Cours 6 Flashcards
Qu’est-ce que l’immunité humorale et cellulaire?
Humorale : contre les pathogènes extracellulaires
Ex : Lymphocytes B
Cellulaire : Contre les cellules infectées
Ex : lymphocytes T
Quelles sont les étapes de l’infection par SARS-CoV2?
1- Virus entre dans le corps et se lie à son récepteur cellulaire (ACE2)
2- Virus utilise la machinerie cellulaire pour traduire ses protéines et produire des nouveaux virus
3- Virus est relâché et peut être phagocyté par des cellules présentatrices d’antigènes (cellules dendritiques, macrophages, etc.)
4- Présentation des antigènes viraux au système immunitaire adaptatif : lymphocytes T et B
5- Production de cellules (T, B) et molécules (Ac) pour contrer l’infection
6- Mémoire immunologique : lymphocytes B et T
Que peux faire une exposition multiple à un antigène ?
Améliorer la réponse en anticorps :
-Augmentation de la quantité d’anticorps produit
-Changement d’isotype
-Augmentation de l’affinité des anticorps produits
À quoi sert la production d’anticorps polyclonaux?
1- Pour augmenter immunogénicité : couplage à un haptène (grossir la taille pour être mieux visible pour les lymphocytes B)
2- Pour augmenter l’affinité des anticorps produits : répétitions des immunisations
3- Évaluation in vitro de la spécificité et de l’affinité des anticorps
Détection d’un antigène (protéine, motif, etc.) dans un format liquide
ELISA
Détection d’un antigène;ne (protéine, motif, etc.) dans un lisant de cellules, d’organes ou dans un liquide
Immunobuvardage de type western
Isolement d’une protéine à partir d’une solution liquide puis précipitation du complexe anticorps-protéine pour l’identifier
Immunoprécipitation
Détection d’un antigène à l’aide d’un anticorps fluorescent sur/dans cellules en suspension
Cytométrie en flux
Détection d’un antigène sur des cellules ou sur des coupes histologiques
Immunocytochimie/immunohistochimie
Quelles sont les types d’ELISA?
Directe
Indirecte
Sandwich (plus spécifique)
Compétitif
Qu’est-ce qui est nécessaire pour ELISA?
Anticorps reconnaissant spécifiquement l’antigène désiré
Qu’est-ce qui est nécessaire pour immunobuvardage de type western?
Anticorps qui reconnait un épitope linéaire
En cytométrie en flux, les monocytes, lymphocytes T et NK sont elles positives ou négatives?
Monocyte : +- ; Expriment CD14 mais pas CD3
Lymphocyte T : -+ ; Expriment CD3 mais pas CD14
NK : - - ; N’expriment ni CD14 ni CD3
Résumé la technique ELISA (Cible, détection, quantitatif, nombre d’antigènes, force)
Cible : Antigène dans liquide (physiologique ou lisant cellule/organe)
Détection : Antigène conformationnel
Quantitatif : +++
Nombre d’antigènes : Un seul à la fois, nouvelles technologies (ex : Luminex) pour plusieurs simultanément (liquides biologiques)
Force : Plusieurs échantillons testés en même temps
Résumé la technique Western (Cible, détection, quantitatif, nombre d’antigènes, force)
Cible : Antigène dans lysat (cellule, organe) ou liquide physiologique
Détection : Antigène linéaire
Quantitatif : ++
Nombre d’antigènes : Un à la fois mais plusieurs en série (enlever un Ac et en mettre un autre)
Force : Plusieurs échantillons en même temps