cromatografia Flashcards
LC-MS/MS. Cosa è ?
cosa è la cromatografia? a cosa serve? descrivine i componenti e il funzionamento. qual è l’output?
quali sono le principali tecniche di cromatografia liquida ? elencale e spiegale
Le possibili tecniche di cromatografia liquida (a differenza della gas cromatografia qui la fase mobile
è data da un liquido e non da un gas) sono: -
Cromatografia liquido-liquido. → la fase stazionaria è data da un liquido legato
chimicamente ad una superficie solida; il meccanismo cromatografico è la ripartizione
dell’analita fra questi 2 liquidi che sono fra loro immiscibili. - - - -
Cromatografia liquido-solido. → la fase stazionaria è data da un solido in cui l’equilibrio è
dettato dall’adsorbimento dell’analita dalla fase solida.
Cromatografia scambio ionico. → prevede l’utilizzo di una resina come fase stazionaria che
permette di scambiare anioni o cationi tra fase mobile e fase stazionaria.
Cromatografia Size exclusion. → la fase stazionaria è data da un reticolo polimerico in cui il
meccanismo cromatografico si basa su di un azione di setaccio molecolare.
Cromatografia di affinità. → la fase stazionaria è data da un liquido nel quale sono presenti
dei gruppi in grado di interagire in maniera specifica con un determinato analita.
Disegna un cromatogramma e spiegalo. spiegale informazioni qualitative e quantitative.
HPLC. Che vuol dire ? come funziona? spiega com’è la fase stazionaria e quella mobile. spiega la fase normale e la fase inversa
reversed phase liquid chromatography. RP-HPLC. come funziona? cosa è il gradiente di eluizione? Che sostanze si introducono per variare il gradiente?
perchè con esi si può usare solo la fase inversa? parla dei punti di ebollizione del solvente. si può usare DMSO come solvente? quali solventi sono adatti?
la sorgente esi tollera alte concentrazioni saline ?
100 e 101
diametro colonne HPLC. cosa determina? perchè usare colonne capillari e nano colonne? qual è lo svantaggio?
size exclusion chromatography, SEC. descrivi il cromatogramma ottenuto. descrivi come questo può essere utile per scopi qualitativi.
parla della modalità di lavoro full scan. spiega che significa total ion current.
SIM, select ion monitoring. spiega che significa total ion current. spiega perchè la sensibilità è più alta rispetto a full scan. parla anche della selettività
data dependent acquisition, DDA. a che serve? Come funziona? (suggerimento: threshold, frammentazione, product ion ). spiega come questa analisi determina sia il peso molecolare che la sequenza della proteina.
