Chapitre 1 Flashcards
Quelles sont les caractéristiques d’une cellule vivantes
2 principales
- Isoler par une membrane plasmique
- Capable de croissance autonome
Quel est le caractère universel des cellules sur la terre?
L’information héréditaire est située dans l’ADN
En bref, donnez le passage de l’ADN à la protéine
ADN - transcription en ARN - traduction en protéine
Quels sont les deux grands groupes de cellules vivantes?
Procaryotes et eucaryotes
Quelles sont les caractéristiques d’une cellule procaryote?
- Dépourvu de noyau
- Possède paroi cellulaire
- Deux sous catégories: bactérie et archéobactérie
Quelles sont les caractéristiques d’une cellule eucaryote?
- Possède un noyau
- Comprend les organsimes uni- et multicellulaire
Pourquoi est-ce que les virus sont uniques?
Ils occupent une position unique entre le vivant et le non-vivant. Ils sont fait de la même matière que les cellules, mais sont incapables de vivre sans un hôte pour se reproduire.
Vrai ou faux
Les virus ont évolué parallèlement aux cellules
Vrai
Vrai ou faux
Les virus ont seulement de l’ARN comme matériel génétique
Faux, ADN et ARN
Comment appelle-t-on un virus qui s’attaque aux bactéries?
Phages
Identifiez les éléments cellulaires suivant:
- microtubule
- centrosome avec paire de centriole
- chromatine
- pore nucléaire
- enveloppe nucléaire
- matrice extracellulaire
- vésicule
- Lysosome
- mitochondrie
- ER
- noyau
- nucleolus
- membrane plasmique
- filament intermédiaire
- appareil de golgi
- ribosome cytosolique
- peroxisome
- filament d’actine
Vrai ou faux
La cellule eucaryote est plus grosse que la cellule procaryote
Vrai
Qu’est qu’un cytosquelette?
C’est un système de filament qui constitue un système de poutres, cordes et moteur qui donne à la cellule sa force mécanique qui guide ses mouvements
Vrai ou faux
La cellule eucaryote à la même paroi cellulaire que la bactérie et ne peut pas modifier sa forme
Faux
À quoi sert l’isolement de cellules?
- Étudier les composés de la cellule pour les caractériser de façon biochimique
- Besoin d’un nombre suffisant de cellules d’un même type
Que fait-on lorsqu’on a une protéine en abondance?
On prélève directement du tissu ou on amplifie en culture cellulaire
Quelles sont les étapes pour isoler des cellules?
On défait la matrice extracellulaire et les jonctions intercellulaires en utilisant des enzymes protéolytiques et EDTA. On finit la séparation par agitation douce
Quelles sont les enzymes protéolytiques utilisées pour l’isolation et enrichissement des cellules?
Trypsine ou collagénase
À quoi sert le EDTA?
Le calcium est requis pour l’adhésion cellulaire
Pourquoi fait-on des enrichissements des cellules?
Le type cellulaire, la manipulation génétique ou la protéine qu’on veut étudier est rare
Lors de l’isolement de cellules d’une population complexe, comment fait-on pour séparer les cellules?
Fluorescence-activated cell sorter (FACS) - en d’autres mots, la cytométrie de flux
Comment fonctionne la cytométrie de flux?
On reconnait les cellules grâce à une molécule fluorescente qui est couplé à un anticorps. L’anticorps cible un antigène spécifique à un type cellulaire
Comment fonctionne la machine de cytométrie de flux pour la séparation des cellules?
Les cellules, contenues dans des gouttes, passent au travers d’un laser qui va charger négativement les cellules fluorescentes. Elles seront ensuite déviées par un champs électrique dans un contenant.
Vrai ou faux
La cytométrie de flux peut traiter des miliers de cellules à la seconde
Vrai
Vrai ou faux
Il y a une méthode plus rapide que la cytométrie de flux
Vrai
Expliquez le concept des billes magnétiques pour la séparation de cellules
On va utiliser un anticorps couplé à de la biotine. L’anticorps va se coupler à la cellule cible. On va aussi utiliser de la streptavidin/bille qui se couple à la biotine. On utilise un aimant pour attirer les cellules marquées.
Quelles sont les deux types de sélection avec les billes magnétiques et expliquez la différence?
On a la sélection négative et positive. La sélection négative est qu’on veut les cellules non marquées tandis que la sélection positive sont les cellules marquées que l’on veut.
Qu’est-ce qu’une culture primaire?
Ce sont des cellules isolées directement des tissus et ensuite dissociées. Ce sont les cellules qu’on va utiliser pour les passages à des cultures secondaires. Elles conservent les propriétés du tissu d’origine.
