Division cellulaire et croissance Flashcards
Combien de microorganismes retrouvent-on en moyenne dans un inoculum?
10 exposant 3 à 6
Une croissance bactérienne qui apparait sur un milieu de culture est…?
une population
S’il y a croissance en taille sur un milieu de culture, on en déduit quoi?
qu’il y a reproduction
Quel genre de reproduction est effectuée par les procaryotes qu’est-ce que cela implique?
asexuée, donc les cellules filles sont identiques à la cellule mère avec les mêmes gènes
Quelle est la division cellulaire la plus fréquente utilisée par les procaryotes?
par scissiparité
Quelle structure permet à la cellule bactérienne de se diviser par scissiparité?
la formation du septum
Où se forme le septum dans les cellules bactériennes bacilles vs coccis?
transversale à l’axe longitudinale pour les bacilles et à l’équateur pour les coccis.
Vrai ou faux? Les cellules bactériennes se divisent seulement par scissiparité.
faux, il y a par bourgeonnement, fragmentation d’hyphe ou formation exospore
Donnez des exemples d’organismes qui se divisent par bourgeonnement?
rhodopseudomonas acidophila
hyphomicrobium vulgare
Qu’est-ce qui est absolument nécessaire à la cellule de faire avant la formation du septum?
la duplication du matériel génétique (le chromosome)
Quels sont les 2 types de division par bourgeonnement?
le bourgeon peut croire directement à l’extrémité de l’organisme ou encore au bout d’un tube étroit.
En quoi consiste la division cellulaire par fragmentation d’hyphes?
les cellules filamenteuses en croissance qui donnent plusieurs plus petites cellules après fragmentation (plusieurs septums)
Donnez un exemple de microorganisme qui se divise par fragmentation d’hyphes.
nocardia
Donnez un exemple d’organismes qui se divise par formation d’exospore.
streptomyces
Vrai ou faux? Les endospores et les exospores sont des synonymes?
faux, les endospores sont des organismes de résistance alors que les exospores sont des excroissance permettant la division cellulaire.
En quoi consiste la division par exospores?
Ce sont des petits bourgeons qui croissent à l’extrémité des hyphes et qui vont se détacher de la mère (qui elle continue à vivre), donc pas de fission binaire
Qu’est-ce qui arrive si le septum commence à se former mais que l’étape préliminaire n’est pas fait ou totalement terminée?
il y a des mécanismes de sécurité qui bloque la duplication et donc inhibe la formation du septum
Nommez les étapes de formation d’un septum.
- invagination de la membrane cytoplasmique au niveau du centre
- croissance du peptidoglycane dans l’invagination
- cloisonnement des cytoplasmes
- séparation des 2 cellules filles (terminaison de synthèse des nouvelles parois)
Vrai ou faux? Tout comme les eucaryotes, les procaryotes possèdent un appareil mitotique qui permet la ségrégation des chromosomes pendant la mitose.
Faux, pas d’équivalent chez procaryotes, c’est encore à l’étude.
Combien d’approches existent-ils qui pourraient expliquer comment se fait la ségrégation des chromosomes dans les cellules procaryotes?
2 approches
Expliquez le principe de ségrégation par les mésosomes.
les mésosomes seraient des sites d’attachement des chromosomes (situés sur la membrane plasmique). une fois la membrane en train de croitre, les mésosomes s’éloigneraient l’un de l’autre pour séparer les chromosomes dans chaque cellule fille.
Nommez les facteurs impliqués dans la ségrégation des chromosomes dans l’approche moléculaire.
protéines ParA et ParB, plus ParS et MreB
Comment s’effectue la ségrégation des chromosomes par l’approche moléculaire?
Durant la réplication du chromosome, les deux origines de réplication (celle de l’origine et le nouveau) seraient en migration par l’interaction avec protéines parA et B. Il se rendraient dans les pôles de la cellule
Quel facteur présente en forme de spirale dans la cellule entrainement le déplacement des chromosomes pendant la ségrégation?
MreB
Quel mutant fut étudié pour découvrir et en apprendre d’avantage sur la formation du septum?
mutant ftsZ
Qu’est-ce qui arrive aux cellules ayant le mutant ftsZ ?
Elles vont croitre, se réliquer et ségréger leurs chromosomes, mais il n’y aura pas de septum créé.
La protéine ftsZ serait donc responsable de la formation du septum, mais comment6
la protéine formerait un anneau concentrique (même famille que tubuline) et qui resserrait au site de formation du septum, ce qui induirait l’invagination de la membrane.
