GRAM + Flashcards
Genre staphylococcus
- 32 espèces différentes (S. aureus, S. intermedius, S. hyicus)
- Forme grappe de raisin
- Croissancre dans milieux non enrichis
- colonies moyenne blanches ou dorées
- Anaérobies facultatifs
- Immobile
- Pas formation de spore
- Test oxydase négatif
- Test catalase positif
- Production de coagulasse
- Résistant dans l’environnement
- S. aureus, S. intermedius produisent hémolyse mais pas S. hyicus
3 espèces à connaitre des Staphyloccoccus
S. aureus, S. intermedius, S. hyicus
Staphylococcus aureus
Milieux selectif d’identification du Staphylocoque doré ?
- Gélose hypersalée au mannitol
Rose => Jaune
- Beta-hémolyse donc zone de lyse claire sans changement de couleur marqué autour colonie dans culture en gélose au sang
Exigence en oxygène des staphylococcus ?
Anaerobie facultative
Staphylococcus :
Catalase :
Oxydase :
Hemolyse :
Coagulase :
Staphylococcus :
Catalase : positif
_Oxydase :_négatif
Hemolyse : oui (sauf hyicus)
Coagulase : positive ou negative selon espèce
Aureus positif
Intéret catalase ?
Pour les bactéries à Gram positif, la recherche de cette enzyme permet de différencier :
- les bactéries catalase + : par exemple le genre Staphylococcus
- les bactéries catalase - : par exemple le genre Streptococcus
(Gram- tous catalase)
Oxydase
Les bactéries possédant l’enzyme oxydase peuvent oxyder le N-diméthyl-paraphénylène diamine, ce qui donne des produits violacés.
▪Apparition d’une tache violette→la bactérie est oxydase+
▪Si rien n’apparaît→bactérie est oxydase-
Coagulase
La coagulase provoque la coagulation du plasma sanguin. C’est un facteur de virulence (Présent chez S.aureus.)
La pathogénicité d’une espèce est généralement corrélée à la production de coagulase.
Facteur de virulence
produit ou structure d’un micro-organisme qui contribue au pouvoir pathogène (estimé par la quantité de cas mortels et/ou à la capacité d’un micro- organisme d’envahir les tissus de l’hôte et de provoquer une maladie).
Habitat de staphylococcus
- Flore commensale des animaux à sang chauds
(la peau, les muqueuses, tractus digestif, uro-génital et respiratoire (20 à 50% de la population est porteur))
air, sols, poussières et surtout du matériel de traite (réservoirs secondaires de staphylocoques).
En élevage, les principaux réservoirs des staphylocoques sont :
- les mamelles des animaux infectés (présence des bactéries dans les mamelles et excrétion dans le lait)
- la peau de la mamelle et des trayons, particulièrement lorsque celle-ci s’avère lésée (gerçures, crevasses, plaies, blessures) ou surinfectée.
→Germes opportunistes causant des infections pyogènes
(Suppuratives)
Infections
- Mammites (nécoses,gangrènes)
- Dermatites
- Arthrite du jeune animal
- maladies nerveuse (méningite)
- Epidermis exhudative (S.hyicus)
- Pneumonie
- Affection hépatique
- Orchite (inflammation du testicule)
- Avortement occasionnel
- Pyohémie par les tiques (S.aureus)
- INTOXICATION ALIMENTAIRE
Diagnostique Staphylococcus
Diagnostique à partir de prélèvements : - sécrétions
- blessures
- abcès
- sang
Puis analyses microscopiques et biochimiques →Caractéristiques des colonies
→Hémolyse ou non
→Coagulase et catalase positif
→Pas de croissance bactérienne dans milieu MacConkey (contient de la bile et permet d’identifier les Enterococcus intestinaux)
→profile biochimique
Traitement Staphylococcus
- Antiobiotiques
Mais résistance (S.aureus)
- Prévention:
→Conditions d’hygiène générales et du matériel de traite
→Désinfection correcte du cordon pour éviter l’infection des animaux nouveaux-nés
→Vaccination disponible pour certaines espèces mais pas toujours efficace
Streptococcus : Points essentiels
✓ Forme: en chaîne
✓ Croissance dans des milieux enrichis
✓ Colonies petites normalement hémolytiques et translucides
✓ Anaérobies facultatifs
✓ Habituellement immobiles
✓ Test oxydase négatif
✓ Test catalase négatif
✓ Susceptibles à l’assèchement (importance du milieu de transport)
✓ Trés exigeant puisqu ́ils nécessitent sang ou sérum dans le milieu de culture
✓ Hémolyse en agar sang
✓ Pas de croissance en agar MacConkey
Quels sont les 3 groupes de streptococcus et apparence macroscopique
Streptococcus identification microspique
Gram+
Sphérique ou ovoïde, par paire ou en chaine
Non mobile
Non sporulante
Test pour identifier Streptococcus ?
