Cours 9 - Récepteurs et signalisation 2 (complet) Flashcards
Vrai/Faux : le récepteur à activité enzymatique intrinsèque tyrosine kinase (RTK) est transmembranaire
Vrai, un seul passage transmembranaire
Nommer l’exemple principal de RTK utilisé
EGFR (EGF récepteur)
Travaillent en dimère (deux récepteurs ensembles)
Decris structure general des trois parties des RTK
Nterm: grande diversite
Transmembr: aa hydrophobe permettant dancrer proteine dans la membrane (Val, Ile,Leu)
Cterm: activité cat kinase
Décrire le modèle de dimérisation de l’EGFR selon ses régions intra, extracellulaire et transmembranaire
SANS EGF = MONOMERIQUE
Extracell: EGF lie RTK (domaines I et III), ce qui expose domaine II et donc recept dimerise
Trans : motif N-terminal de cette région est important pour l’autophosphorylation induite par l’EGF
Intra : n-term reagit avec c-term de lautre recepteur. les 2 sont phospho
Quels sont les sites de phosphorylation du EGFR? À quoi servent-ils?
Les tyrosines, qui sont phosphorylées par transphosphorylation ou par d’autres tyrosines kinases solubles (TRUC : les récepteurs s’appellent tyrosine kinase…)
La phosphorylation de tyrosines spécifiques déclenche une signalisation intracellulaire correspondante
Quels sont les deux moyens d’inhibition des RTK?
1) Inhibiteurs empêchant la liaison du ligand
ex: cetuximab, herceptine (cancer poumon, colon, sein HER2+)
2) Inhibiteurs de l’activité tyrosine kinase du récepteur
ex: getifinib (cancer EGFR+)
Comparer les RCPG (récepteurs couplés aux protéines G) et les RTK (4)
gpcr: 7 passages transmembranaires, pas activite enzym, pas dimerisation, multiples confo
rtk: 1 passage, activite, dimerisation, 1 confo
Nommer les trois étapes du mécanisme de signalisation des RTK (après autophosphorylation)
1) Recrutement de protéines adaptatrices
2) Assemblage de complexes de signalisation
3) Activation des effecteurs
Vrai/Faux : seule la stabilisation de la forme dimérique du RTK par un ligand est nécessaire pour déclencher le mécanisme de signalisation
Faux, il faut aussi que les domaines intracellulaires soient phosphorylés
Comment les protéines adaptatrices font-elles pour interagir avec les récepteurs activés?
La phosphorylation du RTK attire les protéines, qui possèdent des domaines d’interaction protéine-protéine qui leur permettent d’intéragir
Donner la fonction des modules/domaines liés aux RTK vus dans le cours
SH2 : lie spécifiquement les tyrosines (Y) phosphorylées (Y-P), l’affinité de liaison pour les Y-P est plus élevée que pour les Y (d’où spécificité)
PTB : lie spécifiquement les motifs Asn-Pro-X-Tyr, doivent être en N-terminal pour une grande affinité
PH : lie fortement phospholipides de type phosphoinositol (PI) membranaires spécifiques. Protéines contenant ces domaines peuvent ainsi se relocaliser à la membrane dans le cadre d’une signalisation lipidique
SH3 et WW : lient des séquences riches en Pro de protéines cibles de la signalisation
PDZ : peuvent reconnaitre des lipides, des domaines C-terminaux ou des motifs internes de peptides cibles, donc lient des résidus hydrophobes de domaines C-terminaux protéiques, pour interaction protéine-protéine
FYVE : lien spécifiquement à phosphoinositols-3-P (PI3P)
Quel(s) module(s) se lient directement au RTK?
SH2 et PTB
Nommer les 4 voies de signalisation activées par l’EGFR
1) MAPK
2) PI3K
3) PLCy
4) JAK/STAT
Décrire les trois étapes de la signalisation MAPK et ses fonctions
1) Recrutement des protéines adaptatrices Shc et Grb2 : Grb2 est une protéine adaptatrice qui sert à lier protéines de signalisation au récepteur activé, elle est activée par sa phosphorylation par le récepteur activé, elle induit la transformation de Ras-GDP vers Ras-GTP
2) Activation des Ras : les Ras sont des protéines G monomériques ou GTPases, elles sont activées par le cycle du GDP/GTP. Ras-GTP induit la signalisation par les MAPKs
3) Activation des MAPKs : les MAPKs sont les molécules effectrices. Il y a bcp de MAPK impliquées (notamment Raf, MEK et Erk)
Fonctions :
- Régulation de la transcription génique
Schématiser le cycle de GAP et GEF ds l’activation des Ras dans la voie MAPK
GAP: GTP en GDP
GEF: GDP en GDP
Décrire la voie de signalisation PI3K
1) PI3K (kinase) est activée par le récepteur activé et phosphoryle le PIP2 membranaire en PIP3.
2) PIP3 peut ensuite activer l’Akt (sérine/thréonine kinase B) et PDK1 (autre kinase) qui elle aussi peut activer l’Atk, qui est donc l’enzyme effectrice
Fonction :
- Survie cellulaire
- Prolifération
- Différenciation
- Motilité
- Traffic intracellulaire
Décrire les trois étapes de la voie PLCy
1) Recrutement de PLCy
2) Transformation des PIP2 membranaires en IP3 et DAG
3) Activation de PKC par DAG et entrée massive de Ca2+ induite par IP3 qui agissent comme effecteurs
TRUC : même principe que pour RCPG, mais autres effets différents
Comment est-ce que la PLCy interagit avec le RTK?
PLCy possède 2 domaines SH2 et un SH3 entre un domaine PH, on se rappelle que SH2 peut lier les Tyr-P (qui sont présente sur un RTK activé)
Schématiser généralement le mécanisme d’arrêt de la signalisation des RTK
clathrine dependant et clathrine independant
eps15 et epsin reconnaissent ubi, ctrl traffic intracell des RTK
menes a la degradation par ESCRT
Décrire la résistance des RTK à leurs inhibiteurs médiée par Axl dans le traitement du cancer
Axl est un récepteurs apparentés aux EGFR qui compétitionne avec ceux-ci. Lorsque les EGFR sont inhibés par un médicament, les Axl peuvent être surexprimés et, dans ces conditions, activer ERK, Akt ce qui mène à la progression du cancer.
2 Exemples de cancer ou Axl surexp
cancer du poumon nsclc et traitement = IRESSA
cancer du sein
Décrire la voie JAK/STAT
1) JAK (tyrosine kinase) se lie au RTK activé
2) JAK induit phosphorylation de STATs (facteurs de transcription cytosoliques) qui migrent vers noyau et induisent voies de signalisation subséquentes surtout liées aux cytokines
Quelle étape de la voie JAK/STAT est visée par les inhibiteurs
La phosphorylation des STATs par JAK
Comparer structure et fonction des RTK versus récepteurs tyrosines phosphatases (RTP)
Structure :
- partie intracellulaire RTP contient deux domaines ; un pour l’activité enzymatique et l’autre pour la spécificité, l’activité et la stabilité des interactions protéiques
Fonction :
- RTP activés déphosphorylent protéines intracellulaires, pour les inactiver (généralement)
