Cours 1 - Cryo-microscopie électronique Flashcards
1
Q
Pourquoi utilise-t-on la microscopie ?
A
→ 1) Observer ce qui n’est pas visible à l’œil nu.
→ 2) Pour apprendre sur la structure et la fonction des éléments biologiques.
2
Q
Quelle est la relation entre la longueur d’onde et la résolution en microscopie ?
A
→ Une plus petite longueur d’onde permet une meilleure résolution.
3
Q
À combien équivaut 1 angström (1 Å) en nanomètre et en puissance de 10 ?
A
→ 1 Å = 0,1 nm = 10⁻¹⁰ m
4
Q
Quels sont les éléments communs entre un microscope optique et un microscope électronique ? (5)
A
→ Source de rayons,
→ Condenseur,
→ Spécimen,
→ Objectif,
→ Détecteur.
5
Q
Vrai ou Faux : Les microscopes optiques et électroniques fonctionnent selon des principes très différents.
A
→ Faux. Ils fonctionnent de manières similaires.
6
Q
Quelle est la principale différence dans la position de la source de lumière entre un microscope optique et électronique ?
A
→ Dans le microscope électronique, la source est placée en haut de l’appareil.
7
Q
Dans un microscope électronique, à quoi servent les lentilles magnétiques ?
A
→ À focaliser le faisceau d’électrons sur le spécimen.
8
Q
Complète : Un ______ courant entraîne un ______ champ magnétique.
A
→ fort ; fort
9
Q
Quels sont les deux éléments indispensables au fonctionnement d’un microscope électronique ?
A
→ Un voltage et du vide.
10
Q
Dans le microscope optique, que représente le détecteur ?
A
→ L’œil de l’observateur.
11
Q
Quelle est la source d’illumination dans chaque type de microscope ?
A
- Microscope optique : Une source de lumière visible.
- Microscope électronique : Une source d’électrons.
12
Q
Comment la lumière ou les électrons sont-ils focalisés ?
A
- Optique : Par une lentille condensatrice (Condenser Lens).
- Électronique : Par une ouverture de condensateur (Condenser aperture) et lentilles magnétiques.
13
Q
Quel est le chemin de détection de l’image ?
A
- Optique : L’image est observée directement à l’œil ou via une caméra.
- Électronique : L’image est détectée par un détecteur électronique.
14
Q
Quelle est la nature des lentilles utilisées ?
A
- Optique : Lentilles en verre pour focaliser la lumière.
- Électronique : Lentilles magnétiques pour diriger le faisceau d’électrons.
15
Q
Que deviennent les électrons dans un microscope électronique ? Sont-ils absorbés ou diffusés ?
A
→ Ils sont diffusés, ce qui introduit une différence de phase.
16
Q
Qu’est-ce qu’une différence de phase dans le contexte de la microscopie électronique ?
A
→ C’est une modification du décalage entre les ondes des électrons diffusés par rapport aux électrons non diffusés.
17
Q
Vrai ou Faux : Les détecteurs dans un microscope électronique peuvent détecter une différence de phase entre deux électrons.
A
→ Faux. Ils ne peuvent que compter les électrons.
18
Q
Qu’est-ce qui provoque la diffusion des électrons dans un microscope électronique ?
A
→ L’interaction entre les électrons et l’échantillon.
19
Q
Quelles interférences sont à l’origine du contraste de phase ?
A
→ Les interférences entre les électrons diffusés par le spécimen.
20
Q
Quels types de contraste peut produire cette interférence dans la contraste de phase ?
A
→ Du contraste positif et du contraste négatif.
21
Q
Vrai ou Faux : Le contraste est maximal quand le spécimen est en focus.
A
→ Faux. Il y a peu ou pas de contraste quand le spécimen est en focus.
22
Q
Complète : Le contraste augmente avec le ______.
A
→ défocus
23
Q
Pourquoi n’y a-t-il presque aucun contraste quand le spécimen est en focus ?
