chp2 Επικύρωση

Question 1

who’s in charge of Επικύρωση

Answer 1

International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use (ICH)

Question 2

what are the general steps followed when determining the quality of the product

Answer 2

1. Γενική εφαρμογή ενός φυσικοχημικού φαινομένου using equipment such as Φασματοφωτομετρία, Χρωματογραφία, Ποτενσιομετρία
2. Χρησιμοποίηση μιας αναλυτικής τεχνικής για την επίλυση ενός αναλυτικού προβλήματος —> ποιοτικός ή/και ποσοτικός προσδιορισμός μιας συγκεκριμένης ουσίας ή ομάδας ουσιών σε συγκεκριμένο δείγμα

Question 3

define Πρωτόκολλο (protocol)

Answer 3

= Λεπτομερής περιγραφή της πορείας ενός συγκεκριμένου προσδιορισμού που περιλαμβάνει ποσότητες αντιδραστηρίων και δείγματος, χρόνους εκτελέσεως διαφόρων σταδίων, πειραματικές συνθήκες…

Question 4

What are the main steps to do Προσδιορισμός (determination)

Answer 4

1. Ποιοτικός (ταυτοποίηση)
2. Ποσοτικός (assay)
3. Έλεγχος ορίου

Question 5

what’s the difference between saying we determined vs measured

Answer 5

Μέτρηση (measurement) = Εισαγωγή του διαλύματος εργασίας του δείγματος στο αναλυτικό σύστημα και ανάγνωση / λήψη της προκαλούμενης τιμής του αναλυτικού σήματος

BUT it doesn’t include το στάδιο προετοιμασίας του δείγματος like determining implies

Question 6

what are Επαναλαμβανόμενες μετρήσεις ή προσδιορισμοί called in English

Answer 6

replicates

Question 7

What are the 2 things done to find out how to improve our analytical methods

Answer 7

1. Βελτιστοποίηση (optimization) μεθόδου

= Εύρεση εκείνων των πειραματικών συνθηκών που θα επιτρέψουν στην αναλυτική μέθοδο να έχει τη βέλτιστη απόκριση (eg best temp)

2. Βέλτιστη απόκριση (optimum response)

= 1+ χαρακτηριστικά ποιότητας, τα οποία συνδυάζονται στη λεγόμενη συνάρτηση απόκρισης (response function, RF) με τον αντίστοιχο συντελεστή βαρύτητας —> quality of the equipment

Question 8

List the steps to solving an analytical problem (SOS)

Answer 8

1. Επιλογή Μεθόδου
2. Βελτιστοποίηση Μεθόδου
3. Μέτρηση Αναλυτικής Παραμέτρου (Σήματος) on a prototype to check the quality of our equipment
4. Προετοιμασία Δείγματος
5. Μέτρηση Αναλυτικής Παραμέτρου (Σήματος) on our compound
6. Συλλογή Δεδομένων
7. Μετατροπή Σήματος σε Χημική Πληροφορία (από καμπύλη αναφοράς)
   —> συγκέντρωση ή περιεκτικότητα ουσίας, ταυτοποίηση
8. Μετατροπή Χημικής Πληροφορίας σε Πληροφορία Χρήστη
   —> eg whether the solution meets the limits of the pharmacopeia

Question 9

Define Επικύρωση SOS

Answer 9

= Αξιολόγηση των χαρακτηριστικών ποιότητας της μεθόδου μέσω πειραματικής τεκμηρίωσης και η εξέταση της ανταπόκρισής της προς προδιαγραφές (specifications) για να αποδειχθεί ότι είναι κατάλληλη για το σκοπό για τον οποίο προορίζεται (fitness for purpose)

= επιβεβαίωση, μέσω εξέτασης και παροχής αντικειμενικών αποδείξεων, ότι ικανοποιούνται οι ιδιαίτερες απαιτήσεις για συγκεκριμένη, σκοπούμενη χρήση

Question 10

define Επαλήθευση SOS

Answer 10

= Επιβεβαίωση μέσω πειραματικής τεκμηρίωσης ότι μια επικυρωμένη μέθοδος με συγκεκριμένα χαρακτηριστικά ποιότητας και χαρακτηριζόμενη ως κατάλληλη για το σκοπό για τον οποίο αναπτύχθηκε, εφαρμοζόμενη στο εργαστήριο εξακολουθεί να ανταποκρίνεται προς τις απαιτούμενες προδιαγραφές

Question 11

how does the lab decide which method to use? which version of the method should be followed?