Savons-nous comment le site de formation d’un septum est choisi par la cellule?
par l’étude des mutants mini-cell, car en leur présence le septum se formait au mauvais endroit dans la cellule.
Comment se forme une mini-cellule?
Par un septum formé au mauvais endroit, qui fait une cellule sans bagage génétique.
Quelle gène est responsable de la protéine MinCD?
gène min
Quel est le rôle de MinCD chez les cellules procaryotes ?
leur présence inhibe la formation de l’anneau ftsZ et donc pas de septum. sa concentration particulière selon l’endroit dans la cellule va dicter le site de formation du septum
Compléter la phrase. La fission binaire implique de nombreux … ainsi qu’un … complexe également.
mécanismes moléculaires complexes et synchronisme
Quelle est la formule de base représentant la progression géométrique spectaculaire de la division par scissiparité?
2exposant n
quand est-il possible de calculer le nombre de générations d’une croissance bactérienne6
lorsque la population finale et initiale sont mesurées
qu’est-ce que le temps de génération?
c’est le temps nécessaire au dédoublement de la population (en min ou hr/génération)
Est-ce que le temps de génération est fixe pour chaque type de microorgansime?
non, il varie en fonction du milieu dans lequel se trouve les bactéries
Si le milieu est pauvre en nutriment et facteurs de croissance, quel sera le temps de génération?
impossible à prédire sans chiffre mais il sera plus long que normalement
Quel organisme possède le plus rapide temps de génération, précisez.
vibrio natriegens avec 9.6 min
En combien de temps les bactéries E.Coli peuvent-elles se dédoubler?
21 min
Quel organisme a un temps de génération de 33heures?
treponema pallidum
Qu’est-ce que la constante K?
c’est la constante de vitesse de croissance moyenne, ça consiste en l’inverse du temps de génération (1/g)
Vrai ou faux? la croissance in vitro nous donnera des résultats similaires à une croissance in vivo?
faux, les croissances in vitro sont limitées en raison du manque de nutriments dans le milieu de culture
Quelles sont les 4 phases de la courbe de croissance?
latence, exponentielle, stationnaire et de mortalité
Décrivez ce qui se passe dans la phase de latence de la croissance bactérienne.
activité physiologique élevée, pas d’augmentation de la population et durée de la phase variable selon âge des cellules, leur état physiologique et le milieu
À quelle section de la courbe correspond la première pente (ascendante).
la phase exponentielle
Dans quelle période de la courbe de croissance, la croissance des bactéries est-elle constante et le temps de génération minimale?
phase exponentielle
Nommez des caractéristiques des cellules dans la phase exponentielle.
sont toutes identiques, leur métabolisme est maximale, ils utilisent des nutriments sans restriction
Vrai ou faux, la phase exponentielle est longue.
faux, elle est souvent courte
Que se passe-t’il pendant la phase stationnaire de la courbe de croissance?
il y a ralentissement de la croissance, la densité maximale de la population est atteinte, la population reste constante (autant de perte de viabilité que de gain), raréfaction des nutriments, mais augmentation des substances toxiques , formation d’endospore (si possible)taille et composition des cellules devient hétérogène
Donnez un exemple de déchet métabolique produit pendant la phase stationnaire?
streptococcus peut produire de l’acide lactique, qui fait baisser le pH et diminue la croissance
Vrai ou faux? Dans la phase de mortalité, toutes les cellules perdent leur viabilité au même moment.
Faux, la chute est constante
Compléter la phrase. Durant la phase de mortalité, il y a … de division cellulaire et la concentration en … est à son maximum.
absence et déchets métaboliques
Il y a-t’il présence de nutriments dans la phase de mortalité?
pratiquement pas non
Selon quoi peut varier la phase de mortalité de la courbe de croissance?
selon le milieu et selon l’espèce
La courbe de croissance classique représente une croissance bactérienne in vitro, c’est-à-dire…?
en vase clos, donc a volume fixe
Est-ce que les croissances en milieu clos sont représentatif de la croissance en nature?
non, le temps de génération changera beaucoup
Quel appareil permet d’effectuer une culture en vase non-clos?
chemostat
Qu’est-ce que le réacteur?
C’est le contenant principal du chemostat
Décrivez brièvement le principe d’un chemostat.
Contenant qui contient un volume fixe de milieu de culture, où celui-ci se renouvelle selon un débit prédéterminé. Le milieu utilisé est éliminé et les différents paramètres sont contrôlés.