Pour quelles raisons que l’on ne peut pas utiliser indéfiniment des cultures primaires?
Le raccourcissement des télomères ainsi qu’un choc de culture
Vrai ou faux
On peut immortaliser des cellules et générer des lignées cellullaires?
Vrai
Comment peut-on immortaliser une cellule?
4 moyens
Cellule que l’on a réintroduit la télomérase, inactivé les contrôles du cycle cellulaire par l’introduction d’oncogène, mis en contact avec des produit chimique ou une mutation lors de la culture.
Qu’est-ce qu’une cellule transformée?
C’est une cellule qui est dérivées d’une tumeur, produite en introduisant des oncogènes ou infectées par des virus oncogéniques.
Les cellules HeLa sont des cellules immortalisées ou transformées?
Les deux
Quelles sont les propriétés des cellules transformées?
Elles sont immortelles, prolifèrent à haute densité, pas besoin d’être attachées pour pousser et produisent des tumeur lorsqu’injecté
Vrai ou faux
Les oncogènes permettent seulement de transformer une cellule?
Faux, elles peuvent les immortaliser ou les transformer
Quelle est la principale différence entre les cellules immortelles et transformées?
Elle réside dans leur capacité de division et leur origine. Les cellules immortelles sont capables de se diviser de manière indéfinie, tandis que les cellules transformées sont des cellules qui ont subi des modifications anormales qui affectent leur comportement et peuvent les rendre malignes.
Qu’est-ce qu’une transfection?
Procédé par lequel on introduit un acide nucléique dans des cellules animales en utilisant des méthodes chimiques, physiques ou biologiques
Quelle est l’objectif d’une transfection?
Produire des organismes transgéniques pour étudier la fonction et la régulation des gènes
Expliquez la méthode de transfection chimique
On fait rentrer dans une cellule de l’ADN chargée positivement ou neutraliser grâce à du calcium phosphate ou des polycations. On les rentre par endocytose dans des liposomes
Expliquez la méthode de transfection physique
Création de pore par microinjection ou électroporation
Qu’est-ce qu’une transfection transitoire?
L’ADN ne s’intègrera pas au génome de la cellule, mais il y aura expression du gène transfecté de façon transitoire (24 à 96 heures). L’ADN transfecté se dégradera et se diluera après division cellulaire.
Qu’est-ce qu’une transfection stable?
L’ADN va s’intégrer au génome et il y aura expression du gène transfecté sur une plus longue période. Le gène sera transmis aux cellules filles après division cellulaire
Expliquez la transfection biologique
Utilisation du virus recombinant dérivés de l’adénovirus, virus adénoassocié, gamma-rétrovirus et du lentivirus. Grâce à ces intermédiaires, les gènes d’intérêts vont pouvoir intégrer la cellule
Quelle est la différence entre la transfection, la transformation et la transduction.
Transfection: introduction du matériel génétique dans la cellule animal
Transformation: introduction non viral dans des bactéries, cellules non-animal, plantes
Transduction: transfection utilisant un vecteur viral
Qu’est-ce qu’un anticorps?
Protéines produites par les lymphocytes B en réponse à une molécules étrangère ou un microorgansime
Qu’est-ce qu’un antigène?
Une molécule contre laquelle se développe des anticorps
Qu’est-ce qu’un épitope.
C’est une région spécifique sur l’antigène reconnue par un anticorps.
Vrai ou faux
Selon la nature de l’antigène, il pourra générer différents anticorps qui reconnaitront des épitopes spécifiques
Vrai
Quelle est la différence entre des anticorps mono- et polyclonaux?
Les anticorps monoclonaux ne reconnaissent qu’un seul épitope tandis que le polyclonaux va reconnaitre plusieurs épitope.
Lequel est le plus spécifique, l’anticorps mono- ou polyclonaux?
Monoclonaux
Quelles sont les principales étapes du fractionnement cellulaire?
- Purification d’une protéine: briser les cellules et obtenir du lysat
- Centrifugation différentielle: séparation selon la taille et la densité
Quelle est une autre méthode pour le fractionnement cellulaire?
En appliquant l’homogénat sur le dessus d’une solution de sel qui rempli le tube + un gradient de concentration de solutions de sucrose.
Il y a deux moyens de sédimentation: une par vitesse et l’autre par équilibre
Qu’est-ce que la sédimentation par vitesse?
Permet une séparation selon la taille et la forme
Qu’est-ce que la sédimentation à l’équilibre?
Permet une séparation selon la densité de flottaison indépendamment de la taille et de la forme
Quelle est la définition de la différentiation cellulaire?
Processus par lequel les cellules se spécialisent en un type cellulaire.
Qu’est-ce qu’une cellule totipotente?
