Chapter 11: la génétique microbienne Flashcards

1
Q

Génome

A

ensemble de matérielle génétique

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Q

L’ADN et ses séquences de paires de bases

A
  • Pendant longtemps on a sous-estimé cette molécule en pensant qu’elle n’était pas capable de contribuer à des processus complexes
  • travaux de Watson et Crick (s’inspirant des résultats de travaux de Franklin et Wilkins) avec la double hélice avec deux brins maintenu par des ponts H (A-T, GC). Prix Nobel 1962.
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3
Q

Les expériences de transformation de Griffith*

A

picture 11.1

  • Streptococcus pneumoniae a 2 souches
    • souche S (capsulé, lisse) - pathogènes
    • souche R (rugeuse, non-capsulé) - non-pathogènes
      a) injecte souche capsulé-souris meurt
      b) injecte souche non-capsulé-souris vie
      c) injecte souche S tué par chaleur-souris vie
      d) injecte souche R vivant et S mort- sourit meurt
    • isolement de souche S vivant du souris
    • utilise le terme transformation
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4
Q

Expériences de Avery, Mac Leod et Mc Carthy (sur le principe transformant)*

A

picture 11.2

  • déterminentquel constituant de S. pneumoniae étaient responsables pour la transformation
  • détruisent certains constituants de la scuse S et mélange avec R pour voir si la transformation a lieu
  • transformation n’avait pas lieu lorsque l’ADN a été hydrolyse.
    • ADN porte l’info requise pour la transformation
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5
Q

Expérience de Hersey et Chase*

A

picture 11.3

  • indique que l’ADN était le matériel génétique d’un virus
  • -ils ont pris un virus à ADN (chanceusement) T2
  • ils ont marqué les protéines de la capside avec S(35) (radioactive)
  • marqué ADN avec P(32)
  • ils ont mélangé les virus avec les bactéries, ensuite ils les ont séparés
    • ils ont remarqué que les protéines du capside (S35) était encore avec le virus(en dehors de la cellule), mais l’ADN était avec le bactérie (dans la cellule)
    • l’ADN est la molécule porteuse de l’info génétique de la virus T22
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6
Q

Dogme central

A
  • flux de l ‘information génétique

- AND (réplication) — ARN (transcription) —- protéines (traduction)

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7
Q

Résumé du flux de l ‘information génétique*

A

picture 11.4

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8
Q

Réplication

A
  • la synthèse de l’ADN dupliqué

- processus est catalysé par ADN polymérase

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9
Q

Transcription

A
  • synthèse d’une copie d’ARN à partir de l’ADN
  • donne 3 types d’ARN différents
    • selon le gène transcrit
    • ARNm ARNt ARNr
  • catalysé par ARN polymérise
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10
Q

Traduction

A
  • l’info génétique sous forme d’un séquence de base d’ARN dans un ARNm est décodé et régit la synthèse d’une polypeptide
  • requiert l’ARNm, l’ARNt et l’ARNr
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11
Q

La composition des acides nucléiques

A

AN: polymères de nucléotides
Nucléoside: Base sucre
Nucléotide: Base, sucre P.

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12
Q

La structure de l’ADN*

modèle non hélicoïdale

A

picture 11.5
-Base: purique GA pyrimiques: CT (U pour ARN)
-Sucre: Carbone 3 et 5 estérifie le P
-consntitué de désoxyribonucléosides puriques et pyrimidiques reliés par liaisons de phosphodiester
A-T, G-C
-Liaison hydrogène maintient les deux brins.
-Les 2 brins sont complémentaires (appariement de bases corresondantes)
-Brins antiparalles: 5’ vers 3’
-Sens 5’ (Hydroxyl lié à un P) vers 3’ (Hydroxyl libre)
-2 brins complémentaires

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13
Q

La structure de l’ADN*

modèle hélicoïdale

A

picture 11.6

  • Minor Groove: petit sillon
  • Major Grove: grand sillon
  • Chaine sucre-phosphate (à l’extérieur et paires de base à l’intérieur sur le modèle compact.
  • Sens 5’ (Hydroxyl lié à un P) vers 3’ (Hydroxyl libre)
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14
Q

Formes de l’ADN*

A
  • cercle fermé
    • Retrouver chez toutes les archées et plusieurs bact
    • Chez bactéries ADN n’est pas enroulé autour d’histones
    • Chez eucaryotes et archées histones sont présents
  • super hélice
    • les brins d’ADN circulaires se tordent pour former un super hélice
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15
Q