A
→ Parce que l’interférence entre les électrons diffusés n’est pas suffisante pour générer un contraste visible.
24
Q
De quoi dépend le processus d’interférence pour générer le contraste ?
A
→ De la distance entre l’échantillon et le point de focus.
25
Quel système est impliqué dans la création du contraste de phase ?
→ Un système d’interférence avec le flux d’électrons.
26
Qu’est-ce que la transformation de Fourier ?
→ C’est une opération mathématique ou physique qui permet de transformer un signal en ses fréquences constituantes.
27
Quels types de signaux peuvent être transformés par une transformation de Fourier ?
→ N’importe quel signal, comme un son, une image ou un signal électrique.
28
Complète : La transformation de Fourier permet de représenter un signal en ______ de Fourier.
→ espace
29
À quoi sert l’espace de Fourier ?
→ À représenter le signal selon ses fréquences plutôt qu’en espace réel.
30
Complète : Beaucoup d’info à ______ résolution, très peu à ______ résolution.
→ basse ; haute
31
Qu’est-ce que la fonction de transfert de contraste (CTF) ?
→ C’est une fonction mathématique qui décrit comment les aberrations dans un microscope électronique à transmission modifient l’image d’un échantillon.
32
Pourquoi la CTF est-elle importante en microscopie électronique ?
→ Parce que l’image détectée est dégradée par la CTF, et sa détermination permet de corriger cette image.
33
Vrai ou Faux : La CTF améliore automatiquement la qualité de l’image détectée.
→ Faux. Elle décrit les dégradations, mais permet ensuite de les corriger.
34
Quel est le lien entre la CTF et la fidélité de l’image ?
→ La CTF affecte la fidélité de l’image en modifiant certaines fréquences spatiales selon les aberrations présentes.
35
Pourquoi a-t-on besoin de détecteurs d’électrons en microscopie électronique ?
→ Pour obtenir une image à partir des électrons transmis ou diffusés.
36
Quels sont les trois types de détecteurs mentionnés ?
→ Le film,
→ La caméra CCD,
→ Le détecteur direct d’électrons.
37
Quels sont les avantages et inconvénients du film ?
→ Avantage : bonne qualité d’image ;
→ Inconvénient : difficile à utiliser car il doit être développé. Plus utilisé aujourd’hui.
38
Vrai ou Faux : Les caméras CCD sont très précises mais lentes.
→ Faux. Elles sont simples et rapides, mais peu précises, avec un nombre moyen d’images par seconde (IPS).
39
Complète : Le détecteur direct d’électrons est considéré comme le ______.
→ meilleur des deux mondes
40
Quels sont les avantages du détecteur direct d’électrons ?
→ Haute précision, haute fréquence d’acquisition (IPS), et performance optimale.
41
Quelle est la différence entre un détecteur indirect et un détecteur direct ?
→ Le détecteur indirect utilise un scintillateur pour convertir les électrons en photons,
→ Alors que le détecteur direct capte directement les électrons.
42
Quel est l’inconvénient d’un fort défocus ?
→ Il diminue la transmission du signal à haute résolution.
43
Complète : Pour bien voir quelque chose, il faut parfois augmenter le ______, ce qui donne beaucoup de ______.
→ défocus ; contraste
44
Quel compromis doit-on faire en microscopie entre contraste et résolution ?
→ Il faut choisir entre un bon contraste (avec défocus) ou une bonne résolution (avec moins de défocus), selon l’échantillon.
45
Quel est le rôle de la grille en microscopie électronique ?
→ C’est un support utilisé pour presque tous les échantillons de ME.
46
Quel est le diamètre typique d’une grille de ME ?
→ 2 mm.
47
En quel matériau est faite la grille de ME, le plus souvent ?
→ En métal, souvent du cuivre.
48
Complète : La grille doit être fixée à ______ pour être insérée dans le microscope.
