ELISA Flashcards
el sistema inmune puede ser
innato
adaptativo
el sistema inmune innato es
rápido e innespecífico
el sistema inmune adaptativo es
lento y específico
cómo funciona el sistema inmune adaptativo
linfocito B reconoce antígeno
activación linfocito B
Proliferación
diferenciación
células plasmáticas secretan anticuerpos
linfocito B expresa IgG
Linfocito B de memoria
los anticuerpos deben de
identificarse
cuantificarse
localizarse
usos diagnósticos de anticuerpos
ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas
interacciones antígeno-anticuerpo
los anticuerpos utilizados son de
origen monoclonal
ELISA directo
anticuerpo primario + enzima que se unirá a antígeno de interés
se añade sustrato que al reaccionar con enzima proporcionará una señal visible
permite detección y/o cuantificación del antígeno de interés
sirve para analizar respuesta inmune frente a un determinado antígeno y tiene menor sensibilidad.
ELISA directo
ELISA indirecta
ac primario que se une a antígeno de interés
+
ac secundario marcado con enzima que se unirá a ac primario
se añade sustrato que al reaccionar con enzima proporcionara una luz visible
determina concentración total del anticuerpo en una muestra y es de alta sensibilidad. procedimiento largo.
ELISA indirecto
ELISA sandwich
ac capturado e inmovilizado
+
muestra con antígeno de interés que se unirá al anticuerpo
+
ac de detección que se unirá al ag
+
ac secundario
+
sustrato
análisis de muestras complejas
alta sensibilidad y especificidad
ELISA sandwich
método rápido objetivo y cuantitativo de análisis de células, núcleos, cromosomas, mitocondrias u otras partículas en suspensión
citometría de flujo
clúster de diferenciación
proteínas que se encuentran en superficie celular (CD)
para hacer una citometría de flujo es necesario que las células se encuentren en un
medio líquido (buffer de fosfatos) para que se alinien en fila
en la citometría de flujo se usa un sistema óptico (lásers y filtros) que iluminan células para
conocer tamaño y granularidad
conocer proteínas que expresan (marcadores)
la señal luminosa en la citometría de flujo se traduce en
señales electrónicas
la citometría de flujo se puede usar para
diagnóstico de leucemias, linfomas
VIH
cáncer
eficacia de tx antitumorales
los antígenos de diferentes agentes patógenos se reconocen por
anticuerpos
los antígenos se reconocen por __ en tejidos y por __ en líquidos corporales
inmunohistoquímica
inmunoensayos basados en fluorescencia
IgM
respuesta inmune agudo
IgG
respuesta inmune de memoria
SOUTHERN BLOT
técnica de lab para detectar secuencia específica de ADN en sangre o tejido
NORTHERN BLOT
técnica de lab para detectar secuencia de ARN específica en sangre o tejido
WESTERN BLOT
técnica de lab para detectar proteína específica en sangre o tejido
que se necesita para una SOUTHERN BLOT
aislar ADN
enzimas de restricción
electroforesis
desnaturalizar DNA
papel filtro nitrocelulosa
hibridación