estudo p5 - Diagnóstico Laboratorial de Infeções Urinárias e Estudo da Suscetibilidade aos Antibióticos

Question 1

Etiologia das infeções urinárias

Answer 1

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Question 2

INFECAO URINARIA

Answer 2

• caracterizam-se pela invasão e multiplicação dos microrganismos em qualquer porção do sistema urinário
• vias de infeção são muito variadas
  a) VIA ASCENDENTE: microbioma fecal e perianal
  b) VIA DESCENENTE ou HEMATOGENEA: secundária a um processo de septicémia (devido à intensa vascularização do rim)
  c) VIA IATROGENICA: bactérias endógenas ou exógenas introduzidas por manipulação do trato genitourinário
  d) VIA LINFATICA : rara
• antigem sobretudo feminino
• particularmente graves em recém- nascidos
• pico de incidência aos 3-4 anos com aumento adolescencia ( alterações hormonais favorecem a colonização vaginal por bactérias nefrogénicas)
• recidivas frequentes
• ## formação de cicatrizes renais pode levar a hipertensao e insuf renal cronica

Question 3

AGENTES PATOGENICOS NORMALMENTE ENVOLVIDOS NAS INFECOES URINARIAS…

Answer 3

NAO COMPLICADAS
- Escherichia coli
- Staphylococcus saprophyticus
- Proteus spp
- Klebsiella spp
- Enterococcus faecalis
- bactérias da família Enterobacteriaceae
- levediras

COMPLICADAS
- Escherichia coli
- Enterococcus spp
- aeruginosa
- Klebsiella pneumoniae
- Candida

Question 4

CLASSIFICACAO INFECOES URINARIAS

Answer 4

CISTITE bexiga
URETERITE ureter
URETRITE uretra
PIELONEFRITE

(no sexo masculino, devem ainda considerar-se a prostatite e a epididimite).

Question 5

Microbiota normal do sistema urinário

Answer 5

trato genitourinário feminino
- Lactobacillus spp
- bacilos difteróides
- Gardnerella vaginalis
- Staphylococcus spp
- Enterococcus spp
- Streptococcus α e β-hemolíticos
- Escherichia coli
- leveduras

trato genitourinário masculino
- Staphylococcus spp
- Micrococcus spp.
- bacilos difteróides
- Streptococcus α-hemolíticos.

Question 6

Meios de defesa do sistema urinário

Answer 6

efeito mecânico da micção
- permite expulsar possíveis contaminantes da uretra

pH urinário
- 5.5 ou menos

composição química da urina
- alta concentração de ureia e presença de ácidos orgânicos

citocinas e mecanismos anti-aderência
- presentes nas células da mucosa
- remoção de bactérias após o esvaziamento da bexiga

recrutamento de células fagocitárias

produção renal de anticorpos

Question 7

Colheita da urina
(em todos os casos, colheita da urina deve ser efetuada, sempre que possível, antes do início da antibioterapia)

Answer 7

técnica do jato médio (em indivíduos não algaliados)
- recolher 10 a 20 ml de urina intermédia para um recipiente esterilizado
(apos limpeza area genital com agua e sabao)
- deve sempre rejeitar-se a porção inicial e terminal
(arrasta consigo as bactérias aderentes) e (interfere com o crescimento do agente patogénico devido à acumulação de sedimentos)

punção de cateter urinário (em indivíduos algaliados)
- clampagem da sonda acima da derivação
- deve desinfetar-se o local a puncionar com álcool a 70%
- aspirar, com o auxílio de uma agulha e seringa esterilizadas, 5 a 20 ml de urina

punção supra-púbica
- desinfetar a pele com uma solução antisséptica
- aspirar, com o auxílio de uma agulha e seringa esterilizadas, 5 a 20 ml de urina
- punção deve realizar-se a nível do terço inferior da linha imaginária que une o umbigo à sínfise púbica
- método com resultados fidedignos

saco coletor
- limpeza da área genital
- aplicar um saco autocolante e estéril em torno dos genitais externos do indivíduo
(se após 30 minutos o doente ainda não tiver urinado, deve retirar-se o saco coletor e repetir-se o procedimento)

Question 8

Exame laboratorial

Answer 8

• amostras semeadas ate 1h apos colheita ou conservadas frigorifico 4C e processadas ate 24h apos
  (impedir multip bacterias e falsos positivos)

processo ideal
- inoculação imediata das amostras nos respetivos materiais de urocultura logo após a colheita
- envio de amostra adiconal p exame microscopico

