Fish Flashcards
Que es la hidridacion?
Proceso en el cuál dos cadenas complementarias se unen (ya sean ADN o ARN) y forman una sola molécula de doble cadena
¿Cómo se separan las dobles cadenas formadas por hibridación?
Mediante calor, cuando se enfrían se vuelven a unir
¿Para que se usa la técnica de hibridación (FISH)?
Identificar la posición de secuencias en el ADN
¿En qué consiste la técnica FISH?
- Consiste en una sonda de ADN hibridante (es un fragmento que contiene las secuencias complementarias al sitio donde queremos que hibride )
- La sonda es marcada directa o indirectamente con fluorescencia (directamente con fluorocromo o indirectamente con un hafteno)
- Una vez marcados, las sondas marcadas y el ADN objetivo se desnaturaliza con calor 🥵
- Las sondas se hibridan con la secuencia complementaria 🫂
- Si la sonda fue complementaria la secuencia objetivo se puede observar en un microscopio fluorescente (si no se observa indica una mutación o ausencia de la secuencia objetivo)
¿Que es un hafteno?
Es una parte de un antígeno que por si sola no genera una respuesta inmune, pero cuando se une a una secuencia específica estimula una respuesta inmunitaria
Aplicaciones
Detecta:
* Anormalidades genéticas
* Alteraciones numéricas
* Delección, inserción o translocaciones
Que indican los resultados de esta técnica FISH
Translocacion cromosomica