Camp-test contribue à l’identification des Streptococcus agalactiae (B) (et des Listeria) (mis au point par Christie-Atkins-Munch-Pertersen)
Exigence en oxygène des streptococcus ?
Anaerobie facultatif
(fermentatif)
Streptococcus :
Catalase :
Oxydase :
Hemolyse :
Micro-organismes exigeants
Catalase : négatif (≠ des Staph)
Oxydase: négatif
Hémolyse : fréquente
→Hémolyse a , hémolyse b…
NB. Les Streptocoques à hémolyse a sont généralement moins pathogène que ceux à hémolyse b
Sensibles à l’assèchement : mise en culture rapide
Structure antigénique: la présence de différents antigènes dans la paroi des streptocoques permet de les classer en groupes antigéniques (groupe de Lancefield : A, B, C, D, E,…)
Streptococcus Habitat
Flore habituelle des animaux:
- Cavité buccale
- Voies respiratoire
- vagin→contamination des jeunes à la naissance
- Tube digestif (entérocoques considérés maintenant comme faisant partie d’un genre à part, le genre enterococcus)
(près de 50% des hommes sont porteurs)
→Infections opportunistes et suppuratives (cheval, vache, porc…)
Streptocoques Infection
Les streptocoques sont, après les staphylocoques, les bactéries pyogènes n° 2.
Ils causent :
- Infection respiratoire - Pneumonie
- Caries
- Mammite bovine ( S.agalactiae, S.dysgalactiae, S.uberis)
- Méningite porcine (S.suis) – septicémie chez le nouveau né - Orchite (inflammation du testicule)
- Arthrite du jeune animal→boiterie
- (avortement occasionnel)
- Oreillon équine (S.equi)
- Infections (S.suis)
Streptococcus Diagnostique
Le diagnostic peut se faire de manière indirecte ou directe :
- dosage des anticorps dans le sang de l’animal (réponse immunitaire)
- en mettant en évidence le germe (ex : prélèvement du liquide synovial, pus, de gorge…)
Analyses microscopiques et biochimiques:
- Caractérisation de l’hémolyse (alpha ou béta)
- Détection antigènes de paroi particulier (classification de Lancefield permet de classer les différents strepto suivant un antigène polysaccharidique de la paroi)
- Pas de croissance sur un milieu de MacConkey
- Catalase et oxydase négative
- PCR pour certaines espèces
+ antibiogramme
Streptococcus traitements
Antiobiotiques
Prévention:
→Conditions d’hygiène générales et du matériel de traite
→Désinfection correcte du cordon pour éviter l’infection des animaux nouveaux-nés
→Vaccins disponibles généralement inefficaces
Corynebacterium Points essentiels :
✓ 3 espèces importantes en vétérinaire: C.bovis (pas pathogène), C.pseudotuberculosis (pathogène), C.renale (pathogène)
✓ Isolement en couples de deux
✓ Involucrées sur les mammites comme Streptococcus et Staphylococcus
✓ Bactéries pléomorphes
✓ Exigeantes, milieux enrichis
✓ Présentes dans les membranes muqueuses
✓ Causent des infections pyogènes
✓ Anaérobies facultatifs
✓ Immobiles
✓ Catalase positif
✓ Oxydase négatif
3 espèces importantes en vétérinaire des Corynebacterium
C.bovis (pas pathogène), C.pseudotuberculosis (pathogène), C.renale (pathogène)
Corynebacterium identification macroscopique
Développement lent en milieux de culture usuels
→milieu de Loeffler (3/4 de sérum de bœuf et 1/4 de bouillon coagulé à 80 °C). Ce milieu n’est pas vraiment sélectif mais les corynebactéries s’y développent plus vite que d’autres germes.
→ Milieux au sang additionnés de tellurite (0,02%) qui sont plus sélectifs mais plus lents→ colonies grises ou noires (réduction de la tellurite)
Corynebacterium identification microscopique
Morphologie hétérogène :
- bâtonnets légèrement incurvés
- extrémités effilées ou en forme de massue Cellules disposées :
- en V (les cellules restent souvent attachées entre elles après division→disposition angulaire) = « en lettre chinoise »
- en palissade de cellules parallèles
Corynebacterium
Exigence :
Oxygène :
Catalase :
Oxydase :
Hémolyse :
Exigence : exigeant, utilisation milieux selectif
Oxygène : Anaérobie facultatif
Catalase : Positif
Oxydase : Negatif
Hémolyse : positive ou négative selon les espèces
corynebacterium : Habitat
Flore habituelle: muqueuses | peaux | tractus respiratoire
Pathogénicité (ovin et bovin) : Lors d’une lésion
C. pseudotuberculosis : intracellulaire facultatif (se réplique dans les phagocytes)
C. renale : appareil urinaire
(près de 50% des hommes sont porteurs)
Corynebacterium : Infection
Infections opportunistes:
bactérie pyogène→supuration
(sauf C.bovis où l’infection est associée à une faible réponse immunitaire. Présent dans 20%)
- Infection de l’appareil uro-génital
- Infection hépatique
- Pneumonie
- Orchite
- Arthrite du jeune animal→boiterie - Avortement occasionnel
- Balanoposthite ulcéreuse (C.renale) - Lymphangite ulcéreuse (C.pseudotuberculosis)
Corynebacterium diagnostique
✓ Diagnostic à partir de prélèvement du pus, tissus affectés, urine.