Organisation interne et fonction du nucléosome

A
  • combinaisons d’ADN et histones

- pour enroulé l’ADN

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16
Q

La réplication de l’ADN

A
  • Durant la réplication les 2 brins de double hélice sont séparés
    • chacun sert comme matrice pour la synthèse d’un brin complémentaire
  • chacune des deux molécules filles d’ADN consiste en un brin nouveau et un ancien brin
    • la réplication d’ADN est semi-conservatrice
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17
Q

La réplication semi-conservative*

A

picture 11.7

Conserve un brin et on fabrique un autre

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18
Q

La réplication bidirectionnelle du chromosome de E. coli*

A

picture 11.8

  • la réplication commence à un endroit seule (l’origine)
  • la synthèse a lieu à la fourche de réplication
    • où l’hélice d’ADN en déroulée et où les brins individualisées sont répliqués
  • 2 fourches de réplication se déplacent à partir de l’origine jusqu’à ce qu’elles aient copié tout le réplicon
  • enfin, comme le chromosome bactérien est un répliquons unique, les fourches se rencontrent de l’autre côté et 2 chromosomes séparés sont libérés
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19
Q

La réplication en cercle roulant*

A

picture 11.9

  • Nouveuau brin agrandi dans le sens 5’ à 3’
  • se fait durant la conjugaison de E.coli, la réplication des plasmides et des virus
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20
Q

La réplication de l’ADN eucaryote*

A

picture 11.10

L’ADN eucaryote comporte de nombreux points de réplication situés tous les 10 à 10 nm le long de l’ADN

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21
Q

Machinerie de la réplication

A
  • Lorsqu’on veut répliquer l’ADN on a besoin d’un enzyme; ADN polymérase (catalyse la synthèse d’ADN 5’-3’)
  • nécessite une matrice de 3’à5’
  • nécessite une amorce qui fournit un groupe 3’-hydroxyle libre
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22
Q

L’holoenzynme de l’ADN polymérase III*

A
  • complexe de 10 protéines
  • composé de enzymes noyaux
    • connectés par tau τ des et de plusieurs autres sous-unités.
    • Les enzymes noyaux sont responsables
      • de la catalyse de la synthèse de l’ADN.
      • de l’autocorrection
  • La pince coulissante beta β attache l’enzyme à l’ADN
  • Le complexe gamma  permet à la pince de se placer sur l’ADN
  • Les deux brins de l’ADN sont liés par une seule holoenznzyme d’ADN polymérase III.
  • Le DNAB hélicase: sépare les brins d’ADN enroulés
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23
Q

La réplication de l’ADN bactérien *

A
picture 11.11
1) hélicase DNA B
2)SSB (single stranded binding)
3) les topoisomérases
Une fois la matrice préparée, l’amorce dont l’ADN polymérase III a besoin  doit être synthétisé
4) primase
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24
Q

Hélicase DNA B

A

responsables de la séparation (déroulement) des doubles brins d’ADN

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25
Q

SSB

A

protéines se liant à l’ADN simple brin et maintien les 2 brins éloignés.

26
Q

Les topoisomérases

A
  • soulagent la tension induite par le déroulement rapide de la double hélice.
  • Changent la structure de l’ADN en brisant transitoirement un brin ou 2, modifiant la forme mais conservant la séquence de nucléotide.
  • L’ADN gyrase est une topoisomérase importante chez E. coli.
27
Q

la primase

A
  • une ARN polymérase spéciale
  • intervient en synthétisant un court brin d’ARN (10 nucléotides) qui servira d’amorce.
  • La primase peut synthétiser un ARN sans ajouter de nucléotide à un 3’OH existant.
  • La primase et d’autres protéines constituent le primosome
  • L’holoenzyme de l’ADN polymérase III synthétise une copie complémentaire de l’ADN qui débute sur une courte amorce d’ARN synthétisé par une primase
28
Q

Le brin avancé

A
  • répliqué de manière continue de

- requiert un seule amorce d’ARN

29
Q

Le brin retardé

A
  • ne peut avancer car il n’y a pas de bout OH 3’ libre où accrocher le nucléotide
  • synthétisé de manière discontinue dans le sens 5’ vers 3’ en une série de fragments, les fragments d’Okazaki.
  • la primase ajoute de nombreuse amorces d’ARN le long du brin retardé
  • L’ADN polymérase III allonge ces amorces avec de l’ADN formant de courtes fragments
  • ces fragments sont rattachés en un brin complet
  • requiert plusieurs amorces
30
Q

L’achèvement de la synthèse du brin retardé*

A

picture 11.12

  • ADN polymérase 1 enlève les amorces d’ARN
  • ligase relie les fragments Okazakis
  • Chez E. coli, la réplication s’arrête quand le réplisome atteint un site de terminaison (ter)
  • Chez d’autres bactéries, la réplication s’arrête au hasard quand les fourches de réplication se rencontrent.
  • Les 2 brins fils doivent se séparer . Des fois ils sont entrelacés (caténanes). Heureusement la toposiomérase peut briser le temporairement les molécules d’ADN nouvellement formées qui seront donc séparés
31
Q

