Cours 5 Flashcards
À quel moment les macromolécules commencent à sédimenter?
Lorsqu’elles sont soumises à des accélérations énormes
Vrai ou faux.
C’est grâce à la découverte de l’ultracentrifugation qu’on a pu démontrer que les protéines sont des macromolécules de composition homogène et qu’un grand nombre de protéines sont composées de sous-unités.
Vrai
De quoi dépend la vitesse avec laquelle une particule sédimente dans une ultracentrifugeuse?
Sa masse
À quoi correspond la force de sédimentation créer par le rotor?
F sédimentation=(mw^2r)-(Vp*pw^2r)
F sédimentation=force centrifuge-force de déplacement de la solution
*p (rho): densité de la solution
À quelle force est opposée le déplacement d’une particule à travers une solution?
Une force de friction.
F friction=vf
Sous l’influence d’une force centrifuge, jusqu’à quel moment une particule va-t-elle accélérer?
Jusqu’à ce que toutes les forces soit contrebalancées et on atteint ainsi la phase stationnaire.
Vrai ou faux.
Il n’est pas possible de déterminer la masse d’une particule, m=M/N, à partir de son coefficient de sédimentation S et de son coefficient de friction f.
Faux. C’est possible.
L’analyse des complexes de macromolécules utilise toujours l’ultracentrifugation. La masse des constituants de ces complexes est exprimé sous quelle unité de mesure?
En Svedberg (S)
Pourquoi sont conçues les centrifugeuses préparatives?
Pour la préparation d’échantillons possédant des volume significatifs.
Au niveau des centrifugeuses préparatives, dans quoi est fait la sédimentation?
Dans une solution inerte comme le saccharose ou le chlorure de césium dans lesquels la concentration et donc la densité augmente du haut vers le bas du rotor.
Quelle technique permet la séparation des particules selon leurs coefficients de sédimentation?
L’ultracentrifugation en zones
Dans l’ultracentrifugation en zones, comment récolte-t-on les fractions à la fin de l’expérience?
En insérant une aiguille au fond du tube de centrifugation et en collectionnant le contenu du tube par un collecteur de fraction.
Quelle technique permet de séparer les macromolécules selon leur densité?
Centrifugation isopycnique (ultracentrifugation par densité d’équilibre)
Dans l’ultracentrifugation par densité d’équilibre, dans quoi est dissout l’échantillon?
Dans une solution concentrée d’une substance dense qui diffuse relativement vite comme les sels (CsCl ou Cs2SO4) et qui est subie à de hautes vitesses de rotation.
Donne des exemples de cas où on séparerait des macromolécules par leur densité.
-acides nucléiques
-ribosomes et polysomes
-virus
-organites subcellulaires