Cellule qui peut se différentier en tous les types cellulaires, embryonnaire et extra-embryonnaire
Qu’est-ce qu’une cellule pluripotente?
Cellule qui a le potentiel de différentiation plus faible que les cellule totipotente, mais qui peut redonner tous les types cellulaires et un organisme en entier
Qu’est-ce qu’une cellule multipotente?
Potentiel de différencier en différents types cellulaires à l’intérieur d’une lignée spécifique. Ex: les cellules souches hématopoïétiques
Qu’est-ce que la transdifférentiation?
C’est une cellule qui se différentie à partir d’une autre cellule différentiée sans passer par l’étape de cellule souche
Qu’est-ce que la dédifférenciation?
C’est une cellule complètement différentiée qui retourne dans un état moins différencié
Qu’est-ce que la reprogrammation nucléaire?
On restaure la pluripotentialité et le plein potentiel à se différencier dans tous les types cellulaires
Qu’est-ce qu’une cellule souche?
Ce sont des cellules non spécialisées toti-/pluri-/multipotente desquelles dérivent des cellules spécialisées
Vrai ou faux?
Les cellules souches sont capables de s’autorenouveler ou de se différentier
Vrai
Vrai ou faux?
Une cellule fille issues de la division d’une cellule souche va seulement se différentier
Faux, elle peut soit rester une cellule souche ou se différentier
Quelles sont les caractéristiques des cellules souches embryonnaires (ES)?
4 caractéristiques
- proviennent du bouchon embryonnaire
- prolifèrent indéfiniment en culture
- sont pluripotente
- elles redonnent tous les types cellulaires une fois réintroduit dans l’embryon
Vrai ou faux?
On retrouve en grande quantité le nombre de cellules souches dans presque tous les tissus
Faux, on les retrouve en petite quantité.
Quel est le potentiel en médecine des cellules souches embryonnaires pour de la thérapie cellulaire?
On peut induire de la différenciation avec diverses hormones ou facteur de croissance. Donc, nous avons un potentiel de remplacer et réparer les tissus malades. Important dans ces thérapies que le patient soit sur immunosupresseur
Quel est le problème avec les cellules ES?
Utilisation d’immunoupresseur et des problèmes éthiques. Donc la meilleure solution est la reprogrammation nucléaire
Expliquez le concept de reprogrammation nucléaire
On transfère des noyaux de cellules adultes différentiées dans des oeufs énucléés. Les cellules somatiques différentiées peuvent être reprogrammées vers un état embryonnaire en transférant leur noyau dans des oocytes
Définissez le clonage reproductif
Processus de création d’un organisme vivant génétiquement identique à un organisme existant. Cela signifie que le nouvel organisme possède le même matériel génétique que l’organisme donneur.
Définissez le clonage thérapeutique
Technique qui vise à produire des cellules souches embryonnaires génétiquement identiques à un patient donné. Il ne vise pas à créer un organisme entier, mais plutôt des cellules spécifiques qui pourraient être utilisées à des fins médicales.
Qu’est-ce qu’une cellule iPS (induced pluripotent stem cells)?
Ce sont des cellules pluripotentes produites à partir de cellules somatiques isolées de tissus adultes. Elles redonnent tous les types cellulaires.
Quel est le rôle de la reprogrammation nucléaire dans la formation des cellules iPS?
Elles permettent au cellules somatiques choisi de retrouver un état pluripotent. On va ensuite pouvoir corriger la mutation génétique pour ensuite pouvoir les redifférencier dans le type cellulaire que l’on recherche.
Quelles sont les utilitées pour la thérapie par cellule iPS?
On peut les utiliser pour l’identification de nouveau médicament
Permet la correction par thérapie génique.
Quelles sont les problèmes potentiels aux cellules iPS?
- Utilisation de vecteurs non-intégratifs étant donné que les vecteurs rétroviraux peuvent intégrer le génome du patient.
- Facteurs iPS ont un potentiel oncogénique
- Variabilité intrinsèque dans le potentiel de différenciation. (phénotype obtenu n’est pas nécessairement le même que celui de la maladie étudiée)
Qu’est-ce que la génétique inverse?
Technologie de l’ADN reconbinant qui permet une approche inverse pour l’identification de phénotype/gène dont on ignore la fonction.
Comment est-ce qu’on procède pour la génétique inverse?
On génère des cellules ou des organismes dans lesquels le gène d’intérêt a été muté.
Quelle est la définition d’animaux transgénique?
Tout animaux modifiés génétiquement par la déletion, l’addition ou le remplacement d’un gène.
Quelle est la procédure pour l’inactivation des gènes par recombinaison homologue dans les cellules ES?
à revoir
