Diagnostica su LIQUOR

Question 1

Dove si trova il liquor?

Answer 1

Nei 4 ventricoli cerebrali e negli spazi subaracnidei e negli spazi spinali (lungo la colonna vertebrale)

Question 2

Quanti ml di liquor abbiamo?

Answer 2

150ml circa in un adulto, di cui:

• 30ml nei ventricoli laterali,
• 5ml nel 3° e 4° ventricoli
• 80ml negli spazi subaracnidei spinali
• 25 negli spazi cisternali e subaracnoidei cerebrali

Question 3

Da chi è secreto il liquor?

Answer 3

dai plessi coridei dei ventricoli laterali del terzo e quarto ventricolo, a una velocità di 500ml al giorno

Question 4

Che vuol dire che il cervello è immunoprivilegiato?

Answer 4

Che il sistema immunitario non entra direttamente nel cervello ma attiva una risposta infiammatria protettiva tramite piccoli pori in cui sono presenti delle zone immuno privilegiate, dove avviene uno scambio continuo tra le cellule residenti nel midollo osseo della scatola cranica e i precursori delle cellule immunitarie.

Question 5

Quali fattori influenzano i parametri liquorali?

Answer 5

1) Effetto meccanico legato alla pulsazione dei plessi coridei (come il pompaggio che facilita l’omeostasi)
2) La pressione (facilita la filtrazione e lo scambio),
3) Respirazione (quantitativo di ossigeno e pulsazione vascolare),
4) Pressione venosa,
5) Cambio di posizione e assorbimento liquorale di ioni e proteine in seguito a H2O.

Question 6

Dove si inserisce l’ago per la rachicentesi?

Answer 6

Tra L3 e L4

Question 7

Da cosa è fatta la barriera emato-encefalica?

Answer 7

Da diverse cellule unite da tight junctions (cellule di endotelio), in più cellule dell’astrocita ricoprono i vasi, neuroni, microglia

Question 8

Che patologie si ricercano nel liquor?

Answer 8

• emorraggia subaracnoidea (esa, in caso di TC negativa)
• Meningiti o meningoencefaliti
• Patologie neurodegenerative come Poliradicolonevrite (sindrome di Guillain-Barré), Sclerosi e Alzheimer

Question 9

Che vuol dire se il liquor è xantocromico dopo la centrifuga?

Answer 9

che c’è stata emorraggia cerebrale o un aumento di proteine dovuto a meningiti, meningoencefaliti etc

Question 10

Quando si parla di pleiocitosi?

Answer 10

quando ci sono 25-50 (media) o 50-500 (grande) presenza cellulare in liquor

Question 11

Cosa si fa in sospetto di encefalite spongiforme?

Answer 11

un RTQuick o un elisa per dosare la proteina responsabile (14.33)

Question 12

Cosa si fa in sospetto di sclerosi multipla?

Answer 12

elettroforesi su sangue e liquor, alla ricerca di anticorpi (perché è autoimmune contro proteine della guaina mielinica)

Question 13

quali sono i possibili casi di bande elettroforetiche in caso di sclerosi multipla?

Answer 13

1. No bande oligoclonali in siero e LCS: sintesi intratecale
2. Bande in LCS ma non in siero (è autoimmune)
3. bande in LCS e alcune diverse in siero (sintesi intratecale)
4. bande uguali (mirror pattern) è in siero
5. uguale in LCS e siero solo in un range di peso (gammapatie monoclonali), specifica sintesi di anticorpi diretti tutti verso la stessa proteina, restano comunque diversi (perché ognuno per stessa proteina) ma comunque monoclonali

Question 14

Che cos’è la Nefelometria?

Answer 14

si cerca la quantità di sostanza in sospensione in un liquido confrontando la luce diffusa da questa con quella diffusa da una sospensione a titolo noto. La sospensione è attraversata da un fascio di luce di data intensità e una cellula fotoelettrica misura l’intensità del fascio luminoso diffuso in una direzione che è, in genere, perpendicolare al fascio incidente. Se un’altra cellula fotoelettrica misura la diminuzione d’intensità della luce trasmessa nella stessa direzione di quella incidente, si parla più propriamente di turbidimetria. Lo strumento registratore si chiama nefelografo. Si usa molto per i batteri.

Question 15

Che vuol dire se trovo albumina in liquor?

Answer 15

Che c’è un danno di barriera (tight junctions rilassate o c’è un danno)

Question 16

Come potrei cercare albumina e immunoglobuline nel liquor?

Answer 16

Con una nefelometria

Question 17

Che cos’è il Qalb?

Answer 17

è un indice con cui si calcola il rapporto tra albumina liquorale e sierica, che dev’essre inferiore a un certo numero. Il Qalb può essere influenzato dall’età e hanno calcolato dei cutoff e indici di aggiustamento (QNorm) se Qalb > Qnorm c’è un danno di barriera.

Question 18

Quali sono i marcatori della malattia di alzheimer riscontrabili nel liquor?

Answer 18

beta amiloide 40 (Caa) e 42 (alzheimer) (ammassi extracellulari), Tau e Ptau (strutturali dell’assone, aggregano in groviglio intracelulari), e rapporto AB40/42 e Tau/Ptau

Question 19

Come ci si aspetta di trovare i marcatori in caso di alzheimer?

Answer 19

bassa beta amiloide e alta tau e tau fosfatasi

Question 20

Qual è la conferma definitiva di alzheimer?

Answer 20

dopo la morte con autopsia: se nel cervello ci sono grovigli neurofibrillari intracellulari causati da accumuli di proteine tau o presenza di placche di betamiloidi, extracellulari, è alzheimer

Question 21

Cosa succede se l’APP è tagliata dall’alfa secretasi?

Answer 21

si divide in alfa soluble app e in C83, poi tagliata da gamma secretasi per diventare p3 (solubili)

Question 22

Cosa succede se l’APP è tagliata dalla beta secretasi?

Answer 22

si divide in beta soluble APP e C99, poi tagliata dalla gamma secretasi in betamiloide 40 e 42 (insolubili, di 40 e 42 amminoacidi)

Question 23

A cosa serve la beta amiloide?

Answer 23

potrebbe avere funzione batteriocita o fa da mastice

Question 24

a cosa serve la Amiloid Precursor Protein?

Answer 24

protettivo per vasculotrofia, forse

Question 25

Cosa succede se ci sono accumuli di beta amiloide?

Answer 25

stress ossidativo e richiamo infiammatorio, si attiva la microglia, morte neuronale e rilascio di tau e tau fosfatasi

Question 26

La beta amiloide è sempre insolubile?

Answer 26

se è beta oligomerica è solubile, se è fibrillare è insolubile, perché ha conformazione a beta foglietto

Question 27

Dove aggrega la beta amiloide 42?

Answer 27

a livello parenchimale

Question 28

Come si misura la beta amiloide e tau e ptau?

Answer 28

Con un elisa classico; kit commerciale della fujirebio innotest-beta amyloide. C’è un data sheet con info che servono, partendo da che test è e come è costruito.
La beta amiloide si attacca anche alla plastica, si possono usare solo tubi di polipropilene. Oggi si usano anche biglie magnetiche a cui si lega l’antigene, così “non si fa coating”. Kit elisa si usa poi con il lumipulse.
Il dosaggio dei marcatori da Alzheimer può esere fatto tramite elisa; ma i marcatori al giorno dopo non sono più misurati con elisa ma automatizzati. C’è cartuccia con già tutti i reagenti e non si fa altro che riempirlo con lcs. Si usa il Roche Cobas & elecsys.