Answer 11

Όταν ο «πελάτης» δεν καθορίζει τη μέθοδο, το Εργαστήριο επιλέγει ενδεδειγμένες μεθόδους:

• Δημοσιευμένες σε διεθνή, περιφερειακά, τοπικά ή εθνικά πρότυπα
• Δημοσιευμένες από αναγνωρισμένους τεχνικούς οργανισμούς.
• Δημοσιευμένες σε επιστημονικά κείμενα ή περιοδικά
• Καθοριζόμενες από τον κατασκευαστή του εξοπλισμού
• Αναπτυγμένες ή υιοθετημένες από το Εργαστήριο (Εσωτερικές, In House) (ΕΠΙΚΥΡΩΜΕΝΕΣ)

—> πρέπει να εξασφαλίζει ότι χρησιμοποιεί την τελευταία έγκυρη έκδοση του προτύπου, εκτός εάν αυτό δεν ενδείκνυται ή είναι αδύνατο

Question 12

Explain different ways the lab can validate the method used

Answer 12

• Χρήση προτύπων αναφοράς ή υλικών αναφοράς.
• Σύγκριση αποτελεσμάτων με άλλες πρότυπες μεθόδους αναφοράς.
• Διεργαστηριακές συγκρίσεις

Question 13

slide 17-18?????

Question 14

Name the 3 types of errors

Answer 14

1. Χονδρικό σφάλμα (gross)

• Αναγνωρίζονται εύκολα
• π.χ. Λάθος αραιώσεις, βλάβη οργάνου ή χρήση τους με λάθος τρόπο
• Τα αποτελέσματα απορρίπτονται και η ανάλυση επαναλαμβάνεται από την αρχή

2. Συστηματικό (systematic)

• Πιο δυσδιάκριτα
• έχει μεγάλη σχέση ο αναλυτής

3. Τυχαίο (random)

Question 15

List different statistical equations used to determine the reliability of the results that we got from the experiment

Answer 15

1. μέση τιμή
   —> it gives us the «Αληθινή ή πραγματική” τιμή (μ) which is the mean των πειραματικών μετρήσεων
2. Median
   —> να καταταγούν οι τιμές κατά αυξανόμενο μέγεθος
   —> Σχετίζονται με τη θέση του κέντρου κατανομή

Question 16

Which stats is used to predict the accuracy of a method

Answer 16

Απόλυτο σφάλμα (Ε)
—> used to calculate the accuracy of the results, which is how close our values are to the true value (μ)
—> Κριτήριο αξιοπιστίας μιας μεθόδου ( the closer the value is to zero, the more accurate it is bc it means no errors)

= mean - μ

Question 17

which stats is used to predict the precision of a method

Answer 17

1. Διασπορά ή μεταβλητότητα ή διακύμανση (variance)
2. Τυπική απόκλιση μέσης τιμής
3. Εύρος (R) ή δειγματική διακύμανση (range)
   = R = xμεγ.- xελ.

—> slide 25 for equations

Question 18

explain Τυχαία σφάλματα

Answer 18

• Οφείλονται σε μη ελεγχόμενες και μη μόνιμες αιτίες
• Προέρχονται από μη μόνιμες αιτίες (παρασιτικές διαταραχές, που παρενοχλούν τη μέτρηση)
• είναι δικατευθυνόμενα (Θετικά και αρνητικά) —> επιδρούν ακανόνιστα στο αποτέλεσμα
• εξουδετερώνονται με αύξηση ου αριθμού των μετρήσεων

Question 19

explain Καθορισμένα ή συστηματικά σφάλματα

Answer 19

• Αποδίδονται σε συγκεκριμένες αιτίες
• Μονοκατευθυνόμενα —> επιδρούν στο αποτέλεσμα μιάς μετρήσεως πάντοτε κατά την ίδια φορά (μόνο θετικά ή μόνο αρνητικά)
• παραμένουν σταθερά για μία σειρά μετρήσεων, που διεξάγονται κάτω από τις ίδιες συνθήκες.

