estudo p4 - Bioquimismo Bacteriano, Diagnóstico Micológico e Diagnóstico Laboratorial das Infeções da Pele e das Mucosas Flashcards
Microbiota da pele
Staphylococcus
- epidermis
- aureus
bacilos difteróides
Streptococcus
- α-hemolíticos
Peptostreptococcus spp
Malassezia sp.
agentes etiológicos mais provavelmente envolvidos num quadro clínico típico de uma infeção da pele e mucosas
- bactérias, vírus, fungos ou parasitas
- vias de infeção são muito variadas
INFECOES
SUPERFICIAIS
- atingem a superfície cutânea ou mucosa
PROFUNDAS
- abcesso (acumulação de pus numa cavidade neoformada)
- fleimão (inflamação do tecido conjuntivo)
- adenite (inflamação dos gânglios linfáticos)
SEROSAS
- afetam a pleura, o pericárdio, o peritoneu ou o líquido sinovial
FOLICULITE
- inflamação que atinge o óstio ou mais profundamente o bolbo piloso
- geralmente causada por Staphylococcus aureus ou Proteus spp.
FURUNCULO
- inflamação aguda de todo o epitélio do folículo piloso
- originada por S. aureus
IMPETIGO
- inflamação intra-epidérmica superficial
- por Streptococcus β-hemolíticos do grupo A (impetigo não bolhoso)
- por S. aureus (impetigo bolhoso)
ERISIPELA
- inflamação da derme mais superficial
- geralmente causada por Streptococcus β-hemolíticos do grupo A
- envolvimento proeminente dos gânglios linfáticos superficiais
CELULITE
- inflamação da derme profunda e do tecido celular subcutâneo
- por Streptococcus β-hemolíticos do grupo A ou S. aureus
- menos aguda do que as situações de erisipela
como é realizada a colheita de amostras no que concerne as infeções da pele e mucosas?
Colheita de lesões descamativas
- raspagem das escamas cutâneas
- envio ao laboratório entre duas lâminas ou em recipiente estéril
- (se for lesao da mucosa) recolha com zaragatoa esteril
Colheita de lesões exsudativas
(EXSUDATO PURULENTO (pus)
conjunto de material resultante da interacção entre o agente patogénico e o hospedeiro aquando de uma infecção bacteriana, sendo constituído por material necrótico, leucócitos, piócitos e bactérias)
- evitar contaminacao pela microbiota
- procedimento antes do inicio da antibioterapia
PROCESSO ABERTO
- (inf superficiais,pe)
- não realizar a antissepsia da pele
- colheita p passagem c zaragatoa esterilizada
- envio em tubo com soro
- metodo ideal seria puncao com agulha e aspiracao p seringa esterilizada
(imprescindível para a pesquisa de bactérias anaeróbias);
- amostra deve ser obtida a partir do ponto mais profundo da infecção
PROCESSO FECHADO
- punção com agulha e aspiração para seringa esterilizada (apos antissepsia da pele)
- (se abcesso ou fleimao) proceder-se também à drenagem terapêutica
DIAGNOSTICO LABORATORIAL
1) EXAME MACROSCOPICO
- apenas carácter presuntivo
- exsudato purulento proveniente das infeções superficiais ou profundas possui alguns aspetos relativamente sugestivos
(suas caract podem identificar a etiologia) (tabela)
2) EXAME MICROSCOPICO
exame citobacteriológico
- exame citológico (estudo dos elementos celulares) e bacteriológico (pesquisa e identificação do agente patogénico).
- exame direto consiste na obs lamina corada p técnica de Gram (estudo da celularidade do produto) e técnica de Ziehl-Neelsen (quando há uma suspeita de infeção por bactérias ácido- álcool resistente).
- predominio de polimorfonucleares (inf bacteriana) ou de mononucleares (micobacterias)
apos isto
- cultura bact
- isolamento estirpes
- indetif agente patogenico
- estudo susceptibilidade aos antibioticos
3) PORQUE O ESTUDO DO BIOQUIMISMO NA IDENTIFICACAO BACTERIOLOGICA
- após a obtenção de uma cultura pura (com uma só estirpe bacteriana), efetuam-se as provas bioquímicas e fisiológicas que permitem alcançarem o diagnóstico da espécie
Provas de tolerância a condições hostis do meio de cultura
- cultura de bactérias em meios seletivos
Provas de identificação de enzimas respiratórias
PESQUISA DE CATALASE
- identificação de cocos Gram positivo
- (estafilococos são catalase positivo)
PESQUISA DE OXIDASE
- quem apresenta citocromo oxidase em contacto com o reagente dimetil-p-fenilenodiamina formam um precipitado de cor azul-violeta
- diferenciar o género Neisseria (oxidase positivo) de outros cocos Gram negativo
- distinguir elementos da família Enterobacteriaceae (oxidase negativo) de outros bacilos Gram negativo
Metabolismo glicídico
- utilização de meios de cultura em que sejam incorporados um açúcar e um indicador de pH
- possibilita a identificação de muitas bactérias
- imp p estudo fam Enterobacteriaceae.