→ un porteur
49
Pourquoi la grille est-elle faite en métal conducteur comme le cuivre ?
→ Pour éviter les surcharges et parce que c’est un bon conducteur.
50
Vrai ou Faux : La grille peut être réutilisée plusieurs fois avec n’importe quel type d’échantillon.
→ Faux. Elle ne peut pas être réutilisée pour des échantillons cryogéniques.
51
Quelle couche est déposée sur la grille pour l’observation ?
→ Une fine couche de carbone.
52
Quel est le rôle du porteur de spécimen en microscopie électronique ?
→ Il permet de fixer et insérer la grille contenant l’échantillon dans le microscope.
53
Quels sont les deux types de porteurs présentés ?
→ Le porteur à entrée de côté pour échantillon sec,
→ Le porteur cryo à entrée de côté pour échantillon cryogénique.
54
Quel type d’échantillon utilise un porteur cryo ?
→ Un échantillon cryogénique.
55
Complète : Le porteur cryo utilise ______ et ______ pour maintenir les conditions de l’échantillon.
→ de l’azote liquide (N₂ liq) ; le vide
56
Quelles sont les caractéristiques d’un porteur utilisé avec un échantillon sec ?
→ Il est utilisé pour les colorations négatives et ne nécessite pas de condition cryogénique.
57
Qu’est-ce qu’une autogrille ?
→ Une grille fixée dans une cassette de chargement pour un autochargeur.
58
Quels sont les avantages d’utiliser une autogrille ?
→ Elle permet d’analyser plusieurs échantillons
→ Assure une meilleure reproductibilité.
59
Complète : La cassette de chargement permet un ______ automatique dans le microscope.
→ Autochargement
60
Vrai ou Faux : Le porteur cryo est utilisé pour les échantillons colorés négativement.
→ Faux. Il est utilisé pour les échantillons cryogéniques.
61
Comment les images sont-elles formées en microscopie électronique ?
→ Par la diffusion des électrons par le spécimen.
62
Qu’est-ce qui cause le contraste dans une image de microscopie électronique ?
→ L’interférence entre le rayon incident et les électrons diffusés.
63
Pourquoi utilise-t-on du défocus en microscopie électronique ?
→ Pour amplifier le contraste, même si cela réduit la résolution maximale.
64
Vrai ou Faux : L’utilisation du défocus améliore à la fois le contraste et la résolution.
→ Faux. Elle améliore le contraste mais au détriment de la résolution.
65
Quel type de détecteurs permet une détection optimale des électrons à haute fréquence d’acquisition ?
→ Les détecteurs directs d’électrons (DED).
66
Où sont généralement montés les échantillons en microscopie électronique ?
→ Sur une grille de ME.
67
Quels sont les trois types de techniques présentées pour l’observation en microscopie électronique ?
→ Analyse de particules uniques (APU),
→ Tomographie,
→ Cristallographie à électron.
68
Quel est l’objectif principal de l’Analyse de Particules Uniques (APU) ?
→ Déterminer la structure des macromolécules biologiques.
- Purifier
- Homogénéités
69
Quels types de préparation peut-on utiliser en APU ? (2)
→ Coloration négative
→ Cryo-EM.
70
Vrai ou Faux : L’APU nécessite des échantillons homogènes et purifiés.
→ Vrai.
71
Quelle technique utilise le FIB-milling (fraisage par rayon d’ions) ?
→ La tomographie.
72
Complète : La tomographie permet d’analyser des échantillons ______, sans avoir besoin de les ______ ou de les ______.
→ in situ ; homogénéiser ; purifier
73
Quels sont les deux sous-types de la cristallographie à électron mentionnés ?
→ Cristallographie 2D et
→ Diffraction à électrons de microcristaux.
74
Que se passe-t-il lorsque des macromolécules biologiques sont déposées sur une grille de ME ?
→ Elles adoptent diverses orientations aléatoires.
