Hibridación Flashcards
Técnica utilizada en biología molecular
Hibridación
unión de hebras del DNA
Sonda
fragmento de DNA o RNA monocatenario de secuencia complementaria a la diana que se marca con una molécula reportera
En qué situación se utiliza alto rigor de hibridación?
cuando se conocen las secuencias y se favorecen las interacciones de secuencia completa
En qué situación se utiliza bajo rigor de hibridación?
cuando la secuencia se desconoce, y se tiene favorece menor interacciones (complementariedad parcial)
Tipos de hibridación
en fase líquida, soporte sólido, in situ
Cuando se realiza una hibridación en soporte sólido?
cuando no se conoce el genoma de la muestra
Hibridación in situ
las sondas se colocan directamente sobre los cultivos
Cómo se hace una sonda sintética?
una PNA se hace por síntesis de oligonucleótidos
Cómo se construye una sonda?
- métodos convencionales (DNA o RNA)
- Sintéticas
- a partir de proteínas
formas directas de marcar sondas
por compuestos fluorescentes o radioactividad
formas indirectar de marcar sondas
por detección colorimétrica o por quimioluminiscencia
métodos enzimáticos de marcar una sonda
nick translation, primer al azar o por fosforilación
