Cycle cellulaire pt4 Flashcards
RLF
Replication Licensing Factor
Qu’assure l’activité du RLF
Que l’ADN est répliqué une seule fois dans le cycle cellulaire
Comment marche le RLF?
Doit se lier à l’ADN non répliqué et discriminer les formes répliquées des formes non-répliquées du génome
SPF
S-phase promoting factor
Que montre la purification de RLF?
RLF comprend deux fractions: RLF-M et RLF-B
RLF-M
Complexe de plusieurs polypeptides (92-115 kDa) contient MCM-3
MCM-3
mini-chromosome maintenance,
Comment évolue la quantité de MCM-3 en phase S?
Diminue.
Que se passe-t-il si quantité faible de MCM-3?
Son Immunodéplétion entraine l’absence de réplication, peut être restaurée par ajout de MCM-3 ou fraction RLF-M
RLF-B
Candidat cdc6, transcription périodique avec pic qui culmine au moment de l’initiation de la réplication
Où est localisé le RLF-B?
ORC (Origin Replication complex)
Cdt1
Essentiel à l’initiation de la réplication de l’ADN
Rôle de la géminine
inhibiteur de la réplication de l’ADn
Cdc6
essentielle pour le passage de RLF-M à l’ADN
Que se passe-t-il entre G1 et S?
Phosphorylation de plusieurs protéines ce qui va permettre à la fois l’ouverture du complexe et le recrutement de plusieurs protéines
Pourquoi l’activité des Cdk est-elle nécessaire à la formation des pré-complexes de réplication?
Chargement et formation de complexes avec les protéines Sld2, GINS, Dpb11, Pol-epsilon, Sld3, cdc45
Rôle couple Cycline A - cdk2
essentiel aux origines de réplication
Mcm7
sert d’ancrage aux S-ckds au niveau de la chromatine
Interaction cycline A-Mcm7
Cycline A mutée: défaut d’entrée en phase S et réplication
Inhibition de la re-réplication
Dégradation ORC1 et inactivation des autres ORC
Exportation nucléaire et inactivation de Cdt1
Inhibition de Cdt1 par la Géminine qui empêche le chargement de Cdt1 sur l’ADN
Domaines de la Géminines
1 N-ter: impliqué dans l’induction neurale précoce
1 C-ter:inhibition de la réplication, empêche l’accrochage/chargement de Cdt1 sur la chromatine
Évolution de la Géminine
Présente une accumulation en phase S, G2 et M puis une phase d’instabilité/dégradation en G1
Dégradation de la géminine
via l’ubiquitin ligase APC
Perte de la géminine
Re-réplication intensive (endommagements à l’ADN)