La réplication des chromosomes linéaires

A
  • Chromosome linéaire. L’ADN polymérase a besoin d’une amorce qui fournisse le 3’ OH.
  • Une télomérase résoud le problème de la réplication des extrémités.
32
Q

La réplication des télomères des chromosomes eucaryotes par la télomérase

A

La télomérase est responsable de la répétition des extrémités des chromosomes eucaryotes et résous le problème de la réplication des extrémités.
On connaît peu de choses sur certaines bactéries qui ont des chromosomes linétaires.
Intervention de la primase, de l’ADN polymérase et de la ligase pour fabriquer le brin complémentaire.

33
Q

La structure des gènes

A
  • Comment l’information contenu dans le gène est utilisée?
  • Comment est-elle transmise?
  • Historiquement: on disait toujours: un gène code pour une protéine.
  • Un gène donne un enzyme.
  • On sait maintenant que c’est plus complexe que celà.
  • Un gène donne un polypeptide (cistron)
  • Un codon qui code pour une seule polypeptide est appelé cistron.
  • Cependant , il y a des gènes qui codent pour des ARN
  • Un gène peut coder pour plusieurs protéines.
34
Q

Un codon

A

code pour un AA

-séquence de groupes de 3 nucléotides

35
Q

Les cadres de lectures et leur importance

A

-façon dont les nucléotides sont groupés en codon, commence à lire un nucléotide plus loin et on a un séquence d’aa complètement différente

36
Q

un gène

A

un séquence polynucléique codant pour un produit fonctionnel (protéine, ARNr ou ARNt)

37
Q

La structure des gènes des eucaryotes est différente de celle des bactéries et des virus

A
  • Ils ont des régions codantes (exons) et des régions non codantes (introns). Les introns devront être éliminés de l’ARNm par épissage avant la synthèse de la protéine. Donc un gène peut coder pour plusieurs polypeptides différents
  • le processus de l’épiage alternatif
  • Exceptions: les gènes des histones n’ont pas d’introns
38
Q

Les gènes qui codent pour des protéines*

A

picture 11.13

  • brin matrice (va être transcrit en ARNm)
  • brin condant (même séquence que lARNm)
  • Promoteur:
  • Séquence de tête (leader)
39
Q

promoteur

A
  • situé au début du gène
    • site important de reconnaissance et de liaison de l’ARN polymérase qui marque le début de la transcription
    • Il n’est ni transcrit ni traduit. Il sert exclusivement à positionner l’ARN polymérase
40
Q

boite de pribnow

A

région du promoteur à -10

-site de fixation de l’ARN polymérase

41
Q

Séquence de tête (leader)

A
  • est transcrit en ARNm, mais pas traduit

- Elle contient une région: la séquence Shine-Dalgarno (sur ARNm) qui est importante pour initier la traduction.

42
Q

Région codante

A
  • suite de codons qui spécifies la séquence en aa d’un protéine
  • commence par TAC donc 5’AUG3’
43
Q

codon de stop

A

-signale le fini de la protéine et arrête la traduction

44
Q

séquence terminateur

A

arrête la transcription, et déloge ARN polymérise du brin ADN matrice

45
Q

séquence de queue (trailer)

A

nécessaire à l’expression correcte de partie codante du gène. Mais l’ARN polymérase ne reconnaît pas le signal stop.

46
Q

des sites régulateurs

A

séquences de gènes reconnues par des protéines et qui contrôlent (activation ou inhibition l’expression de gènes)

47
Q

Les gènes des ARNt et des ARNr

A

Les gènes de l’ARNt et l’ARNr codent souvent pour les précurseurs qui sont ensuite modifiés pour donner plusieurs produits

48
Q

Particularités de l’ARNm: Bactéria et Archae*

A

picture11. 14
- l’ARNm porte l’information codante transcrite à partir de gènes adjacents. Il est alors appelé polygénique ou polycistronique

49
Q

Particularités de l’ARNm: eucarya

A

l’ARNm est généralement monocistronique

Porte l’information pour un seul polypeptide

50
Q

Transcription chez les Bacteria*

A

picture 11.15

  • ARN synthétisé grâce à une ARN polymérase qui ajoute des nucléotides.
  • Direction 5’ à 3’
  • 3 processus séparés
    1) initiation
    2) élongation
    3) terminaison
  • Seule une portion d’ADN est transcrite (différence par rapport à la réplication)
51
Q

