E.Coli como célula huésped Flashcards

1
Q

¿Cómo se ocupa E. Coli?

A

Como hospedero para propagación y manipulación de DNA recombinante

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

¿Cuál es el principal beneficio de E.Coli?

A

Su alta velocidad de crecimiento

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

¿Cuál es la E.Coli original?

A

E.Coli K-12, provenie de un paciente con difteria

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

E.Coli B

A

Se derivan cepas como REL606 y BL21

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

E.Coli C

A

diferencias morfológicas

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

E.Coli W

A

Aislada por Selman Waksman

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

recA, recB, recC, recD

A

Recombinación

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

rpsL(Str r)

A

Resistencia a estreptomicina

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

lacI q

A

Mutación constitutiva

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Propiedades Generales de hospederos para clonación

A

Imposibilidad, Fertilidad, Sistemas de Modificación metilación-restricción, Sistemas de recombinación, sistemas de alfa-complementación

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Imposibilidad

A

Se genera codón STOP. ambar (UAG), ocre (UAA)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Fertilidad

A

En celulas HFR, el factor F causan transferencia. Mutacion en tra provoca transferencia. Las cepas con factor F generan pili.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Sistemas de modificación-restricción

A

Evita intercambio genético, destruyendo ADN foráneo

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Sistema de ADN metilasa

A

Metila residuos de C/A evitando degradación

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Dam

A

metila residuos de A en GATC

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Dcm

A

metila residuos de citosina en CC(A/T)GG

17
Q

Que cepas siempre son dam+

18
Q

¿Qué podría causar Dam o Dcm?

A

Afectar digestión de DNA clonado, afectar eficiencia de transformación, ocasionar mutagénesis

19
Q

hsdR- resulta en?

A

fenotipo de restricción y metilación negativo

20
Q

hsdS

A

deficientes en metilación

21
Q

hsdR

A

codifica endonucleasa

22
Q

hsdM

A

codifica metilasa

23
Q

hsdRMS

A

subunidad del sitio reconocimiento

24
Q

McrA, McrB

A

cortan metilcitosinas

25
Q

Mrr

A

Corta metiladenina

26
Q

Si utilizas metilasas de citosina en clonación

A

ADN recombinante debe ser transformado en mcrA-, mcrBC- para que no haya restricción de Mcr

27
Q

Recombinación

A

Mutaciones pueden mantener integridad de DNA clonado

28
Q

Vías de recombinación de E. Coli

A

recBCD, recE, recF

29
Q

recA-

A

reduce recombinación hasta 1000 veces

30
Q

recBC- y recd-

A

buenos hospederos para estabilizar palindromes de vector lambda

31
Q

RecBCD

A

degradan ADN concatamerico lineal entonces ocupar recBC, sbcB-, recD-

32
Q

Mutaciones en mutD provoca

A

Mutaciones espontaneas

33
Q

Mutagénesis al azar

A

Mantener a plásmidos en mutD- y luego transformar en mutD+