Hépatite C : modèles d'étude Flashcards
Citer trois modèles d’étude de l’entrée du virus.
1) VIrions isolés du sérum de patients infectés, pour identifier les constituants.
2) Purification de glycoprotéines d’enveloppe recominantes, purifiées en système bactérien : permet l’ID des récepteurs cellulaires importants.
3) HCV-LP
Comment sont obtenues les HCV-LP ?
En surexprimant des protéines structurales (core, E1 et E2) dans des cellules d’insecte grâce à un vecteur baculovirus puis autoassemblage.
Quelles sont les caractéristiques des HCVLP ?
Elles sont morphologiquement, biophysiquement et antigéniquement pareil que celles des virions, et peuvent se lier au récepteur pour pénétrer dans les cellules.
Définir pseudotype.
C’est un phénomène naturel observé lors d’une co-infection par deux virus enveloppés, aboutissant au mélange de deux phénotypes.. Les pseudotypes auront les deux types de glycoprotéines membranaires
Lorsqu’un virus arborant un pseudotype se reproduit, quel sera le phénotype des nouveaux virions ?
Il sera identique aux virus parentaux, car ils ne sont pas génétiquement modifiés.
Qu’est-ce que le pseudotype VSV/VHC ?
C’est des virions VSV enveloppés, mais avec l’hétérodimère E1E2 (du VHC) dans l’enveloppe virale.
Quelles conditions sont nécessaires à l’obtention du pseudotype VSV VHC ?
G ne doit pas être exprimée, et E1 et E2 doivent être délétées de leur partie TM.
Pourquoi est-ce que E1 et E2 doivent perdre leur partie TM poru former le pseudotype VSV VHC ?
Parce que VSV bourgeonne au niveau de la membrane plasmique et non au niveau de la membrane du RE. Or, TM sert d’ancre pour rester dans le TE:
En pratique, comment produire un VSV VHC ?
On infecte les cellules avec VSV Ts et on fait un apport de E1 et E2 en trans.
Qu’est-ce que le pseudotype HCVpp ?
Capside rétro ou lentivirale, enveloppe avec E1 et E2, possèdant un gène rapporteur, et ayant un cycle unique de réplication.
A quoi sert le modèle HCVpp ?
Identifier les récepteurs des jonctions serrées, CLDN1 et OCLN.
Quel modèle de la réplication virale a-t-on ?
Réplicons subgénomiques et génomiques : ce ne sont que des génomes, éventuellement dotés de gènes rapporteurs ou de sélection.
Qu’est-ce que HCVcc comme modèle ?
Un clone infectieux JFH-1 capable de réplication autonome en culture cellulaire, produisant des particules infectieuses.