Biotech : Transgénèse végétale Flashcards

1
Q

Définition plante transgénique ?

A

Plante où l’on a introduit artificiellement un nouveau gène = transgène

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Q

Que doit-il se passer pour qu’une plante soit qualifié de transgénique ?

A

Que le transgène soit exprimé et transmis à la descendance

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Q

Qu’obtient on en introduisant des nouveau gène dans une organisme ?

A

Des OGM = organismes génétiquement modifiés

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4
Q

A quoi correspond la lettre qui suit le mot OGM ?

A

Au lieu de confinement des organismes (ici végétaux)

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Q

OGM-S ?

A

S = serre pour les végétaux

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6
Q

OGM-A ?

A

A = animaux en animalerie

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7
Q

OGM-L ?

A

L= laboratoire : µorganismes +++

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8
Q

Que sont les chiffres associés aux lettres après OGM ?

A

Facteur de risque provoqué par l’induction du nouveau gène

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9
Q

OGM1 =

A

Risque faible

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10
Q

OGM 4 =

A

Risque élevé

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11
Q

Quels sont les chiffres les plus associées au OGM-S ?

A

1 et 2

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12
Q

Qu’est-ce que l’hérédité de Mendel ?

A

→ Croisement naturel

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13
Q

Que dit l’hérédité de Mendel ?

A

Il faut faire 4 croisement naturel pour obtenir ce que l’on souhaite car les caractère s’acquièrent progressivement

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14
Q

Comment procéder à la transgénèse (vite fait) ?

A
  • Isolation/introduction du gène d’intérêt
  • Transfert du gène dans l’autre type végétal
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15
Q

Avantage de la transgénèse par rapport à l’hérédité naturelle ?

A

= + rapide
= gène ciblé

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16
Q

Quel est l’idée de la transgénèse ?

A

Obtenir un OGM

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17
Q

Comment obtient on une nouvelle plante OGM ?

A

En modifiant génétiquement 1 cellule

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18
Q

Quels sont les intérêt de la transgénèse végétale ?

A
  • Outil de recherche expérimental
  • Amélioration des plantes
  • Modifier les capacité de production par les végétaux (alimentation ou nourriture)
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19
Q

Caractéristique de la cellule utilisée pour la transgénèse végétale ?

A

Capacité totipotente → capable de générer une plante entière

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20
Q

Quelles sont les grandes étapes de la transgénèse végétale ?

A

1) Isolement du gène d’intérêt
→ amplification
→ couplage avec un gène de sélection
→introduction dans la cellules végétale
→ régénération de la plante
→ vérification

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21
Q

Qu’isole-t-on quand on isole le transgène ?

A

→ Toute sa construction / expression

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22
Q

Comment est amplifié le transgène ?

A

En l’introduisant dans le végétal par un vecteur : plasmide → multiplication dans un bactérie

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23
Q

Comment se fait la production de l’ADN recombinant ?

A

En utilisant un vecteur liés au facteur de risques

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24
Q

Quelles sont les partie des transgènes ?

A
  • Séquence de régulation de l’expression du gène
  • La séquence codante du gène
  • La séquence de sélection
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25
Q

Sur quoi se base la sélection des cellules transgénique ?

A

Résistance aux :
* Herbicides
* ATB

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26
Q

Pourquoi l’introduction de l’ADN recombinant dans la cellule végétale est une étape compliquée ?

A

A cause de la parois en plus

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27
Q

La reconstitution des cellules végétales l’unique suite de la transgénèse végétale ?

A

NON : Il est possible de cultiver les cellules en bioréacteurs

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28
Q

Quels sont les types de transfert de tansgèns réalisables ?

A
  • Indirect
  • Direct
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29
Q

En quoi consiste le transfert indirect de transgènes ?

A

Utilisation d’un intermédiaire qui est un plasmide bactérien

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30
Q

Quel est le nom de la bactérie utilisée (plasmide) pour le transfert indirecte de transgènes ?

A

Agrobacterium tumefaciens

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31
Q

Quelles sont les méthodes de transfert indirect de transgènes dans les cellules végétales ?

A
  • Plasmide D-Ti
  • Transmission naturelle par une infection → plasmide Ti
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32
Q

Action du plasmide Ti ?

A

Induit des tumeur chez le végétal

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33
Q

Que signifie Ti ?

A

Tumor Inducing

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34
Q

Caractéristiques physiques des plantes traitées avec le plasmide Ti ?

A

Apparition de prolifération cellulaire → galles #Tumeur
= Caractéristiques d’un infection par l’agrobactérien

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35
Q

Quelles sont les séquences qui composent le plasmide Ti ?

A
  • Ori Ag Tum
  • !Vir
  • OCC
  • ADN-T
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36
Q

Rôle de l’Ori Ag Tum ?

A

Origine de réplication spécifique d’Agrobactérium

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37
Q

Rôle de !Vir ?

A

Fonction de virulence, responsable de :
* l’infection
* Le mécanisme de transfert de l’ADN-T
* Transfert du gène

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38
Q

Rôle de la séquence OCC ?

A

Fonction de dégradation des opines

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39
Q

Qu’est-ce que l’ADN T dans le plasmide Ti ?

A

ADN transféré ne s’exprimant que dans la cellule

40
Q

Rôle de la séquence ADN-T ?

A

Partie induisant la tumeur

41
Q

Composition en séquence de l’ADN-T ?

A
  • ONC
  • OPS
42
Q

Rôle de la séquence ONC ?

A

Gène responsable de l’oncogénicité et de la prolifération cellulaire

43
Q

Rôle de la séquence OPS ?

A

Gène codant pour une opine

44
Q

Que sont les opines ?

A

Substrats / éléments nutritifs pour la bactérie

45
Q

En quoi l’infection par le plasmide Ti est un système naturel de transfère de transgène ?

A

Quand il y a une infection → transfert de gène → prolifération des cellules végétales et sécrétion des opines par les cellules infectées

46
Q

Que signifie le D de plasmide D-Ti ?

A

D = désarmé

47
Q

Différence entre le plasmide Ti et le plasmide D-Ti ?

A

D-Ti : on retire les région qui ne nous intéresse pas, on les remplace → perte du caractère pathogène

48
Q

Comment se fait la fabrication du plasmide D-Ti ?

A

→ Génie génétique
Croise le plasmide désarmé avec un petit plasmide qui va lui insérer la partie d’ADN d’intérêt : transgène

49
Q

Quelles sont les régions que possède le plasmide désarmé ?

A

Région VIR et origine de réplication

50
Q

A quoi correspond le plasmide recombiné (D-Ti) ?

A

Plasmide désarmé + Petit plasmide

51
Q

Quels sont les types de technique de transfert direct existant ?

A
  • