Gelelektrophorese Flashcards
Was ist Gelelektrophorese?
Die Gelelektrophorese ist eine Labormethode, bei der geladene Moleküle in einem Gel getrennt werden
Welche Funktion hat die Gelmatrix in der Gelelektrophorese?
Die Gelmatrix wirkt wie ein Sieb auf die Moleküle und trennt sie nach Größe.
Wie wird das elektrische Feld in der Gelelektrophorese erzeugt?
Das elektrische Feld wird durch ein Gerät erzeugt, das zwei Pole schafft.
Was passiert mit der Molekülmischung (z.B. DNA) vor der Elektrophorese?
Die Mischung wird eingefärbt, bevor die Moleküle auf die Geloberfläche gegeben werden.
Wie wandern die Moleküle im Gel während der Elektrophorese?
Die Moleküle wandern aufgrund ihrer Größe und ihres Gewichts; kleinere Moleküle wandern schneller als größere.
Wie erfolgt die Auswertung der Ergebnisse bei der Gelelektrophorese?
Die Auswertung erfolgt durch den Vergleich mit einem mitlaufenden Marker, dessen Eigenschaften bekannt sind.
Was ist der Zweck der PCR
Molekularbiologische Technik zur Vervielfältigung einer DNA Probe mit dem Ziel, genügend Material zur Analyse der DNA-Sequenz zu erhalten. Materialmenge kann exponentiell millionenfach erhöht werden.
Nenne die drei Schritte der PCR
- Denaturierung
- Primerhybridisierung
- Polymerisation
Was passiert bei der Denaturierung in der PCR
Bei ca. 90°C werden die Wasserstoffbrückenbindungen zwischen den beiden DNA Strängen gelöst. Folglich liegt freie Einzelsträngige-DNA vor.
Was passiert bei der Primerhybridisierung in der PCR
Der Ansatz wird auf 50°C gekühlt. Dann werden die Primer an den Anfang und das Ende angelagert, weil es zwei verschiedene Primer sind kann man Anfang und Ende identifizieren.
Was passiert bei der Polymerisation in der PCR
Die Temperatur wird auf 72°C erhoben, damit die Taq-Polymerase arbeiten kann. Sie ergänzt den Strang in 5’ Richtung, sodass am Ende der verdoppelte DNA Abschnitt vorliegt.