Question 20

what are the 2 subtypes of systematic errors

Answer 20

1. Σφάλματα Οργάνου:
   —> Χρήση οργάνων και σκευών μη ορθά βαθμονομημένων
2. Προσωπικά σφάλματα:
   —> Αδυναμίες του αναλυτή, π.χ. αχρωματοψία
   —> Πηγή συστηματικού σφάλματος είναι επίσης η προκατάληψη (bias) του αναλυτή κατά την ανάγνωση διαφόρων μεγεθών

Question 21

how do we detect systematic errors

Answer 21

1. Με ανάλυση “πρότυπων δειγμάτων» που διατίθενται από τα Εθνικά Γραφεία Προτύπων διαφόρων χωρών
2. use of εμπορικά “γνωστά δείγματα” (controls)
   —> έχουν παρόμοια σύσταση με τα δείγματα για τα οποία χρησιμοποιείται η μέθοδο
   —> έχουν αναλυθεί με τις “επίσημες μεθόδους” (official methods) so we can rely on their values
3. Ανάλυση “ενισχυμένων δειγμάτων” (spiked samples):
   —> δειγμάτων, που περιέχουν ή όχι την προσδιοριζόμενη ουσία (προσθήκη γνωστής ποσότητας της ουσίας)
   —> known quantity of the substance is added (spiked) to assess how accurately the method can detect and quantify it. This helps identify any proportional errors in the measurements

Question 22

after we detect the errors, how do we know if they’re significant

Answer 22

• Αν χ-μ (σφάλμα) είναι πολύ μεγαλύτερη από τις παραμέτρους επαναληπτικότητας (d, s ή R) —> συμπεραίνεται ότι το σφάλμα είναι κυρίως καθορισμένο
• Αν χ-μ (σφάλμα) ~με τις παραμέτρους επαναληπτικότητας
  —> Στατιστικές δοκιμασίες done to assess further
  —> due to random errors

Question 23

Other than precision and accuracy of methods, 2 other characteristics need to be checked: specificity and selectivity. Explain and define both

Answer 23

Εκφράζει την παρεμπόδιση στον προσδιορισμό ενός συστατικού σε ένα δείγμα από τα άλλα συστατικά του μείγματο

1. ειδική (specific):

= εάν η συγκέντρωσή του μπορεί να προσδιορισθεί με ακρίβεια χωρίς επίδραση από τα άλλα συστατικά του δείγματος. Τα άλλα συστατικά δεν παράγουν αναλυτικό σήμα

—> only measures one thing

2. εκλεκτική (selective):

= εάν παρέχει ορθά αναλυτικά αποτελέσματα για τα διάφορα συστατικά του μείγματος χωρίς αλληλεπίδραση μεταξύ τους. Μια εκλεκτική μέθοδος συνίσταται από μια σειρά ειδικών μετρήσεων
= ένα μέτρο του πόσο ικανή είναι για τη μέτρηση μόνο του αναλύτη παρουσία άλλων ενώσεων που περιέχονται στο δείγμα

—> can measure multiple without the results clashing

—> A METHOD THAT IS SELECTIVE IS ALSO SPECIFIC, BUT A METHOD THAT IS SPECIFIC ISN’T ALWAYS SELECTIVE

Question 24

What tests are done to check selectivity? what happens if it shows low selectivity?

