Enzimas de restricción Flashcards
¿Qué es la ingeniería genética?
Parte de la biotecnologia basada en manipulación genética de organismos con un propósito.
Aplicaciones de la ingenieria genetica
Diagnóstico médico Pruebas de paternidad Mapeo y secuenciación Industria biotecnológica Análisis forense
Ácidos nucleícos
Purinas: A G
Pirimidinas: C T U
¿de qué se compone un nucleósido?
Azúcar + Base Nitrogenada
¿Cómo se compone un nucleótido?
Enlace éster entre pentosa de nucleósido + ácido fosfórico
¿Cómo se genera el ADN recombinante?
Digestión –> Ligación –> Obtención de ADN Recombinante
¿Qué enzimas modifican el ADN?
Nucleasas y polimerasas
¿Qué hace DNApol I?
Fragmento Klenow se ocupa cuando molecula de ssDNa se copia
¿Qué hace Transcriptasa reversa?
Sintetiza cDNA
¿Qué hace fosfatasa alcalina?
Se utiliza para evitar ligación no deseada
¿Qué hace polinucleótido nucleasa?
Adiciona nucleótidos al extremo 5’
¿Qué hace tranferasa terminal?
Añade nucleótidos repetidamente al extremo 3’. Eficiente en cohesivos
¿Qué hace DNA ligasa?
Une fragmentos cohesivos. T4 ligasa es la más usada.
¿Qué hacen las enzimas de restricción?
Cortan DNA en sitios específicos. Aislados de bacterias. Son parte de mecanismo de protección llamado sistema de modificación por restricción –> metilasas
Enzimas de restricción I
Cortan DNA aleatoriamente lejos de secuencia que reconocen
Enzimas de restricción II
Son endonucleasas
Enzimas de restrcción III
Cortan secuencias fuera del sitio de reconocimiento
Enzimas de restricción IV
Cortan DNA metilado
¿Qué son los isoesquisomeros?
Enzimas de restricción que reconocen al mismo sitio de corte pero no cortan de la misma manera
¿Qué es un mapa de restricción?
Es una técnica utilizada paraobtener información de donde están situados los sitios de reconocimiento de una o varias enzimas de restrcción. Su importancia consiste en clonación, corroborar instrucciones y confirmar secuencias