✓ Puis analyse microscopique et biochimique.
✓Ensemencement en agar sang, agar sang sélectif, agra MacConkey.
Test compémentaire : amplification nde l’hémolyse de rhodococcus equi en présence de C. pseudotyberculosis
Corynebacterium Traitements
Antibiotiques :
Traitements locaux
Prévention:
→Conditions d’hygiène générales
→Désinfection correcte du cordon pour éviter l’infection des animaux nouveaux-nés
Rhodococcus : Points essentiels
✓ Bacillus ou coques Gram +
✓ Croissance dans des milieux non enrichis ✓ Colonies muqueuses couleur rose-saumon ✓ Pas hémolyse
✓ Aérobies
✓ Immobiles
✓ CAMP +
✓ Saprophytes du sol
✓ Pathogènes respiratoires pour les poulains
Rhodococcus identification macro et micro
Macroscopique : colonies lisses, muqueuses ou rugueuses pigmentées (couleur orange, rose-saumon), sans hémolyse. Culture optimale à 30°C.
Microscopique
GRAM +
Dimension : jusqu’à 5mm Morphologie : bacille ou coque Non mobile
Non sporulante
Présence de capsule
Intracellulaire facultative dans les macrophages (inhibition de la fusion lysosome-phagosome)
Actinomyces : Identification Macro/Micro
Culture lente en milieu labo
GRAM +
Dimension : filaments pouvant aller jusqu’à 1mm (<< taille des filaments des champignons
eucaryote : 5mm)
Morphologie : bactéries individuelles sphérique et colonies formant des structures filamentaires semblables à des hyphes (certaines espèces présentent des filaments ramifiés)
Non mobile Non sporulante
Actinomyces Diagnostique
Prélèvement d’exsudat (liquide s’épanchant hors de son espace naturel), de tissus…
Analyse macro, micro et biochimique
- Coloration ZNM négative
- Absence de croissance sur milieu de MacConkey (37oC-5 jours) - Hémolyse en fonction de l ́espèce
Norcadia
✓ Habitat: Saprophytes du sol
✓ Pathogenèse: Infection associé à l ́immunodépression. Infection par inhalation
✓Diagnostique: exsudats, observation de filaments ramifiés, cultive du microorganisme en agar sang ou des milieux sélectifs. Incubation des plaques à 37oC 10 jours.
✓ Critère d ́identification: colonies (blanches, pulvérulentes, inodores) en agarsang normalement visibles après 5 jours. En agar Sabouraud dextrose après 5 jours on observe des colonies oranges plissées. Les frottis colorés par Gram montrent des colonies filamenteuses en forme de bâtonnets et coques.
✓ Infection de Nocardia asteroides
Nocardiose canine: N.asteroides
Mastitis nocardial bovine: N.asteroides
Listeria identification
Macroscopique :
Milieux non enrichis, spectre large de t° et pH
Beta-hémolytique
Microscopique :
GRAM +
Dimension : jusqu’à 2 mm
Morphologie : Petits bacilles
Mobile (flagelle)
Non sporulée
Erysipelothrix Identification
Culture en milieu classiques.
Colonies transparentes, blanchates ou jaunatres.
Taille en fct du type de colonies : lisse ou rugeuses
Bacillus identification
GRAM +
Dimension : 0,5 à 2,5 mm sur 1,2 à 10 mm
Morphologie : bâtonnets droits, flagelle péritriche : système de flagelle qui recouvre tous les côtés de la surface
d’une bactérie (généralement)
Mobile (généralement mais chez B.anthracis les flagelles
sont non fonctionnels→pas de mobilité)
Forment des endospores (résistance à la chaleur, aux UV, désinfectants chimiques, dessiccation)
Clostridium Identification
Macroscopique : Les cultures nécessitent des milieux enrichis. Colonies lisses ou irrégulières en fonction des espèces. Taille des colonies : de l’ordre du mm.
Microscopique : Bâtonner, non mobile ou flagelle péritriche, sporulante en absence d’O2
Mycobactérium identification macroscopique
Mycobactérium identification microscopique