75
Quel type d’image produit le microscope dans une analyse de particules uniques ?
→ Des projections 2D des volumes observés.
76
Complète : Ces projections 2D peuvent être utilisées pour reconstruire un volume ______.
→ 3D
77
Pourquoi les orientations aléatoires des particules sont-elles importantes ?
→ Parce qu’elles permettent de reconstruire la structure tridimensionnelle du complexe observé.
78
Quels sont les sept grands étapes d’une procédure expérimentale en APU ?
→ (1) Macromolécule biologique,
→ (2) Congélation ou coloration,
→ (3) Collecte de données,
→ (4) Sélection de particules,
→ (5) Alignement et classification,
→ (6) Reconstruction 3D,
→ (7) Modélisation.
79
Quelles sont les deux méthodes de préparation d’échantillons pour l’APU ?
→ La congélation (Cryo-EM)
→ La coloration négative.
80
Complète : La méthode APU est applicable à ______.
→ n’importe quelle molécule purifiée
81
Vrai ou Faux : L’APU nécessite des échantillons parfaitement homogènes.
→ Faux. Il est possible de gérer une certaine hétérogénéité.
82
Pourquoi les grandes molécules sont-elles des échantillons idéaux pour l’APU ?
→ Parce qu’elles génèrent plus de contraste.
83
Quel est le produit final de la procédure APU ?
→ Une modélisation 3D de la structure de la macromolécule.
84
Combien d’images sont typiquement collectées lors d’une expérience APU ?
→ Des milliers d’images.
85
Vrai ou Faux : Toutes les molécules, peu importe leur taille, peuvent être analysées efficacement en APU.
→ Faux. Il existe une limite liée à la taille des molécules.
86
À partir de quelle taille de protéine peut-on envisager l’analyse en APU ?
→ > 50 kDa pour les protéines standards, > 30 kDa pour les protéines membranaires.
87
Pourquoi les petites protéines sont-elles plus difficiles à analyser ?
→ Parce qu’elles génèrent moins de contraste.
88
Complète : Le contraste peut être artificiellement augmenté pour les petites protéines grâce à des ______.
→ micelles
89
Quel est le rôle du colorant en coloration négative ?
→ Augmenter le contraste en marquant les régions sans protéines.
90
Pourquoi la coloration négative permet-elle d’analyser peu d’images ?
→ Parce qu’elle donne un très fort contraste, environ 100 images suffisent.
91
Complète : En coloration négative, l’image est produite par le ______ et non par la ______.
→ colorant ; molécule directement
92
Dans quelle condition sont conservées les particules en Cryo-ME ?
→ Dans la glace vitrifiée.
93
Quel est le principal inconvénient des images en Cryo-ME ?
→ Elles sont très bruyantes.
94
Combien d’images faut-il typiquement collecter en Cryo-ME ?
Beaucoup → Entre 1 000 et 10 000 (10³ à 10⁴).
95
Complète : En Cryo-ME, la résolution est limitée par l’information perdue à cause des ______ et de la ______.
→ aberrations microscopiques ; longueur d’onde
96
Vrai ou Faux : La coloration négative est préférable pour obtenir une résolution atomique.
→ Faux. Elle limite la résolution, contrairement à la Cryo-ME.
97
Dans quel contexte utilise-t-on préférablement la coloration négative ?
→ Pour un criblage initial rapide grâce au fort contraste.
98
Sur quoi est appliquée la solution de macromolécules biologiques ?
→ Sur une grille de microscopie électronique (ME).
99
Quel volume de solution est typiquement utilisé pour l’APU ?
→ Quelques microlitres (quelques µL).
100
Complète : Les grilles de coloration négative utilisent un support de ______.
→ carbone continu
101
Vrai ou Faux : La cryo-ME utilise aussi un support de carbone continu.
→ Faux. Elle utilise du carbone perforé.
