Cours 9 (Thérapie Cellulaire) Flashcards
Définition simple des cellules Car-T
Lymphocytes T modifiés pour être plus efficace
Pour quels types de cancer les cellules Car-T sont utilisés?
Cancer des cellules immunitaires (Leucémie, Lymphome)
Les lymphocytes T cytotoxiques détruisent quoi?
Détruisent les cellules cancéreuses en reconnaissant un antigène tumoral dans le récepteur CMH-1
Comment font les lymphocytes T pour déclencher l’apoptose?
Vont faire des pores
Nommez le récepteur des lymphocytes T
TCR
Quels sont les 3 obstacles qui empêchent les lymphocytes cytotoxiques de détruire les cellules tumorales?
- Cellules tumorales n’expriment pas de protéines spécifiques aux tumeurs
- Lymphocytes cytotoxiques expriment des récepteurs inhibiteurs qui inhibe signalisation
- Cellules du microenvironnement (cellules infiltrant la tumeur + cellules avoisinantes) expriment des récepteurs inhibiteur qui réduisent l’action des cellules T
Quels sont les 2 solutions pour contrer les obstacles qui empêchent les lymphocytes cytotoxiques de détruire les cellules tumorales?
- Isole les cellules T cytotoxiques fonctionnelles du patient, les faire proliférer et les réinjecter
- Développer par ingénierie cellulaire, des cellules T cytotoxiques qui ne sont pas affecter par les obstacles décrits
Quel est le but du transfert de cellules T cytotoxiques pour combattre les leucémies?
Prendre les lymphocytes T du patient et les rendre meilleur pour attaquer/détruire les cellules cancéreuses
Nommez les 3 étapes pour faire : Prendre les lymphocytes T du patient et les rendre meilleur pour attaquer/détruire les cellules cancéreuses
- Préveler les cellules immunitaires (Lymphocytes T cytotoxiques)
- Ajouter de l’Interleukine 2 pour les faire proliférer in vitro
- Réinjecter les cellules aux patients
Quels sont les 2 catégories de transfert de cellules T?
- Lymphocytes qui infiltrent la tumeur (TIL)
- Cellules Car-T
Quel est l’avantage de l’utilisation de lymphocytes pour infiltrer une tumeur?
Greffe autologue (cellule du patient)
Quels sont les désavantages de l’utilisation de lymphocytes pour infiltrer une tumeur?
- Temps de culture ex-vivo de pls semaines
- Survie des TIL réintroduits plutôt faible et durée limitée
- Efficacité clinique moyenne (et $$$)
Que fait IL-2?
Agit comme un mitogène, il stimule la prolifération
Quel est le principal problème des Car-T cells?
La signalisation qui empêche le lymphocyte de mettre à mort la cellule cancéreuse
Décrire le taux de succès des Car-T cells.
Bon taux de succès et utilisé présentement en thérapie
Un anticorps spécifique à la tumeur permet quoi?
Permet de générer un récepteur chimérique
Quel est la partie de l’anticorps spécifique à la tumeur qui dit aux lymphocytes chiméériques d’envoyer ses particules cytotoxiques?
Partie constante
Pour les lymphomes B, quel est l’antigène normalement utilisé?
Antigène B220
La partie variable de l’anticorps spécifique cible quoi et c’est quoi?
Fragment qui détecte l’antigène sur la cellule de la tumeur
Nommez 2 corécepteurs de TCR
4-1BB
CD28
Pourquoi on veut que les co-récepteurs sont avec le récepteur TCR?
Car on veut avoir l’entièreté de la signalisation et on veut avoir 1 seule molécule avec le récepteur TCR et une version chimériques avec les 3 intracellulaires!
Dans la troisième génération des Car-T, qu’est-ce qui est ajouté aux lymphocytes T?
Les 2 co-stimulateurs (co-récepteurs) 4-1BB et CD28
Que fait la perforine?
Perfore la cellule ciblé en faisant des petits pores
Que fait la granzyme B et qu’est-ce que son action induit?
Granzyme B coupe Bid et procaspase 8, ce qui induit l’apoptose vu que Bid va aller déstabiliser Bax/Bak
Décrire la protéine BCMA
Récepteur de la famille des TNF
Ciblée dans le cas de cancer de type myélome
Vrai ou faux, les tumeurs solides expriment plus d’antigènes uniques que les tumeurs sanguines/immunitaires?
Faux, les cellules sanguines/immunitaires expriment plus d’antigènes uniques
Nommez un récepteur qui est présent sur toutes les cellules B?
CD19
Le choc de cytokines peut amener à quoi?
Peut amener à la mort, car trop de cellules Car-T sont activées et détruisent beaucoup de cellules dans un court intervalle de temps
Les cellules Car-T sont souvent utilisé pour traiter des tumeurs solides?
Non, les tumeurs solides représentent un grand défi pour l’utilisation de ces cellules
tumeurs solides souvent entourés de fibroses qui bloque l’arrivée des lymphocytes dans la tumeur solide
Décrire simplement la thérapie cellulaire dérivée des cellules souches.
Souvent par prise de sang, on peut prendre les cellules somatiques matures et les induire en cellules souches pour ensuite les reférivées dans le type de cellule qu’on souhaite
DONC mélanger de cellules corrigés et fonctionnelles
décrire le gène a-sarcoglycan
Protéine transmembranaire qui fait le lien entre le cytosquelette de la fibre musculaire et la matrice extracellulaire
Patients qui ont une mutation au niveau du gène codant pour l’alpha-sarcoglycan ont un nombre réduit de quoi?
