Eucariotas Flashcards
Levaduras
Unicelulares, fácil de cultivar, MC baratos, facil adaptación
Ventajas de levaduras
Alto rendimiento, estable geneticamente, durable, económico, alta productividad. Glicoosilación de proteinas, plegamiento, ricas en SS.
Glicosilacion
Casi todos los polipeptidos de eucariotes estan glicosilados.
Interferon Y
Glicoproteina activa sin estar glicosilada entonces puede expresarse en bacterias
Eritropoyetina y gonadotropina humana
Glicoproteina glicosilada activa
N-Glicosilacion
enlace se forma con N de grupo amida de asparagina
O-Glicosilacion
Formacion de enlace entre O de -OH de Thr/Ser
Saccharomyces cerevisiae
Para fermentaciones, secreta al MC, N-Glicosilacion
Proteinas de Saccharomyces cerevisiae
Insulina
Antigeno de Hep B
Hirudina
Levaduras metilotroficas (Pichia, Candida, Hansenula)
Metabolizan metanol. Promotores fuerte, altamente regulador, alta densidad celular
Pichia
PTM’s. Mayor rendimiento. no hiperglicosila, barato, multicopias de ADN foraneo, estable geneticamente
Proteinas de Pichia
Precursor de insulina, albumina, toxina de tetanos, gelatina
Hongos filamentosos
Alta secrecion, PTM’s, estables geneticamente, hasta 100 copias del gen
Para mejorar produccion con hongos filamentoso
Promotor fuerte, Subir numero de copias, fusion de genes, mutagenesis aleatoria
Celulas de insecto
Complejas PTM’s, plegamiento eficiente, , para producir proteinas mamiferas, sencillo escalamiento, diferentes genes, flexibilidad en tamaño
Hospedero más utilizado en celulas de insecto
Gusano de la polilla Spodoptera frugiperda
Ventajas de celulas de insecto
PTM’s, N y O glicosilacion, formacion de puentes, alta expresion, facil escalamiento, seguros, sin limite en tamaño
Desventajas de celulas de insecto
Patrones de procesamiento previamente determinados, mal plegamiento, baja expresión, glicosilación incorrecta
Linea celular más utilizada para celulas de mamifero
CHO, mieloma murino, BHK, HEK
Ventajas de celulas de mamifero
Proteinas glicosilan y pliegan adecuadamente
Principales proteinas producidas con celulas de mamifero
Hormonas de fertilidad, gonadotropina, hormona luteinizante
Desventajas de celulas de mamifero
duración de proceso largo, proceso caro, baja secreción
Animales transgenicos
Leche, huevos, sangre, orina, plasma.
Ventajas de animales transgenicos
Expresion alta, producción económica, Sin riesgo a salud humana
Desventajas de animales transgenicos
Largo tiempo de espera
Alternativa a animales transgénicos
Usar protozoarios como tripanosomas. Beneficios son integración estable, facil mantenimiento, gran densidad
Plantas transgénicas
Más seguro y menos costoso, menos tiempo.