102
Quel est l’intérêt d’un carbone perforé en cryo-ME ?
→ Permet de visualiser uniquement la glace sans interférence du support.
103
Quelle est la première étape de la préparation en microscopie électronique par coloration négative ?
→ Appliquer l’échantillon sur la grille.
104
Que fait-on après avoir appliqué l’échantillon à la grille ? (ME par coloration négative)
→ On applique le colorant.
105
Complète : La coloration négative marche bien avec les ______, moins avec les ______.
→ protéines ; acides nucléiques
106
Pourquoi la coloration négative est-elle souvent utilisée en début de protocole ?
→ Elle est utile pour le criblage initial.
107
Vrai ou Faux : Tous les types de biomolécules réagissent bien avec la coloration négative.
→ Faux. Elle marche mieux avec les protéines qu’avec les acides nucléiques.
108
Quels types de colorants sont utilisés en coloration négative ?
→ Acétate d’uranium,
→ Formate d’uranium,
→ Tungstates,
→ Molybdates.
109
Quel est l'effet d'une coloration trop épaisse ?
→ Elle peut masquer les détails de l’échantillon ou interférer avec le microscope.
110
Pourquoi la glace cristalline ne convient-elle pas pour la cryo-microscopie électronique ?
→ Parce qu’elle est opaque aux électrons. Seule la glace vitrifiée est transparente.
111
Comment peut-on vitrifier l’eau pour la cryo-ME ?
→ En utilisant des cryogènes à très haut taux de refroidissement, comme l’éthane liquide.
112
Parmi les cryogènes listés (azote, propane, éthane), lequel est le plus efficace pour vitrifier l’eau ?
→ L’éthane, grâce à son taux de refroidissement élevé (360 K/s).
113
Vrai ou Faux : L’azote liquide est suffisant pour vitrifier l’eau dans le contexte de cryo-ME.
→ Faux. Son taux de refroidissement est trop faible (130 K/s).
114
Quel principe exploite l’Analyse de Particules Uniques (APU) ?
→ Le fait que les molécules en solution adoptent des orientations plus ou moins aléatoires.
115
Complète : La coloration négative permet de visualiser des protéines à ______, mais avec une résolution ______.
→ haut contraste ; maximale limitée
116
Pourquoi la coloration négative est-elle souvent utilisée en début d’analyse ? (RAPPEL)
→ Pour le criblage initial rapide grâce à son contraste élevé.
117
Quel est l’objectif principal de la cryo-ME ?
→ Obtenir des structures à haute résolution. Mais demande beaucoup plus de données.
118
Quels cryogènes sont mentionnés pour vitrifier la glace en cryo-ME ?
→ Éthane ou éthane-propane. Important pour la cryo-ME.
119
Quel est l’effet des électrons sur les molécules observées en microscopie électronique ?
→ Ils causent du dommage aux molécules. (Dommages + Déplacement/mouvement)
120
Pourquoi la dose d’électrons doit-elle être ajustée avec précaution ?
→ Pour éviter un dommage inutile aux échantillons tout en maintenant un contraste suffisant.
121
Quelle avancée technologique a permis de capturer des films en microscopie électronique ?
→ Le développement des détecteurs directs d’électrons (DED).
122
Pourquoi utilise-t-on des films (séries d’images) en cryo-ME ?
Il est possible de corriger le flou induit par le mouvement et d'augmenter la résolution.
123
Qu’est-ce que la CTF fait aux images acquises en cryo-ME ?
→ Elle les dégrade.
124
Comment peut-on estimer la CTF à partir d’une image ?
→ En utilisant la Transformée de Fourier (FFT).
125
Quel est le lien entre la qualité de l’image et l’estimation de la CTF ?
→ Plus l’image est de haute qualité, meilleure sera l’estimation de la CTF.
126
Pourquoi est-il crucial d’estimer et de corriger la CTF ?