Answer 24

Απαιτείται στους ελέγχους (δοκιμασίες):

• Ταυτοποίησης
• Προσδιορισμών προσμίξεων
• Ποσοτικών προσδιορισμών

—> απόδειξη selectivity εξαρτάται από το σκοπό της μεθόδου.
—> Εάν δεν αποδειχθεί συνιστάται συνδυασμός 2+ αναλυτικών μεθόδων

Question 25

what about the linearity of a method? how is that calculated?

Answer 25

= Εξετάζεται σε όλο το εύρος της περιοχής συγκεντρώσεων (range) της αναλυτικής μεθόδου

1. Απευθείας στην καθαρή προσδιοριζόμενη ουσία
   —> αραιώσεις ενός προτύπου διαλύματος παρακαταθήκης
2. Ξεχωριστές ζυγίσεις συνθετικού μείγματος των συστατικών ενός προϊόντος, και εφαρμογή της ελεγχόμενης αναλυτικής μεθόδου
   —> εξετάζεται κατά τον έλεγχο της περιοχής συγκεντρώσεων

Question 26

show the equation + graph of linearity

Answer 26

y = ax + b

y axis —> mean
x axis —> conc
b —> is present because it shows the errors

We calculate:

• η εξίσωση παλινδρόμησης (regression equation)
• ο συντελεστής προσδιορισμού (coefficient of determination) r2
  —> has to be close to 1, but realistically 0.98 is okay
  —> shows the relationship between factors
• ο συντελεστής συσχέτισης (r)

—> Εάν η καμπύλη δεν είναι γραμμική περιορίζεται η περιοχή έως ότου η απόκριση είναι γραμμική με τη συγκέντρωση. (Τουλάχιστον 4 συγκεντρώσεις πρέπει να χρησιμοποιηθούν για την καμπύλη των προτύπων)

Question 27

what is System suitability

Answer 27

= καταλληλότητα του συστήματος σχετίζεται με την απόδοση του εξοπλισμού

(1) Ικανότητα σχεδιασμού (Design Qualification, DQ)
(2) Ικανότητα εγκατάστασης (Installation Qualification (IQ)
(3) Ικανότητα λειτουργίας (Operation Qualification, OQ)
(4) Ικανότητα απόδοσης (Performance Qualification, PQ)

Question 28

define Αναλυτικό λευκό (blank)

Answer 28

= ένα δείγμα που αποτελείται από όλα τα αντιδραστήρια ή διαλύτες που χρησιμοποιούνται σε μια ανάλυση χωρίς την παρουσία κανενός αναλύτη.

Question 29

define + explain Limit of detection, LOD

Answer 29

= Είναι η μικρότερη ποσότητα αναλύτη που μπορεί να ανιχνευτεί με μια συγκεκριμένη μέθοδος.

χ-χΒ = 3.SΒ

—> όπου χ είναι το σήμα από το δείγμα
—> χΒ είναι το σήμα από λευκό
—> SB είναι η SD της ένδειξης για το αναλυτικό λευκό δείγμα

Question 30

define Limit of quantification, LOQ

Answer 30

= Είναι η μικρότερη ποσότητα του αναλύτη που μπορεί να ποσοτικοποιηθεί αξιόπιστα, RSD<±20%.

χ-χΒ = 10SΒ

—> Ο αναλύτης πρέπει να δίνει κορυφή > δέκα φορές την τυπική απόκλιση της χρωματογραφικής γραμμής

Question 31

If our value was = 6, LOD was 5 and LOQ was 15, do we use it?

Answer 31

No because it has to be bigger than LOQ to be able to quantify it, LOD is just barely enough to see it

Question 32

define Ευαισθησία (Sensitivity)

Answer 32

= Δείχνει πόσο καλά αυτή η μέθοδος ανταποκρίνεται σε μια μικρή αλλαγή
της συγκέντρωσης του αναλύτη

—> η κλίση μιας καμπύλης απόκρισης

Question 33

what’s the difference between Ευαισθησία & όριο ανίχνευσης

Answer 33

Το όριο ανίχνευσης είναι αποτέλεσμα συνδυασμού της περιοχής και της ευαισθησίας