Question 9

Exame microscópico

Answer 9

exame citológico do sedimento urinário
- centrifugação de 10 ml de urina
- diluído em 1 ml de soro fisiológico, convenientemente corado e observado ao microscópio ótico com uma ampliação total de 400×

TECNICA POSSIBILITA:
- contagem dos elementos celulares
- avaliação da presença de cilindros e de cristais
- pode verificar-se se os elementos figurados se encontram em número significativo

exame direto pela técnica de Gram
- presença de uma ou mais bactérias por campo pode ser correlacionada com uma contagem ≥ 105 unidades formadoras de colónia por mililitro

p fungos e parasitas
- podem ser pesquisados no sedimento urinário

Question 10

MEIOS DE CRESCIMENTO P URINA

Answer 10

URCULTURA
(amostras de urina devem ser semeadas de modo a permitir a contagem das unidades formadoras de colónia por mililitro UFC/ml)

UROCULTURA “DIP-SLIDE”
- tubo de plástico que contém uma lâmina com 2 ou mais meios de cultura
- crescimento dos microrganismos a partir da urina recolhida em condições de esterilidade
- após 16 a 24 horas de incubação a 36 ± 2º C, efetua-se a comparação com padrões fotográficos

MEIO DE MACCONKEY
- meio de cultura seletivo para os bacilos Gram negativos
(sais biliares inibem o crescimento da maioria das bactérias +)

MEIO CLED e GELOSE DE SANGUE
- meios de cultura não seletivos que permitem o crescimento de todas as bactérias.

(piúria expressiva com exame laboratorial negativo sugere microrganismos que não crescem em meios convencionais (por exemplo: Mycobacterium tuberculosis e Chlamydia spp.).

Question 11

Valores de Kass. UFC/ml (unidades formadoras de colónia por mililitro).

Answer 11

< 104
- Contaminação com microbiota normal
(podem indicar uma infeção urinária no caso de indivíduos algaliados, sexo masculino ou antecedentes de antibioterapia prévia)

= 104
- Duvidoso; repetir a colheita

≥ 105
- Infeção urinária

Question 12

procedimento em caso de suspeita de infeção por bactérias ácido álcool resistentes

Answer 12

Diagnóstico laboratorial da tuberculose genitourinária
- secundária a uma porta de entrada pulmonar
- doença muito grave se não for diagnosticada / tratada precocemente
- considerada quando
a) ⦁ sintomatologia urinária em indivíduos com antecedentes de tuberculose pulmonar
b) ⦁ alterações persistentes e não esclarecidas relacionadas com o sedimento urinário (por exemplo: eritrocitúria, leucocitúria e piúria).
- amostra colhida de manha, 3 dias consecuticos, p jato medio

EXAME DIRETO
- observação de um esfregaço de sedimento urinário corado pela técnica de Ziehl-Neelsen
- (se positivo, não pode ser considerada de imediato Mycobacterium tuberculosis devido à existência de uma bactéria saprófita dos genitais externos, designada por Mycobacterium smegmatis)
- confirmacao p cultura (identificação do Mycobacterium tuberculosis faz-se em meio de Löewenstein-Jensen, a 37° C, durante cerca de 6 semanas)

OUTROS METODOS DE IDENTIFICACAO
1 ⦁ sistema BACTEC™
a) possibilita o isolamento de Mycobacterium spp. a partir de amostras pulmonares ou extra- pulmonares
2 ⦁ imunofluorescência;
3 ⦁ métodos moleculares (por exemplo: PCR).

Question 13

Importância de Estudo da Sensibilidade aos Antibióticos (TSA)

Answer 13

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- realizado apos resultado positivo para um agente etiológico bacteriano e sua identificação
-

Question 14

ANTIBIOTICO

Answer 14

• grupo de substâncias elaboradas por seres vivos ou sintetizadas quimicamente
• denominador comum a sua ação sobre os microrganismos
• aplicação na terapêutica das doenças infeciosas causadas por bactérias

Question 15

Definição de sensibilidade e resistência

Answer 15

bact sensiveis
- são inativadas por um dado antibiótico

bact resistentes
- antibiótico não é eficaz

MECANISMOS DE RESISTENCIA
1 ⦁ natural
a) ausência da estrutura ou da via metabólica alvo
2 ⦁ adquirida
a) mutações espontâneas
b) seleção ou de recombinação após transferência de genes (plasmídeos)

