F22.1 - Tillväxt av mikroorganismer Flashcards
Vad behövs om energiförsörjningen baserar sig på respiration?
Det behövs en elektron acceptor och en elektron donator.
Vad behövs om energiförsörjningen baserar sig på fermentation.
Det behövs ett substrat som cellerna kan utnyttja.
Kvantifiering av cell koncentration: Mätning av turbiditet genom ljusspridning.
- Inkluderar alla celler som bidrar till grumligheten, båda levande och döda celler.
- Ljusspridning uttrycks oftas som optisk täthet, betecknas som OD vid en angiven våglängd (ex OD600).
Kvantifiering av cell koncentration: Cellräkningsmetoden (total cell count).
• Kan räkna celler direkt i mikroskop ELLER m.h.a. en partikelräknare som använder elektrostatisk detektion av partiklar.
Dessa två ger antalet levande och döda celler.
• För att veta antalet levande celler görs en spridning på en agar platta med fast odlingsmedium på så sätt att varje ursprunglig cell ger upphov till en bakteriekoloni. Ursprungsmängden levande celler fås då genom att räkna kolonierna.
Kvantifiering av cell koncentration: Mätning av biomassa.
- FIltrera, torka och väga.
* Mäta totalmängden protein eller DNA i celler.
Batch kultur
- Exponentiell tillväxt är ej möjligt i det långa loppet, eftersom näringsämnen i mediet kommer börja ta slut, eller att inhiberande produkter kommer börjat ackumuleras.
- Tillväxten avtar när celltätheten ökar (annat avsnitt)
Vad är generationstid?
Den tid det tar för en population att fördubblas.
Lagg fasen.
Den fördröjning man ser i lagg fasen beror på att de organismer man satt till för att starta odlingen behöver lite tid för att ställa om sin metabolism till de rådande förhållandena.
Log fasen.
- Här ske exponentiell tillväxt i genlighet med tillväxtekvationen.
- Här råder även s.k. balanserad tillväxt, d.v.s. alla delar av cellinnehållet tillverkas i samma takt, därmed blir cellens sammansättning konstant.
Stationär fasen.
- Odlingsmedlet blir uttömt på energi och kolkällor.
- Ackumulering av inhiberande eller toxiska produkter.
- Det finns metabolisk aktivitet, men det är midre/ingen cell division. Här är metabolsik aktivitet inriktat på underhåll och i vissa fall sekundär metabolism.
Dödsfasen.
Dödsfasen sker egentligt första ordningens kinetik vilket ger exponentiellt avtagande av koncentrationen av levande celler. På en log-skala blir det en rät linje.
Miljöförhållanden som påverkar tillväxten: Temperatur.
- Psychofil: Kalla förhållanden (-5 till 10)
- Mesofil: Trivs mellan 10-45
- Termofil: Trivs mellan 40-60
- Hypertermofiler: Trivs mellan 70-100 och 90-110
Miljöförhållanden som påverkar tillväxten: pH och vatten aktivitet.
- Acidofiler: Växer vid pH 0-5
- Neutrofiler: Växer vid pH 5-8
- Alkalifiler: Växer vid pH 8-11
•De flesta organismer inhiberas av låg vattenaktivitet med undantag av osmotoleranta organismer.