Généralités et accréditations labo BM Flashcards
Qu’est-ce que la réaction de Trinder ?
Méthode enzymatique de dosage du glucose
La glucose oxydase forme => acide gluconique + peroxyde d’hydrogène
Ensuite on quantifie le peroxyde d’hydrogène :
Peroxyde d’hydrogène + dérivé phénolique + amino4antipurine = eau + quinone-mine (en présence de peroxydase)
La quinone-immine est colorée, absorbe à 500nm (rouge)
Concernant les méthodes immunologiques : ≠méthodes chaudes et froides
Méthodes froides : marquage des anticorps par un dérivé fluorescent
Méthodes chaudes : marquage avec radio-isotope
En biochimie clinique définissez les termes ; vitesse, unité, katal
Vitesse : quantité de substrat ou de produit formé en un temps défini
Unité : quantité d’enzyme qui catalyse la transformation d’une micromole de substrat par minutes dans les conditions opératoires définies
Katal : Quantité d’enzyme qui catalyse la transformation d’une mole de substrat dans les conditions opératoires définies
Citer les conditions optimales pour une réaction enzymatique
- Condition de concentration : on choisit le substrat le plus spécifique. On se place à la vitesse maximale => vitesse indépendante de la concentration en substrat, ne dépend que de l’enzyme
- Condition de température : quand on augmente la température, on augmente la vitesse. En biologie on travaille à 37°C
- Condition de pH : pH optimal de l’enzyme
- Condition de tampon : en fonction du tampon utilisé, grande variabilité de valeurs
- Condition de cofacteurs et effecteurs : Dans certains cas pour les transaminases, il faut supplémenter en phosphate de Pyridoxal pour compenser une déficience chez un patient
Sous quelle norme les laboratoires doivent-ils être accrédités pour avoir l’autorisation de rendre des résultats d’examens ? Par qui cette accréditation est-elle délivrée ?
NF EN ISO 15189
Accréditation délivrée par la COFRAC
5M
- Matière : échantillons, réactifs, étalons…
- Matériel : spectrophotomètre, autres instruments…
- Milieu : Contexte => Urgence/exam spécialisés… Température/lumière…
- Méthode : écrite, validée + définir un mode dégradé
- Main d’oeuvre : personnel, vérification de leurs qualifications, habilitation de leurs compétences
Définition : Fidélité
Aptitude à donner des résultats les plus proches possibles lors d’analyses répétées d’un même échantillon. On va réaliser X mesures, le but va être d’être dans l’écart d’erreur aléatoire. On aura donc une erreur aléatoire admissible.
Définition : Justesse
Écart entre la valeur mesurée dans nos conditions et la vraie valeur = erreur systématique. On peut être parfaitement fidèle (toujours le même résultat) mais avoir un biais par rapport à une valeur vraie
Comment vérifie-t-on la fidélité ?
Répétabilité + fidélité intermédiaire (reproductibilité intra-laboratoire)