Holoenzyme (de l’ARN polymérase)

A
  • enzyme noyau:
  • Facteur sigma: n’a pas d’Activité catalytiques mais aide l’enzyme noyau à reconnaître le point de départ des gènes.
  • Seule l’holoenzyme peut commencer la transcription.
  • Enzyme noyau + facteur sigma= Holoenzyme (de l’ARN polymérase)
  • peut enrouler l’ADN sans hélicases
52
Q

Intervention du promoteur*

A

picture 11.16
2 régions caractéristiques en amont (fig.11.28)
TTGACA ( -35)
TATAAT (boîte de Pribnow) (-10)
-Ces sites ( -35 et – 10) sont semblables dans tous les promoteurs. On dit que ce sont séquences consensus.

53
Q

Initiation de la transcription chez les Bacteria*

A

picture 11.17
-Le site – 35 et – 10 facilite la rupture des liaisons H qui maintiennent l’ADN en double brin..
L-’ADN en double brin déroulé constitue un complexe ouvert.
-Deux tours de déroulement de l’ADN constituent une bulle de transcription qui se déplace avec l’ARN polymérase lorsqu’elle transcrit l’ARN m à partir du brin d’ADN au cours de l’élongation

54
Q

Terminateurs de la transcription bactérienne

A
  • Chez les procaryotes, les nucléotides transcrits en ARN forment un appariement intracaténaire donc une structure en tige boucle- en épingles à cheveux:) qui semble provoquer l’arrêt de la transcription de l’ADN
  • Deux sortes de terminateurs:
    • terminaison intrinsèque ou rhô indépendante
    • terminaison rhô dépendante
55
Q

La transcription chez les eucaryotes: différences par rapport aux bactéries

A

-Différence 1: Il y 3 ARN polymérases (I, II et III)
-(I=ARNr), (II=ARNm), (III = ARNt)
-Différence 2- L’ARN polymérase II a besoin de facteurs de transcriptions supplémentaires pour reconnaitre les promoteurs
-Différence 3: promoteur eucaryotes différents de promoteurs bactériens.
Sont le résultat de la combinaison de plusieurs éléments dont 3 sont à signaler:
Boîte TATA (-30)
Boîte GC
Boîte CAAT (-50 – 100) Fig. 11.34
-Différence 4- Possibilité de modification post transcriptionnelle des grands ARN précurseurs.
-L’ARN nucléaire hétérogène (ARNnh 5000 à 50 000 nucléotides) a une coiffe en 5’ puis une queue en 3’ et on enlève les introns

56
Q

L’épissage des molécules d’ARNm*

A

picture11. 18
- De nombreux gènes eucaryotes sont fragmentés ou interrompus (avec des exons ou séquences exprimés) qui codent pour de l’ARN qui donne de l’ARNm.
- Les exons sont séparés par des séquences intermédaires (introns) qui ne seront pas traduites
- Particule d’épissage enlève partie qui ne va pas être dans l’ARN finale (introns)

57
Q

La transcription chez les Archae

A

Ressemble à la fois à celles des Bacteria et des Eucarya
Une seule ARN polymérase responsable de la transcription ( Bacteria)
Mais ARN polymérase est plus grande et a plus de sous unités ( Polymérase II des Eucarya)
Promoteurs: boîte TATA ( Eucarya)
A besoin de plusieurs facteurs post-transcriptionnels ( Eucarya)
Molecules de ARNm sont habituellement polycistroniques ( Bacteria)

58
Q

Le code génétique

A

1) La découverte du code génétique
2) L’organisation du code
- Codon qui ne donne aucun aa = codon non-sense (codons stop)
- Codon qui donne un aa = codon sense
- Dégnérescence du code – plusieurs codes qui donnent un aa

59
Q

La traduction

A

-L’ARNt et l’activation des acides aminés
-Le ribosome
-L’initiation de la synthèse des protéines
-L’élongation de la chaîne polypeptidique
-La terminaison de la synthèse des protéines et les chaperons moléculaires
-L’épissage des protéines
-Synthèse des polypeptides commence au bout amino et fini au bout carboxy
-un complexe d’ARNm et de plusieurs ribosomes = polyribosome
-

60
Q

ARNt*

A

picture 11.19

  • a un anticodon
  • forme de trèfle
  • bras anticodon
  • bras D
  • bras T
  • bras variable
61
Q

La transcription et la traduction couplée chez les procaryotes

A

picture 11.20

-transcription et traduction se font en même temps

62
Q

Le chaperon et le repliement des protéines

A
  • le repliement se fait dans un structure tridimensionnelle

- savoir la synthèse de l’ADN et ARN