Quels paramètres sont contrôlés dans le chemostat?
pH, T°, agitation du milieu et gaz
De quelle façon le volume est gardé constant dans le chemostat?
car il est renouvelé de façon constante
Comment est contrôlé le débit d’arrivée du milieu frais dans le chemostat?
selon le taux de dilution, soit la quantité de milieu renouvelé par heure
par quoi est dicté le taux de croissance dans un chemostat?
par le taux de dilution
si 2 litres sont ajoutés au milieu chemostat par heure, quel est le taux de dilution?
impossible à dire, car le volume du réacteur n’est pas connu.
dans un réacteur de 1 litre, on impose un taux de dilution de 2h-1, quelle est la quantité de milieu renouvelé en 1h?
2 litres
Dans un chemostat, sous quelle section de la courbe de croissance se trouve les microorganismes?
phase exponentielle
Vrai ou faux? Dans un chemostat, il n’est pas possible de changer de le degré de la phase exponentielle des bactéries en croissance.
faux, selon le taux de dilution en fonction du taux de croissance, il possible de diminuer ou augmenter le degré de la pente
Si le taux de dilution est plus petit que le taux de croissance des bactéries dans un chemostat, qu’en est-il des conditions?
les conditions sont limitantes
Quel est le taux de dilution préférentiel pour être en conditions optimales dans un chemostat?
taux de dilution qui est égale au taux de croissance de l’organisme présent dans le réacteur
qu’advient-il des organismes dans un chemostat où le taux de dilution est plus grand que le taux de croissance? Pourquoi?
ils se font laver, ils disparaissent du réacteur, car pas le temps de se dédoubler avant le changer du milieu, sont donc vu comme des déchets
quelle est la pertinence biologique à l’utilisation d’un chemostat?
il représente d’avantage ce qui se passe in vivo (en nature)
quel organisme a un temps de génération de min in vitro et h in vivo?
streptococcus salivarus
Quelles sont les 3 approches possibles pour mesurer les croissances bactériennes?
énumération cellulaire
quantification de la masse cellulaire de la population
quantification d’une activité ou constituant cellulaire
Est-ce que la chambre de petroff-hausser permet de distinguer des cellules viables ou non? expliquer.
non, elle ne permet pas la distinction, car les cellules mortes et vivantes sont semblables à l’eau à nu.
Décrivez grossièrement le fonctionnement de la chambre de petroff-hausser.
la chambre permet de compter les microorgansimes dans un espace et volume connu
Qu’est-ce qui est observé à travers une chambre de petroff-hausser et comment cela est-il utile?
un carré fait de carreaux, mesurant mm carré. le nombre d’organismes comptés dans ce carré de 1 mm carré sont ensuite multiplier par 50 et par 10 cube pour obtenir le total (en comptant le volume).
Quels sont les avantages de la méthode de chambre petroff-hausser?
rapide et minimum d’équipement requis
Quelle taille de population est requise pour observation à la chambre de petroff-hausser?
entre 10 exp7 et 10 exp8 populations/ml
de quel type de méthode de mesure de croissance est la chambre de petroff-hausser?
énumération cellulaire
Quel instrument est utilisé pour la méthode d’énumération électronique?
FACS
Est-il possible de visualiser les cellules vivantes avec la méthode d’énumération électronique?
oui, si des fluorochromes vitaux sont utilisés
Quel est le principe de la méthode d’énumération électronique?
c’est une cytométrie de flux où les populations sont en solution uniforme et le débit contrôlé de la solution passe par un laser visible/UV qui capte les colorations mises et comptent les bactéries
quels sont les avantages de la méthode au FACS?
rapide et peu couteux
quelle est la limite de l’utilisation d’une méthode d’énumération électronique?
la sensibilité visible, c’est-à-dire que les bactéries sont très petites et sont à la limite de détection de l’instrument
Quel genre de population peut d’être caractérisée par le FACS?
une population hétérogène
Qu’est-ce qui est nécessaire à l’Intérieur de l’instrument FACS pour énumérer les croissances cellulaires?
des témoins internes (billes de taille et concentration connue)
Vrai ou faux? Les spores peuvent être détectés par un appareil FACS?
Vrai
Quelle est la méthode d’énumération cellulaire la plus fréquemment employée?
l’énumération des unités viables
Combien de colonies sont nécessaires sur le pétri afin d’avoir une énumération d’unités viables, fiable?
entre 30 et 300 colonies
Quelles méthodes de culture pure sont utilisées pour faire l’énumération d’unités viables?
dilution séquentielle et étalement (profondeur ou surface)
qu’est-ce que UFC?
c’est une unité formatrice de colonie
Vrai ou faux? UFC est synonyme de colonie
Faux, car une cellule n’égale pas toujours une colonie et l’inverse non plus
Quels sont les avantages de la technique d’énumération des unités viables?
