Determinarea activitatii ureazei

Question 1

Cum arata formula activitatii ureazei?

Answer 1

H2N-CO-NH2 + H2O ——-> CO2 +2NH3

Question 2

Care este Principiul metodei activitatii ureazei?

Answer 2

1. Enzima este incubata cu substratul dizolvat intr-o solutie tampon pH=7.
2. Dupa 15 min, reactia este inhibata prin adaugare HgCl2, deoarece ionii Hg2+ inactiveaza ireversibil enzima, legandu-se la gruparea -SH din centrul activ.
3. Cantitatea de NH3 rezultata din reactie se titreaza cu o solutie de HCl.

Question 3

Care este Metoda de dozare a activitatii ureazei?

Answer 3

i. Se utilizeaza metoda titrimetrica deoarece unul dintre produsii de reactive este o baza.
ii. Pentru a determina activitatea ureazei prezenta in conc diferite in acelasi volum din diferite probe se traseaza intr-un grafic variatia conc P in functie de conc E.
iii. Se obtine o dreapta deoarece viteza de reactive este proportionala cu conc E.
iv. Prin extrapolare se poate determina enzima prezenta intr-o proba necunoscuta.