→ Pré-processing
→ Pour récupérer l’information vraie contenue dans l’image et améliorer la résolution de la reconstruction.
127
Quelle étape suit la correction des images en cryo-ME ?
→ La sélection des particules.
128
Complète : Il est nécessaire de trouver l’__________ de nos particules pour continuer l’analyse.
→ emplacement
129
Quel est le critère utilisé pour repérer les particules dans les images ?
→ Les régions de contraste qui correspondent à la molécule d’intérêt.
130
Quelles sont les différentes approches de sélection des particules ? (3)
→ Recherche de « blob » Une forme floue ou zone de contraste qui pourrait correspondre à une particule.
→ Reconnaissance de patron spécifique,
→ Apprentissage par IA.
131
Quel est le but de la classification 2D en cryo-ME ?
→ Aligner et classifier les particules pour révéler les différentes orientations de la particule.
132
Vrai ou Faux : La classification 2D est une étape optionnelle dans l’analyse cryo-EM.
→ Faux. C’est une étape essentielle pour sélectionner les bonnes particules.
133
À partir de quel type de données peut-on reconstruire un volume 3D en cryo-ME ?
→ À partir de projections 2D de la particule (classes 2D).
134
Complète : En utilisant différentes ______ 2D de la particule, il est possible de reconstruire un ______ 3D.
→ projections ; volume
135
Quelle est la difficulté principale dans la reconstruction 3D ?
→ Trouver l’orientation relative entre deux projections.
136
Dans quel espace mathématique la reconstruction d'un volume 3D se fait-elle souvent ?
→ Dans l’espace de Fourier.
137
Pourquoi utilise-t-on l’espace de Fourier pour la reconstruction 3D ?
→ Car il permet de relier plus facilement les différentes projections et d’en déduire leur orientation relative.
138
Quelle est la méthode standard actuelle pour initier une reconstruction 3D en cryo-EM ?
→ La reconstruction Ab initio.
139
Quel type de volume est supposé au départ de la reconstruction Ab initio ?
→ Un blob gaussien.
140
Qu'est-ce qu'on présume dans la reconstruction Ab initio?
- Un blob gaussien comme volume
- Des orientations aléatoires qui sont ensuite raffinées.
141
Quel est le risque si on ne filtre pas correctement les hautes fréquences ? Reconstitution Ab initio
→ L’overfitting : on reconstruit du bruit au lieu de la véritable structure.
142
La reconstruction Ab initio est-elle complexe à réaliser sur le plan informatique ?
→ Non, elle est computationnellement intensive mais simple.
143
Pourquoi est-il essentiel de filtrer les hautes fréquences durant un reconstruction Ab initio ?
→ Pour éviter d’amplifier ou de corréler le bruit (éviter l’overfitting).
144
Quel est le but du processus de reconstruction 3D ?
→ Comparer les projections 2D expérimentales à celles calculées à partir d’un volume 3D initial.
145
À partir de quoi sont générées les projections 2D calculées ? Reconstruction 3D
→ D’un volume 3D initial (souvent un blob).
146
Pourquoi est-il essentiel de filtrer les hautes fréquences lors de la reconstruction 3D ?
→ Pour éviter d’amplifier ou de corréler du bruit (overfitting).
147
Vrai ou Faux : L’étape de reconstruction 3D demande peu de ressources informatiques.
→ Faux. C’est une étape très demandante computationnellement.
→ Parce que chaque image de particule (souvent >100 000) doit être raffinée.
148
Comment la résolution est-elle mesurée dans une reconstruction 3D ?
→ Via la corrélation de sphère de Fourier (FSC).
149
Qu’est-ce que mesure la FSC ?
→ La corrélation entre une même sphère dans l’espace de Fourier pour deux reconstructions indépendantes.
150
Que faut-il faire pour pouvoir mesurer la FSC ?
→ Générer deux reconstructions 3D indépendantes en divisant le jeu de données en deux.