Nombre réduit de cellules progénitrices (mésoangionblastes) de cellules musculaires striées
Quels sont les 5 étapes pour démontrer la possibilité d’utiliser la thérapie cellulaire pour régénérer les muscles
striées?
- Reprogrammation de mycoplasmes et fibroblastes humains à partir de cellules de patients LGMD2 en iPSC
- Dérivation des iPSC en mésoangioblaste et expansion cellulaire
- Correction de ces cellules avec expression d’un gène par transduction avec lentivirus
- Introduction des cellules dans des souris déficientes en LGMD2
- Analyse de la génération de fibres musculaires
Décrire le MyoD-ER.
Facteur de transcription inductible par le tamoxifène qui stimule la formation de myotubes (étape avant la formation des fibres musculaires)
L’inhibiteur de ROCK empêche quoi?
Empêche l’activation de la voie ROCK et l’induction de l’apoptose causée par la dissociation cellulaire
Décrire la Trysine
Protéase qui coupe les récepteurs de surface des cellules
Les HIDEMs (progéniteur, cellule différencié) perdent quoi?
Perdent l’expression des facteurs de pluripotence
Nommez un truc pour quoi est utilisé la cytométrie en flux?
Pour valider le profil d’expression de surface des HIDEMs matures
Les marqueurs de mésoangioblastes identifient quoi?
Cellules différenciées
Les marqueurs de pluripotence identifient quoi?
iPSC
Est-ce que les cellules HIDEMS peuvent former des myotubes in vitro?
Oui
Un myotube est formé de quoi?
Formé; de la fusion de pls progéniteurs (syncitium)
Décrire MyHC
Chaîne lourde de la myosine présente dans les myotubes
Décrire la Lamin A/C p/r aux HIDEMS
Noyau des HIDEMs puisque l’anticorps est spécifique à la forme humaine de la lamin A/C
Décrire Hoechst
Coloration de l’ADN pour voir les noyaux
Comment la correction des iPSC dérivés de patients est fait?
Avec un vecteur codant pour a-sarcoglycan
À quoi sert MyoD
Permet la différentiation des HIDEMs en myotubes
Comment HIDEM-LGMD2 corrigé-GFP est introduit dans les souris?
Introduit par injection intramusculaire dans la souris
Lamin A/C est le marqueur pour quoi?
Pour les HIDEMs
La Laminine marque quoi?
Marqueur de la matrice extracellulaire
Décrire l’injection via l’artère principale a permit quoi?
À aussi permis aux cellules de se retrouver au niveau de plusieurs muscles différents MAIS vu que injection par circulation sanguine, car perte donc moins présent et adhère moins au muscle
Décrire les vésicules extracellulaires
- Vésicules qui sont produites par une cellules
- Entourées d’une membrane cellulaire + contiennent du matériel biologique
- Pas la capacité de se multiplier comme un cellule entière
S- Servent à la communication cellulaire - On peut les utiliser comme biomarqueurs ou comme véhicule thérapeutique
Quels sont les 3 catégories de vésicules extracellulaires?
Exosomes
Microvésicules
Corps apoptotiques
Donnez l’ordre de grandeur des exosomes, microvésicules et corps apoptotiques.
exosomes (30-120 nm)
microvesicules (150- 1000 nm)
corps apoptotiques (1000-5000 nm)
Vrai ou faux, on retrouve sur les microvésicules les mêmes récepteurs de la membrane plasmique, donc c’est une mini version de la membrane de la cellule qu’elle provient?
Vrai
Les vésicules extracellulaires sont captées par quoi?
Par les cellules environnantes
Décrire la communication cellulaire.
Peut faire communication entre cellules environnementales et les exosomes/microvésicules
Décrire les corps apoptotiques.
Vésicules extracellulaires produites par les cellules apoptotiques
Pourquoi les corps apoptotiques peuvent être nocifs pour les cellules environnantes?
Ces corps apoptotiques peuvent être endocyté dans cellule environnante, donc devient problématique pour la cellule qui l’a mangé car peut propager l’apoptose (notamment si présence de PUMA)
Décrire les phosphatidylsérine.
Lipides qui sont normalement à l’intérieur de la membrane plasmique, mais quand clivé par caspace = Va venir sur la membrane externe
À quoi sert pansement avec microvésicules?
Pour améliorer la cicatrisation, sans trop de fibrose pour pas laisser de marque
Les exosomes font quoi sur les cicatrices?
Réduisent la profondeur et la largeur des cicatrices en changeant le ratio des types de collagène
Décrire le collagène I
Procure une force de résistance à l’étirement et à la pression
Décrire le collagène III
Procure la résilience, + souple
Qu’arrive-t’il avec les exosomes et les collagènes?
Collagène 1 diminue avec les exosomes et le collagène 3 augmente
Qu’est-ce qui est réduit au niveau de la cicatrice chez les souris traitées avec les exosomes?
Réduction du nombre de myofibroblastes (a-SMA)
Les myofibroblastes sont à l’origine de quoi?
À l’origine du tissu granulaire et de la fibrose
Le marqueur à a-SMA marque quoi?
Marqueur des myofibroblastes
Quantification du marqueur d’exosome de quoi sur les cicatrices traitées au PBS?
Marqueur d’exosome CD63
Les exosomes activent la signalisation de quoi?
Les exosomes activent la signalisation de ERK qui régule notamment la prolifération cellulaire
Décrire U0126.
Inhibiteur de la voie de signalisation ERK
À quoi contribue ERK?
Contribue au changement de la manière de formation de la cicatrice
