fécondation 3

Question 1

comment sont les cellules folliculeuses lorsque spz arrivent contact CCO, que tout est prêt pour fécondation ?

Answer 1

elles sont dissociées, elles n’ont plus de jonctions entre elles et baignent dans solution acide hyaluronique

Question 2

quelle activité les spz ont il sur leur MP ?

Answer 2

activité hyaluronidase qui leur permet de dissocier la matrice d’acide hyaluronique et de progresser, pour arriver au contact de la zone pellucide

Question 3

que font les cellules folliculeuses dissociées lorsque les spz arrivent au contact de la zone pellucide ?

Answer 3

elles se rétractent ce qui permet de maintenir les spz proches de la zone pellucide.
elles favorisent contact entre spz et zone pellucide

Question 4

comment se fait interaction entre spz et zone pellucide ?

Answer 4

3 étapes :
- phase de reconnaissance et d’adhésion
- réaction acrosomique
- traversée de la zone pellucide

Question 5

la phase de reconnaissance et d’adhésion dans interaction spz et zone pellucide ?

Answer 5

spz arrivent contact zone, doivent pouvoir la reconnaitre avant de s’y fixer (fixation primaire).
phénomène très spécifique de l’espèce.
fixation primaire implique d’une part des glycoprotéines de la zone pellucide et d’autre part des protéines qui sont récepteurs à zone pellucide portés par la MP d spz au niveau de la région antérieur de la tête des spz

Question 6

la réaction acrosomique lors interaction spz avec zone pellucide ?

Answer 6

est déclenchée par la fixation primaire correspond libération des enzymes acrosomiales contenues dans acrosome.
c’est un phénomène brutal, extrêmement rapide et irréversible.
les enzymes vont alors modifier localement la zone pellucide (dénaturation de la ZP) ce qui va permettre au spz de traverser la zone pellucide.
pour que la fécondation se fasse il faut que la réaction acrosomique se fasse au contact de la zone pellucide

Question 7

traversée e la zone pellucide lors contact spz et zone pellucide ?

Answer 7

se fait grâce à des facteurs chimiques qui correspondent au contenu de l’acrosome mais aussi sous l’influence de facteurs mécaniques/physiques, qui sont essentiellement le mouvement hyperactif du spz (hypermobilité)

Question 8

comment est la zone pellucide ?

Answer 8

c’est une structure très conservée entre les espèces, formées de glycoprotéines.
les filaments protéiques sont constitués d’une succession de 2 protéines :
- ZP2
- ZP3
reliés entre eux par ponts de ZP1.
il y a de acide hyaluronique entres ces filaments

Question 9

la protéines ZP3 ?

Answer 9

chaine oligosaccharidique est le récepteur spécifique du spz lors de la réaction primaires.
ce sont des résidus oligosaccharidiques qui vont présenter les sites de fixation du spz

Question 10

ZP3 est la clé de quoi ?

Answer 10

de la reconnaissance gamétique, car c’est sur ses résidus oligosaccharidiques que s’effectue la liaison primaire

Question 11

ex souris reconnaissance gamétique ?

Answer 11

se fait entre fraction oligosaccharidique de ZP3-OS et une protéines de MP su spz : la galactosyl transférase.
une fois fixé, spz s’incline pour augmenter surface échange avec zone pellucide

Question 12

qu’entraine la fixation primaire ?

Answer 12

une vague calcique dans le spz, qui va déséquilibrer la MP, lui permettant de réaliser sa réaction acrosomique au contact de la zone pellucide.
la conséquence directe de la fixation primaire est la réaction acrosomique

Question 13

par quoi est recouvert l’acrosome ?

Answer 13

par la MP et il est lui même limité par une M acrosomique externe (MAE) et une M acrosomique interne (MAI).
au début de la réaction acrosomiques, ses structures sont intactes

Question 14

que fait la MP lors réaction acrosomique ?

Answer 14

la MP déstabilisée va fusionner en de multiples points avec la MAE.
cela entraine vésiculisation du contenu de l’acrosome qui sera libéré à travers les spores de la MP

Question 15

la fusion entre MP et MAE ?

Answer 15

ne se fait pas du tout sur toute la surface de l’acrosome, il y a une zone à la partie postérieure de l’acrosome où la MAE persiste : c’est la zone équatoriale

Question 16

que contient l’acrosome ?

Answer 16

2 types d’enzymes essentiellement :
- hyaluronidase : dissocie acide hyaluronique de la zone pellucide
- acrosine : agit sur protéines de la zone pellucide = rompt ponts entre ZP2 et ZP3 et active protéines de fusion présentes sur M post-acrosomique du spz

Question 17

que se passe t il une fois la réaction acrosomique effectuée ?

