Cytosquelette Flashcards
Qu’est-ce que procure le cytosquelette aux cellules?
Le cytosquelette procure aux cellules leur robustesse, leur forme, leur habileté à se déplacer et leur élasticité.
Ils permet aux cellules de se déformer lorsqu’elles se déplacent.
La forme des cellules est définie par quoi? La forme des cellules détermine quoi?
La forme des cellules est définie par leurs interactions avec l’environnement; les réorganisations du cytosquelette permet à la cellule de s’adapter à son environnement et sont donc contrôler par la signalisation cellulaire.
La forme des cellules détermine leur fonction; la dérégulation de la forme cellulaire est au coeur de plusieurs désordres pathologiques
Des modifications dans la forme des cellules sont associées à quoi?
Des modifications dans la forme des cellules dans l’organisation du cytosquelette sont associées avec, et régulent des processus cellulaires cruciaux tels que la motilité, la division et la différenciation cellulaire.
Les fonctions du cytosquelette dépendent de trois types de filaments. Quels sont-ils? Quelles sont leurs fonctions?
- Les microfilaments d’actine (MF ou F-actine): forme de la surface cellulaire, locomotion, contractilité et
polarité; - Les microtubules (MT): position des organites, forme,
transport intracellulaire; - Les filaments intermédiaires (IF): fournissent la résistance mécanique et élastique (noyau).
Comment comparer les trois types de filaments?
Ils possèdent des propriétés mécaniques et dynamiques et des rôles biologiques distincts.
Comment caractériser la dynamique du cytosquelette?
Les filaments du cytosquelette sont dynamiques et adaptables. Ils sont solubles, donc
Réorganisation très rapide
Dans un état de flux perpétuel
Les MT et les MF sont construits à partir de quoi? De quoi sont-ils capables?
Les MT et les MF sont construits à partir de sous-unités qui peuvent diffuser rapidement dans le cytoplasme
Capable d’une réorganisation rapide.
Quels sont les détails des MT et des MF? Comment caractériser leur strucutre? Quel type de filaments forment-ils? Ils utilisent l’énergie sous quelle forme?
Ils sont formés de sous unités compactes et globulaires
Les MT sont formés de tubuline et les MF d’actine (très conservées au fil de l’évolution)
Structure asymétrique: se lient les uns aux autres tête à queue
Ils forment des filaments polaires avec des extrémités avec des propriétés différentes qui pointent tous dans une direction (polarité)
Ils hydrolysent ATP et GTP. La tubulaire hydrolyse du GTP tandis que l’actine hydrolyse l’ATP.
Quels sont les détails par rapport aux IF? Ils sont formés de quel type de sous-unités? Ils utilisent quel type d’énergie?
Les IF sont formés de sous-unités allongées et fibreuses
Ils n’hydrolysent pas d’ATP ou de GTP.
Ils ne sont pas polaires.
Comment les sous-unités du cytosquelette (MT-MF et IF) sont maintenues ensembles? Qu’est-ce que cela permet?
Par des interactions faibles non-covalentes ce qui permet l’assemblage et le désassemblage rapide.
Qu’est-ce que les protéines accessoires contrôlent? Qu’est-ce qu’elles incluent?
Contrôlent l’assemblage et le désassemblage (remodelage) à des endroits spécifiques (distribution
spatiale), et le comportement dynamique (stabilité, longueur, cinétique, nombre, attachement).
Elles mettent le cytosquelette sous le contrôle des signaux intra- et extracellulaires
Elles incluent les protéines motrices qui transforment l’énergie de l’hydrolyse de l’ATP en force mécanique ce qui permet le déplacement d’organites ou des filaments eux-mêmes
Comment caractériser la sous-unité d’actine? Est-elle conservée au fil de l’évolution? Comment expliquer son abondance? Elle possèdent un site de liaison pour quoi?
La sous-unité d’actine et composée d’une seule
chaîne globulaire polypeptidique (G-actine: actine globulaire)
Très conservée
Protéine très abondante: ~10% des protéines totales
dans les cellules musculaires
Site de liaison pour ATP/ADP
Comment expliquer l’assemblage des microfilaments? Quelle est la différence entre ses deux extrémités?
Les sous-unités
s’assemblent tête-à queue (liée à ATP). Cela forme un filament polarisé (F-actine)
et flexible
Extrémité (+) à croissance rapide
Extrémité (-) à croissance lente
De quoi est composé le filament?
Le filament est composé de 2 protofilaments parallèles
s’enroulant l’un autour de l’autre en une hélice. Il y a la pointed end (-) et la barbed end (+) ce qui évoque la polarité structurale.
