Generalidades Flashcards
Definicion de Virus
Agentes infecciosos
Parásitos intracelulares obligados
Los virus son seres vivos?
No son seres vivos porque:
a. NO TIENEN METABOLISMO PROPIO.
b. NO SE REPRODUCEN SINO QUE REPLICAN.
c. PUEDEN SER CRISTALIZADOS.
Cómo se observan los vírus?
Por Microscopia Electrónica - Microscopio Electronico de Transmision.
(Límite de resolucion m.e.=2nm / m.o.=280nm)
-CORTE ULTRAFINO
-TINCIÓN NEGATIVA
Componentes básicos en un virus:
- Ácidos nucleicos (ADN o ARN) *excepcion CMV
- Cápside
Comparacion de tamaños
Más chicos (20 nm): PARVOVIRUS
Medianos (100 nm): RETROVIRUS
Más grandes (280 nm): POXVIRUS
Un nanometro es la milésima parte de un micrómetro (o micrón) = 10 elevado a menos 9.
Simetrias de la cápside y ejemplos
- ICOSAÉDRICA
Desnuda: Adenovirus; Picornavirus, Calicivirus; Reovirus; Parvovirus; Papovavirus.
Envuelto: Herpesvirus; Togavirus; Flavivirus; Retrovirus; VHB. - HELICOIDAL
Desnudo: virus del mosaico del tabaco
Envuelto: Todos los ARN ( - ); Coronavirus; Arenavirus - COMPLEJA
Vírus POX y Vírus Rabia. - BINARIA
Bacteriofagos
SISTEMAS DE CULTIVO
Sistemas donde los virus pueden replicar:
- HUEVOS EMBRIONADOS
- ANIMALES DE LABORATORIO (estudio de la patogenesis viral)
- CULTIVOS CELULARES (fines dx)
CARACTERIZACIÓN BIOQUÍMICA Y MOLECULAR ante un eventual virus nuevo.
Ante un eventual virus nuevo:
1• Cultivarlo en grandes cantidades y purificarlo.
2• Estudiar su estructura por M.E.
3• Caracterizar sus proteínas estructurales por electroforesis en geles de poliacrilamida.
4• Caracterizar a sus proteínas tempranas.
5• Caracterizar su Ac.nucleico.
6• Estudiar su patogenia a nivel experimental.
PURIFICACIÓN DE PARTÍCULAS VIRALES
- OBTENCIÓN DE UNA GRAN CANTIDAD DE VIRUS EN CULTIVOS CELULARES
- OBTENCIÓN DE VIRUS PUROS POR GRADIENTE DE SACAROSA Y ULTRACENTRIFUGACIÓN
CARACTERIZACIÓN DE PROTEÍNAS ESTRUCTURALES
SDS-Page de virus enteros
CARACTERIZACIÓN DEL ÁCIDO NUCLEICO VIRAL
- TRATAMIENTO CON DNAsa Y CON RNAsa.
- TRATAMIENTO CON ENZIMAS DE RESTRICCIÓN.
- CLONACIÓN Y SECUENCIACIÓN.
ESTUDIO DE LA PATOGÉNESIS VIRAL
• EMPLEO DE CULTIVOS CELULARES (ESTUDIO DE
RECEPTORES, MECANISMOS DE ENTRADA Y SALIDA DEL VIRUS, EFECTO CITOPÁTICO, ETC).
• USO DE MODELOS ANIMALES EXPERIMENTALES (ESTUDIOS DE PROGRESIÓN DE LA INFECCIÓN, RESPUESTA INMUNE, PATOLOGÍA, EXPRESIÓN DE ANTÍGENOS E INTERACCIÓN MOLECULAR CON LAS PROTEÍNAS DEL HUÉSPED)
CO-INMUNOPRECIPITACIÓN
- SE DESEA SABER CON QUÉ PROTEÍNAS CELULARES INTERACTÚA UNA PROTEÍNA VIRAL DETERMINADA.
- A UN CULTIVO CELULAR INFECTADO CON EL VIRUS SE LE EXTRAEN LAS PROTEÍNAS.
- A ESE EXTRACTO ACUOSO SE LE AGREGA UN SUERO CONTRA LA PROTEÍNA VIRAL.
- LUEGO LE AGREGA PROTEÍNA «A» DE ESTAFILOCOCOS CONJUGADA CON BOLITAS MICROSCÓPICAS DE SEFAROSA.
- SE CENTRIFUGA. SE OBTIENE ASÍ LA PROTEÍNA VIRAL UNIDA A LAS PROTEÍNAS DESCONOCIDAS.
- SE LAS SEPARA POR SDS-PAGE.
- LUEGO SE CARACTERIZA A LAS PROTEÍNAS DESCONOCIDAS.
Cómo son los Ac.Nucleicos?
ADN o ARN (*excepto el CMV)
Simple cadena/Doble cadena
Polaridad +/Polaridad -
Mayoría de los ADN son dc *excepto Parvovirus
Mayoría de los ARN son sc *excepto Reovirus
Cápside. Contitución y función.
Genes tardios. Está formada por unidades llamadas capsómeros.
Fc.: Proteger el Ácido nucleico, tener moléculas que se unen al Rec, actuar como Ag y pueden relacionarse con las polimerasas virales.
Envoltura. Constitución y función.
Bicapa lipídica con lipoproteinas que es sensible a detergentes, desecacion, y que proviene de la célula infectada.
Fc.: Unión al Rec de la célula y está involucrada en procesos de las primeras etapas del ciclo viral.
Virión
Virus completo e infectivo.
Partícula defectiva
Se forman por el proceso de replicacion que es muy ineficiente y genera partículas vacías o que contienen ADN celular y no viral.
Se deben a mutaciones y errores en la producción y el ensamblaje del virión.
Cuasiespecies
Variantes genéticas cercanamente relacionadas y viables.
Provirus
Genoma viral integrado al genoma celular. Ej.: HIV.