Answer 17

la MP et MAE disparaissent Das la zone antérieure.
il reste, exposée à l’extérieur, la MAI

Question 18

le spz qui n’a plus de MP dans la zone antérieure ?

Answer 18

il n’a donc plus de récepteurs, il est donc au contact de la ZP grâce liaison secondaire.
cette fixation secondaire est possible grâce à des molécules d’adhésion présentes au niveau de la MAI qui vont interagir avec autre protéine de la ZP :
ZP2.
la fixation secondaire n’est possible seulement si la réaction acrosomique a eu lieu

Question 19

où se retrouve le spz après avoir traversé la ZP ?

Answer 19

dans l’espace périvitellin où il est immobilisé.
il va alors se positionner tangentiellement par rapport à la MP ovocytaire qui comporte quelques microvillosités.
à ce moment là va débuter la fusion des membranes cytoplasmiques

Question 20

où vont avoie lieu les phénomènes de fusion des membranes cytoplasmiques ?

Answer 20

au niveau de la région équatoriale et post-acrosomique.

Question 21

qu’est-ce que les phénomène de fusion des membranes cytoplasmiques va provoquer ?

Answer 21

un afflux de calcium dans le cytoplasme ovocytaire à partir des sites intracytoplasmiques et cet afflux va se rependre dans tout le cytoplasme ovocytaire

Question 22

de quoi va être à l’origine l’activation ovocytaire ?

Answer 22

de la phagocytose du spz grâce à des prolongements microvillositaires présents à la surface de la MP ovocytaire

Question 23

quelle est la conséquences de la fusion des membranes cytoplasmiques après l’afflux de calcium ?

Answer 23

activation corticale,
les granules corticaux vont fusionner avec la MP et libérer contenu dans espace périvitellin entrainant imperméabilisation de la ZP.
cette imperméabilisation permet éviter la polyspermie.
elle débute dans zone ou spz pénètre, se propage très vite (s) à toute la périphérie de l’ovocyte
=> action directe

Question 24

protéines impliquées dans la fusion des membranes cytoplasmiques ?

Answer 24

° MP région post-acrosomique :
- fertiline (chez cobaye et souris)
- izumo (souris, homme)

° MP ovocytaire :
- juno (souris, homme)
- intégrines (permettent phagocytose du spz)

Question 25

chronologie de la fécondation ?

Answer 25

• JO = contact spz et CCO
• interaction ZP
• fixation
• réaction acrosomique
• traversée ZP
• moins 2h après fusion des gamètes et activation de ovocyte
  > phénomènes rapides

Question 26

chronologie fécondation pour ovocyte (qui étaient en métaphase II) ?

Answer 26

• achèvement de la 2e division méiotiques
• libération 2e globule polaire dans espace périvitellin
• transformation du noyau en pro-noyau féminin haploïde

Question 27

chronologie fécondation pour spz ?

Answer 27

• disparition M nucléaire
• décompensation de la chromatine
• chromatine va perdre ses protamines qui vont être remplacées par histones
• nouvelle enveloppe nucléaire va être formée
• formation du pro-noyau masculin haploïde

Question 28

les deux noyaux haploïdes, chronologie fécondation ?

Answer 28

• on est au stade de 2 pro-noyau éloignés 6-7h après fécondation.
• dans ces 2 pro-noyaux, la synthèse ADN va démarrer et se fait manière indépendante au sein de chacun.
• en même temps, ils se rapprochent l’un de l’autre au centre de l’œuf

Question 29

stade de 2 pro-noyau rapprochés moins de 18h après TO, fécondation ?

Answer 29

à ce moment là va pouvoir démarrer 1er mitose de segmentation :
- prophase = fuseau de ÷ se met en place grâce centrioles apportés par spz
- métaphases = enveloppes nucléaires disparaissent, les K paternels et maternels se positionnent sur fuseau de ÷.
les 2 génomes se mélangent

Question 30

on est à moins de 30h après le T0 pour arriver au mélange de quoi ?

Answer 30

des 2 génomes.
on va avoir formation des 2 premiers blastomères 30h après mise en contact des gamètes.
ceci s’appelle la cytodiérèse : on sépare les deux premières cellules de l’œuf
très rapidement mitoses se succèdent après les 2 premiers blastomères et on arrive au stade de 4 cellules 48h après le stade de T0 et là les mitoses ne font qu’augmenter.
on arrive au développement embryonnaire

Question 31

conclusion de la fécondation ?

Answer 31

permet donc :
- reconstitution du nombre diploïde de K
- constitution d’un nouveau génome (origine maternel et paternel)
- détermination du sexe génétiques de l’embryon
- initiation du premier clivage qui est à l’origine, après la multiplication, d’un individu