Quelle est l’étape limitante de la polymérisation d’un filament d’actine? Quelles sont les caractéristiques?
C’est l’étape de la nucléation. Cette étape est très peu efficace.
Les courts oligomères de quelques sous-unités sont instables et se désassemblent facilement.
Besoin d’un agrégat initial ou noyau: stabilisé par de nombreux contacts.
Le processus initial d’assemblage du noyau s’appelle la nucléation.
L’instabilité des petits agrégats crée une barrière cinétique, donc une phase de latence
Elle est suivie par une phase d’élongation rapide.
Expliquez la phase de la nucléation dans un tube à essai.
Durant cette phase, il est possible de voir que c’est latent. Il n’y a pas grand chose qui se passe lors de la formation du noyau de l’actine. Dépendamment des concentrations critiques, la vitesse de polymérisation va augmenter. Il y aura l’atteinte d’une phase de plateau lorsque les concentrations critiques vont se stabiliser pour atteindre l’équilibre.
Expliquez comment l’ATP est utilisé par les filaments.
Les monomères d’actine dans le cytosol portent un ATP
Cet ATP est hydrolysé en ADP une fois dans le
filament
L’ADP demeure dans le filament jusqu’à la dissociation du monomère
La forme liée à l’ATP est plus stable, donc l’hydrolyse de
l’ATP réduit l’affinité du monomère, ce qui augmente la probabilité de dissociation et favorise la dépolymérisation.
Quelles sont les caractéristiques des deux types de structures filamenteuses des filaments d’actine?
2 types de structures filamenteuses co-existent: la forme T (liée à l’ATP) et la forme D (liée à l’ADP)
L’énergie libre libérée par hydrolyse de l’ATP en ADP est mise en réserve dans le polymère. Une fois l’ATP hydrolysée, il y a un changement de conformation ce qui rend la forme D moins attachée au polymère et qui favorise sa dissociation.
Quelles sont les différences entre la constante de dissociation (KD) de la forme D et de la forme T?
KD (koff/kon) de la forme D est plus importante que la KD de la forme T
Les concentrations en sous-unités libres: la forme D (l’extrémité -) se raccourcit et la Forme T (l’extrémité +) s’allonge
De quoi dépend la forme D et la forme T?
L’existence d’une forme T ou D aux extrémités d’un
filament dépend de la vitesse d’hydrolyse et d’addition
La vitesse d’addition d’une sous-unité (s.u.) équivaut à la
concentration en actine libre ((C) x kon)
Si C > Cc(D) et Cc(T), il y a l’addition de sous-unités aux 2 extrémités avant hydrolyse donc le filament restera sous la forme T
Si C < Cc(D) et Cc(T) l’hydrolyse se produira avant
l’addition d’une autre sous-unité donc les 2 extrémités seront sous forme D et le filament raccourcira
À une conc. intermédiaire de sous-unités, Cc(T) < C < Cc(D) : la forme D raccourcit et la forme T s’allonge.
Qu’est-ce que la concentration critique (Cc)? Qu’est-ce que la concentration de sous-unités (C)?
Concentration critique (Cc) est différente aux deux extrémités.
La concentration critique (Cc) est la concentration en monomères libres à
laquelle il y aura un taux d’addition de monomères d’actine équivalent (égal)
au taux de dissociation de monomères; In vitro: Cc+ > 0,2 µM
La concentration de sous-unités (C) équivaut à la quantité de sous-unités libres.
Pourquoi in vivo la concentration d’actine libre à l’équilibre est plus haute?
La concentration d’actine libre à l’équilibre (Cc) est plus haute car il existe
des mécanismes qui empêchent l’actine monomérique de polymériser (protéines accessoires).
Que se passe-t-il à une concentration intermédiaire de sous-unités?
À une concentration intermédiaire, il y a une
addition plus rapide que l’hydrolyse à l’extrémité + et plus faible à l’extrémité -
L’extrémité + est de Forme T
L’extrémité - est de Forme D
Ainsi le filament ajoute des s.u. à l’extrémité + et
en perd simultanément à son extrémité -
Ceci conduit au «Treadmilling» ou « vissage par vis sans fin »
Vrai ou faux? Lors du treadmilling, la longueur totale du filament augmente.
Faux. À une certaine concentration de sous-unités, la croissance du MF à l’extrémité « plus » est
exactement équilibrée par la décroissance à
l’extrémité « moins ».
Les sous-unités effectuent alors un cycle rapide
entre l’état libre et filamenteux, et la longueur
totale du filament ne change pas.