économique et permet de voir des cellules vivantes
Quels sont les inconvénient de la technique d’énumération des unités viables?
nécessite du temps et de l’espace pour l,incubation
Pourquoi un UFC n’égale pas une population?
car les milieux de culture sont souvent polyvalents et moins de 1% des espèces sont cultivables
Quelle étape supplémentaire est nécessaire à la technique d’énumération d’unité viable si la population est très diluée?
va nécessiter une filtration
Comment apparaisse les bactéries étudiés selon les méthodes turbidimétriques?
elles apparaissent trouble dans l’échantillon
Quel instrument est utilisé par une méthode turbidimétrique? Et à quoi cela sert-il?
spectrophotomètre, qui calcule la quantité de lumière absorbée
Pourquoi les bactéries peuvent former des troubles dans les échantillons?
car ils absorbent ou dispersent la lumière
Vrai ou faux? La méthode d’énumération turbidimétrique ne permet pas de distinguer les cellules mortes des cellules vivantes. expliquer.
vrai, car les cellules mortes ou vivantes sont pareils à l’oeil et ne pourront pas être distinguer.
Dans quel contexte est-il possible de créer une courbe étalon pour la méthode d’énumération turbidimétrique?
dans des conditions standardisées où l’espèce est la même et le milieu aussi
Quel est le nombre de populations requises pour effectuer la méthode turbidimétrique?
entre 10exp7 et 10exp8 UFC/ml
Quelle méthode d’énumération cellulaire est utilisée de façon routinière en labo?
la méthode turbidimétrique
Quelle méthode d’énumération fait appel au PCR?
la méthode moléculaire
Qu’est-ce que le PCR, quelle est son utilité?
amplification enzymatique d’une séquence spécifique, permet d’augmenter énormément le nombre de copies
La méthode moléculaire d’énumération requiert l’extraction total de …?
ADN
qu,est-ce que le qPCR?
permet une quantification vs témoins internes (ADN connu) qui nous dira le nombre total de copies/volume
quels sont les avantages de la méthode turbidimétrique?
rapide, permet de quantifier des organises non cultivables et permet de quantifier plusieurs organsimes à la fois
Quels sont les inconvénients de la méthode turbidimétrique?
appareil couteux
c’est très spécifique à ce qui est amplifié
la spécificité demande une longue mise au point
permet pas de distinguer cellules vivantes ou mortes
Quel type ADN est utilisé pour faire le PCR dans la méthode turbidimétrique et quel est l’inconvénient?
ADN environnemental, et plusieurs cellules sont non-viables dans ces échantillons
Quelles sont les 2 étapes principales qui permettent le calcul du poids sec, qu’est-ce que cela permet de quantifier?
la filtration, suivi du séchage à 100-150° C
quantification de la masse cellulaire
Pourquoi est-il important de sécher complétement l’échantillon afin de quantifier sa masse cellulaire?
car l’eau présente dans les bactéries change de beaucoup son poids
Vrai ou faux? Une cellule non-viable pèse en moyenne 2 fois moins que son poids viable?
faux, le poids est le même
Quelle allure a une courbe étalon de poids sec en fonction des UFC?
donne une droite
Quelle allure donne une courbe de croissance qui est fait en fonction du poids sec et non des UFC?
à la pente finale (phase de mortalité) disparait, car le poids de ne change pas à la mort des cellules
Cette méthode de mesure de croissance cellulaire est celle de choix pour les bactéries agrégés ou formant des hyphes.
méthode de quantification de la masse cellulaire
Donnez des exemples d’organismes étant des bons modèles pour la méthode de quantification de la masse cellulaire.
mycobacterium, streptomyces, mycètes
quel genre de population est étudié par une méthode quantification de la masse cellulaire?
population à densité élevée
Quelle méthode de quantification utilise une détermination chimique?
quantification d’une activité ou constituant cellulaire
Quels sont les composés représentatifs utilisés pour la quantification d’une activité ou constituant cellulaire?
azote totale, peptidoglycane, ADN, ATP, produits finaux de fermentation
Compléter la phrase. La quantification d’une activité ou constituant cellulaire nécessite des facteurs de … et son application est …
conversion et spécialisée
Vrai ou faux? Les méthodes de mesure de croissance sont toutes universelles.
Faux, ne sont pas universelles
Le choix de la méthode de mesure de croissance doit se faire selon quoi?
selon les expérimentations et les conditions
Quelle méthode de mesure de croissance est la meilleure pour étudié une population complexe en croissance?
méthode moléculaire