Genterapi Flashcards
vad är genterapi?
Administreringen av genetiskt material för att modifiera eller manipulera uttrycket av gen produkter eller för att ändra biologiska egenskaper hos levande celler
Vad innebär somatisk genterapi? (3 punkter)
- De förändringar man gör kommer endast påverka den individ som behandlas
- Den absolut vanligaste typen av genterapi
- Lättare att få etiskttillstånd
Vad är genterapi på könsceller (3 punkter)
- Den förändrade genen blir interagerad i genomet i könscellen och kommer på så vis att ingå i alla celler i organismen
- Genen kommer att ärvas till nästa generation
- Förbjudet i många länder
När kan man använda sig vid genterapi?
- Vid genetiska sjukdomar för att korrigera genetiska defekter
- Cancer
- Vaccin
- Vaskulära sjukdomar
Hur använder man sig av genterapi vid behandling av cancer?
- Föra in gen som kodar för toxisk produkt eller enzym som omvandlar harmlös pro-drug till toxisk produkt. Syftet är att avdöda tumörceller så transient uttryck räcker.
- Immunstimulerande behandlingar, triggar T-celler att bli cancerspecifika.
- Uttryck av tumörsuppressorgener
Nämn (4) olika typer av genterapi
- Genförstärkande terapi
- Geninhiberingsterapi
- inducerad celldöd
- Normailisering av skadad gen
Hur fungerar genförstärkande terapi? (GAT)
Tillskott av funktionell gen
- Den nya genen producerar tillräckliga nivåer av det aktuella proteinet
- Är till nytta om sjukdomen är reversibel och inte har orsakat permanent skada på kroppen
- Används för att behandla sjukdomar orsakade av “loss of function” mutationer
Hur fungerar geninhiberingsterapi och när används det?
Inducerar en gen vars produkt inhiberar uttrycket av en annan gen eller påverkar aktiviteten av en annan genprodukt.
Används när sjukdomen orsakas av EN felaktig gen som ger upphov till felaktigt protein
Hur fungerar inducerad celldöd?
Använder sig av direkt alternativt indirekt inducerad celldöd genom antingen självmordsgener eller markörgen/pro-droger som markerar en cell för nedbrytning
Hur sker normalisering av en skadad gen?
Den defekta genen blir utbytt mot en funktionell gen genom:
- Homolog rekombination
- DNA editing
- RNA editing
Vad är skillnaden på in-vivo genterapi och ex-vivo genterapi?
In vivo: Genetiskt material förs in i patientens celler in vivo med hjälp av olika vektorer
Ex-vivo: Patientens celler tas ut och genetiskt material förs in i cellen in vitro (med hjälp av vektorer), därefter förs cellerna tillbaka till patienten
Vad finns det för för- och nackdelar med in-vivo genterapi?
- Mindre invasiv
- Tekniskt mer komplex
- ingen möjlighet att kontrollera
- Mindre målspecifik
- Högre immunrespons risk
Vad finns det för för- och nackdelar med ex-vivo genterapi?
- Mer invasiv
- Tekniskt mindre komplex
- Möjlighet att kontrollera
- Mer målspecifik
- Mindre immunrespons risk
Vad är vektorns funktion?
- Transporterar genen in i en target-cell
- Skyddar genen mot degradering i vävnad eller cell
- möjliggör förflyttning genom plasmamembranet och in i kärnan
Vad behöver man tänka på när man väljer vektor?
Måste välja den vektor som är mest lämplig för det man vill åstakomma (duuh)
- Stabilt (integrerat i genom) eller transient (episomalt) uttryck
- Storleksbegränsning på insert (gener)
- Säkert - få biverkningar
- Produktion - kostnad, stabilitet
Vad är en viral vektor? Vad finns det för för och nackdelar?
Hela eller delar av virus genomet är ersatt med terapeutiska gener. De är oftast inte replikationskompetenta
+ effektiv transfer och högt uttryck
+ Långtidsuttryck
- Risk för toxicitet och inflammation
- dyrt att producera
Vad är en icke viral vektor? Vad finns det för för och nackdelar?
Terapeutiska gener bärs inte av ett virus utan vanligtvis i en plasmid. Krävs fysikaliska eller kemiska metoder som används för att föra in det genetiska materialet i celler.
+ Få biverkningar
+ Transfer av stora gener
- Låg in vivo transfer
Nämn 3 fysikaliska metoder för virala vektorer
- Gene gun, en teknik som kan användas både in vitro och in vivo, används för DNA vaccin, tumörer. DNAt är blandat med metall partiklar.
- Mikroinjektion, Blodsjukdomar, tumörer, germ line, mitoDNA sjukdomar
- Direkt injektion av DNA, Hydrodynamiskt tryck, DNA vaccin
Vilken fysikalisk metod finns för virala vektorer?
För/nackdelar?
Elektroporering, förs in med två nålar som också är elektroder.
+ många celler kan behandlas samtidigt
- Risk att skada cellerna
- Svårt att kontrollera vad som tar sig in i cellerna
Vad finns det för kemisk metod för virala vektorer?
För/nackdelar?
Liposomer, artificiella fosfolipid strukturer. DNA kan packas i liposomer - “Lipoplex”
+ Relativt lätt att producera
+ Ingen övre gräns för genens storlek
- Låg effekt för genöverföringen
- Låg transient uttryck
Ge exmempel på virus som används för genterapi
- Retrovirus
- Adenovirus
- Adenoassocierat virus
- Herpesvirus
- Vacciniavirus
Hur kan adenovirus användas som cancerterapi?
Adenoviruset bär på CD40L (immunstimulerande). Genen uttryck av tumörceller som då blir målceller för immunförsvarets T-celler.
Vad finns det för risker med genterapi?
- Oönskade hälsoeffekter
- genen integreras på fel plats
- viruset återaktiveras
- viruset triggar en immunrespons
- Återupprepande behandlingar ökar risken för allvarliga tillbud
Vad finns det för utmaningar med genterapi?
- MInska biverkningar
- Sjukdomar som orsakas av mer än en gen ökar riskerna
- Få ökad kontroll över var generna integrerat
- Öka specificitet
- Etiken
Vad är SCID?
Bubble boy!
Avsaknad av T-celler
Vilka två typer av SCID finns?
ADA-SCID
SCID-X