Metabolismo proteico
- proteólise de meios complexos
- pesquisa de enzimas proteolíticas
PRODUCAO DE GAS SULFIDRICO
- indica a degradação das peptonas e dos seus aminoácidos sulfurados
- positiva no caso de surgir, após a incubação, um sal negro de ferro ou chumbo que precipita
- identificação de enterobactérias,
- diferenciação de espécies H2S positivas e negativas
PESQUISA DE UREASE
- se ocorrer alcalinização, considera-se o teste positivo e a bactéria diz-se urease positiva
PESQUISA DE COAGULASE
- enzima desencadeia os mecanismos de coagulação na presença de sangue ou plasma
- formacao coagulo de fibrina visivel
- identificação de espécies do género Staphylococcus
PESQUISA DE ENZIMAS HEMOLITICAS
- cultura em gelose de sangue
- revela alfa/beta/deta hemolise (lise parcial/completa/nao detetavel
- caracterização de espécies do género Streptococcus.
Metabolismo lipídico
pesquisa de
LIPASE
- (quebra dos lípidos em ácidos gordos e glicerol)
LECITINASE
- hidrolisar a lecitina (das memb)
fatores de crecimento
- método de rotina na identificação de espécies do género Haemophilus
- meios de culturas enriquecidos sem sangue
- Aaplicam se discos com fator 5/ fator 10/ os dois
- perfil de crescimento da estirpe em torno dos diferentes discos, assim a espécie pode ser determinada.
3 a) pesquisas bioquímicas e fisiológicas atuais
Sistemas de identificação automática (API®)
- sistemas comercializados de utilização rápida e de leitura e/ou processamento automatizado
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DIAGNOSTICO MICOLOGICO
Classificacao micoses
superficiais
- + vulgares
- expansão do fungo limitada à zona exterior da epiderme, às unhas e raízes dos pêlos
- infecoes ectotrix : esporos vêem-se no exterior da haste capilar
- infeções endotrix : esporos dispõem-se ao longo e dentro da haste capilar
cutaneas
subcutaneas
profundas
- pouco freq
- graves
- podem afetar orgaos internos
- disseminam por via sang e linfatica
Características gerais dos fungos
- microrganismos eucariotas e heterotróficos
ESTRUTURA
- leveduriforme (unicelular)
- filamentosa (multicelular);
(dimórficos podem, durante o seu ciclo de vida, alternar entre as duas formas descritas.)
DIVISAO
- as leveduras por fissao ou gemulacao
APRESENTACAO
(os filamentosos)
- estruturas tubulares designadas por hifas (cenocíticas ou septadas) cujo conjunto se designa micélio
REPRODUCAO
ASSEXUADA
- formação de esporos assexuados ou conídeos por mitose
- formas diversas, sendo a diferente morfologia classicamente utilizada para diferenciar entre géneros e/ou espécies
SEXUADA
- formação de esporos sexuados
Colheita de amostras
(colheita de amostras de sangue e urina são idênticos aos realizados para o diagnóstico bacteriológico; porém, existem algumas especificidades)
pele
- recolha de escamas cutâneas após desinfecção com etanol a 70°
- zaragatoa do exsudato e raspagem dos bordos da lesão
cabelo*
- recolha de cabelos com raiz e escamas do couro cabeludo com uma pinça
abcessos
- recolha de pus com uma seringa estéril
exsudatos vaginais
- zaragatoa seca
Diagnostico laboratorial
Diagnóstico micológico
- exame histopatológico
Exame direto
- adição de lactofenol azul ou fucsina facilita a visualização de esporos ou células/hifas
- permite direcionar a metodologia de cultivo do fungo em estudo
- técnicas de histopatologiamais utilizadas são as técnicas de imunohistoquímica, PAS (ácido periódico-Schiff), Gomori (sais de prata) ou Giemsa.
Cultura
- meio de Sabouraud (+ apropriado)
- temperatura ideal de crescimento dos fungos é cerca de 28 a 30ºC
- crescimento pode ser mt lento
- leveduras produzem colónias redondas, pastosas ou mucóides
- fungos filamentosos originam o micélio aéreo
Identificação
CARACT MORFOLOGICAS
- particulares da colónia e das células/hifas fúngicas
- aparecimento de estruturas diferenciadas de reprodução assexuada
CARACT BIOQUIMICAS E METABOLICAS
- testes bioquímicos e fisiológicos a leveduras
DETECAO DE ANTIGENIOS FUNGICOS
- identificar espécies para as quais já se conhecem antigénios de superfície específicos
BIOLOGIA MOLECULAR
- Métodos de deteção do genoma dos fungos;
A) sequenciação de regiões conservadas do genoma dos fungos
B) polimorfismos do comprimento dos fragmentos de restrição
C) reação em cadeia da polimerase (PCR)
