner syre, gir økt fargeintesnitet
* Kontrastfarges med Hematoksylin
hvordan ser et PAS resultat ut?
- Positiv reaksjon- farges magenta
- Homoglykaner (homopolysakkarid)
- Glukoproteiner
- Nøytrale proteoglykaner
- Negativ reaksjon- farges svakt rosa
- sure proteoglykaner
- Kjerner- blå
hva brukes PERLS til?
Akkumulering av jern i
makrofager grunnet
fagocytering av erytocytter
Påviser blødning I
alveolene =patologisk
tilstand
med andre ord: Ved ødem kan man få blod i luftsida av alveolene, makrofagene i alveolen kan da fagocytere erytrocyttene og dermed også jern. Makrofager kan da få en del jern i seg, dette kan perls vise
hvorfor vil ikke erytrocytter farges av perls men makrofager gjør det?
Det er bare fe3+ som blir farget. Erytrocytter vil ikke farges de da har fe2+
hvordan kan man være sikker på en perls prøve er sann eller ikke?
Må ha med en positiv kontroll (ofte fra hematokromatose pasienter) som vi vet inneholder mye jern. Hvis denne er positiv ved perls farging og prøven er negativ vil det bety at denne pasienten ikke har patologisk tilstand
hvordan fungerer perls testen?
I reaksjonen dissosierer jernet fra proteinet (som er vevsfiksert) i den sure jerncyanidløsningen
og det dannes umiddelbart et blått presipitat som inneholder uendelig kompleks av jern og ferrocyanid.
* Syre i ferrocyanidløsning bidrar til dissosiering av jern (3+) fra proteinet (A),
jernet danner umiddelbart tungtløselige komplekser med ferrocyanid (A)-
med andre ord: Jern vil løsne seg fra proteine i vevet og feste seg til cyanid komplekse. Dette er tungtløslig og setter seg vedsiden av området der det reagerte, dette kan vi da se. Akuratt det samme som påvisning av aktivert kinase, dab og peroksidase løsning
hvilke pigmenter kan man få ved perls farging?
- Artefakt pigmenter- kunstig framstilt under prosess..
- eks. formalinpigment (sur formaldehyd hematin)
- fiksering med sur formalin
- Spesielt blodig vev, derivat fra hemoglobin.
- Exogene pigmenter: finnes i vevet men er ikke normal del av vevettilført utenfra
- Eks. Karbon- (kull-partikler, asbest, tatoveringspigmenter)
- Endogene pigmenter: produkt av kroppens metabolisme-normalt eller
overprod. ved sykdom - Hematogene: hemosiderin, ferritin,
- Autogene: melanin