Question 16

Escolha do antibiótico

Answer 16

antibioterapia empírica
- inferência da bactéria responsável e escolha do antibiótico mais indicado
- situações de urgência e/ou de impossibilidade de realização de exames bacteriológicos

normal
- baseado nos nos resultados do diagnóstico bacteriológico e do estudo da sensibilidade aos antibióticos.
- colehita antes da antibioterapia

Question 17

Estudo da sensibilidade aos antibiótico (TSA)

Answer 17

• testar in vitro a sensibilidade das bactérias aos antibióticos
• realiza se p método das diluições ou do método por difusão em gelose
  !!(comportamento das bactérias in vivo pode ser diferente do observado in vitro)

METODOS DAS DILUICOES
- mt sensivel
- exige manipulações longas
- demasiado demorada para ser utilizada na prática laboratorial
(necessário testar cada bactéria isolada em relação a numerosos antibióticos)
1) tubos com mm suspensao bacteria
2) mete se concentracao crescente de antibiotivo
3) ver onde deixa de haver cultura visivel
4) determinação da concentração mínima inibitória (CMI)
(menor concentração de antibiótico capaz de inibir o crescimento de um dado microrganismo)
- CMI depende :
(da bactéria em estudo, da quantidade de inoculo, do tempo de incubação, da composição do meio de cultura e dos fatores ambientais) logo estas devem ser padronizadas p comparar diferentes antibioticos em relacao a um microorganismo ou um antibiotico face a dif microorg

METODO POR DIFUSAO EM GELOSE (ANTIBIOGRAMA)
- execução simples e rápida
- muito utilizado na prática laboratorial
- só dá resultados aproximados
- principio do teste :
(antibiótico depositado sobre um meio de cultura sólido se difundir neste, segundo um gradiente de concentração, de tal forma que a bactéria nele semeada não se desenvolve nas zonas em que a concentração de antibiótico for igual ou superior à CMI
1) ⦁ colocação de discos de papel impregnados com uma concentração conhecida de um antibiótico à superfície do meio de cultura sólido inoculado
2) ⦁ difusão dos antibióticos para a superfície do meio de cultura durante a incubação
3) ⦁ formação de halos de inibição em volta dos discos de papel sempre que concentração de antibiótico ≥ CMI
4) medição e comparação do diâmetro dos halos de inibição com os valores de referência previamente tabelados.
- condições experimentais sejam rigorosamente definidas
- interpretação detenha sobretudo um valor qualitativo

metodo de Kirby-Bauer
- processo padronizado mais adequado ( do difusao p gelose)
- pg 14

E-test®
- colocação de fitas de plástico impregnadas com um gradiente de concentração de antibiótico à superfície do meio de cultura inoculado.
- inibição do crescimento bacteriano produz uma elipse
- valor da CMI determinado no ponto de interseção do crescimento bacteriano com a escala na face superior da fita
(valores da CMI obtidos devem então ser comparados com os dados sobre a farmacocinética e a
farmacodinâmica existentes, a fim de se estabelecer qual o antimicrobiano mais efetivo e qual a melhor forma de administração)

Sistemas automáticos (ATB®)
- permitem determinar a sensibilidade aos antibióticos, em meio semi-sólido, com condições bastante semelhantes às da técnica de referência
1) 16 grupos de duas cúpulas
a) primeiro grupo (sem antibiótico) serve como padrão de crescimento
b) 14 grupos seguintes contêm antibióticos com uma ou duas concentrações (c e C)
c) último grupo não é utilizado
2) microrganismo a analisar é colocado em suspensão no meio de cultura e inoculado na galeria
3) Após 18 a 24 horas de incubação, a leitura faz-se com o sistema ATB® ou com o aparelho mini API®; o resultado adquirido classifica a estirpe em sensível (S), intermédia (I) ou resistente (R).

Question 18

Interpretação dos resultados

Answer 18

• leitura e a interpretação dos resultados efetua-se através da medição do diâmetro dos halos de inibição
  (mpt do futuro, imagina, metes disco com antibiotico na cultura, centro do disco e onde esta mais concentrado ne e a medida que se afasta vai ficando menos concentrado logo aquele com maior halo de inibicao, ou seja maior circulo onde nao ha crescimento bacteriano vai ter CMI menor, oq é bom)

classficacao estirpe bact
SENSIVEL
- atingida pelo antibiótico na dose habitual
INTERMEDIA
- não atingida pelo antibiótico na dose habitual, mas sim em altas doses, por via local ou se o antibiótico puder ser fisiologicamente concentrado
RESISTENTE
- a concentração de antibiótico que ela é capaz de suportar é muito mais elevada do que é possível obter in vivo