151
À quelle étape la FSC est-elle évaluée ?
→ À chaque sphère de Fourier.
152
Complète : Lorsque la corrélation passe sous un certain seuil (______), on considère que c’est la résolution de la structure.
→ 0.5 ou 0.143
153
À partir de quelle résolution est-il généralement possible de tracer la chaîne peptidique ?
→ À partir de 4 Å de résolution.
154
Complète la phrase : Une reconstruction de résolution α en cryo-ME offre la même qualité de densité que...
→ ...une structure à une résolution α - 1 Å en cristallographie.
155
Pourquoi la qualité de densité est-elle meilleure en cristallographie pour une même valeur de résolution ?
→ Parce que le calcul des phases est parfait en cristallographie.
156
Vrai ou Faux : Les échantillons utilisés pour la cryo-ME sont généralement 100% purs.
→ Faux. Ils sont rarement 100% purs et homogènes.
157
Quelle est la cause de l'hétérogénéité dans les échantillons de cryo-ME ?
→ La présence de différentes composantes comme une protéine cible et un contaminant.
158
Comment peut-on gérer l'hétérogénéité des complexes ?
→ Elle peut être gérée par des approches bioinformatiques (in silico).
159
Pourquoi une approche in silico est-elle utile dans le contexte de la cryo-ME ?
→ Car elle permet d’obtenir une structure plus rapidement sans avoir à purifier chaque composante en laboratoire.
160
Quelle méthode peut être utilisée pour déterminer l'hétérogénéité d’un échantillon en cryo-ME ?
→ Des approches statistiques.
161
Vrai ou Faux : La classification 3D permet uniquement de reconstruire un seul modèle à partir des données cryo-EM.
→ Faux. Elle permet de classifier les différentes composantes (hétérogénéité) et donc de reconstruire plusieurs modèles correspondant à ces composantes.
162
Pourquoi faut-il ajuster la dose d’électrons ?
→ Pour limiter le dommage à l’échantillon.
163
Quelle étape est nécessaire pour contrer les déplacements des particules pendant l’imagerie ?
→ Corriger le mouvement des particules.
164
Quelles sont les deux actions à réaliser concernant la CTF ?
→ Estimer et corriger la CTF.
165
Quelle est l’étape à réaliser après la sélection des particules ?
→ Classer les particules.
166
Après la classification 2D et la sélection des particules, que fait-on ?
→ Reconstruire un modèle 3D.
167
Vrai ou Faux : La gestion des hétérogénéités se fait uniquement au début de l’analyse.
→ Faux. Elle est gérée à la fin via la classification 3D.
168
La tomographie en microscopie électronique est similaire à quelle autre technique d'imagerie ?
→ À la tomodensitométrie (CT-scan).
169
Vrai ou Faux : Une seule image est suffisante pour créer un volume 3D en tomographie.
→ Faux. Il faut plusieurs images du même objet sous différents angles.
170
Pourquoi la résolution est-elle affectée en tomographie ?
→ Car il est impossible de prendre des images sous tous les angles, ce qui crée une limite du cône manquant.
171
Que faut-il faire lorsque les échantillons sont plus épais ?
→ Il faut utiliser un plus haut voltage.
172
Quel est l’effet du cône manquant en tomographie ?
→ Il affecte la résolution.
173
Quel est le rôle du Cryo-FIB milling ?
→ Permettre la préparation de lamelles vitrifiées fines dans des cellules cibles pour une analyse en tomographie 3D in situ.
174
Vrai ou Faux : Le FIB-milling est utilisé uniquement pour observer des protéines isolées.
→ Faux. Il est utilisé pour observer des structures cellulaires en contexte natif.
175
Quel type d’échantillons est généralement observé avec la cryo-tomographie ?
→ Des cellules, organelles et virus.
176
Quel type d’échantillons est utilisé pour l’analyse de particules uniques ?
→ Des molécules purifiées.
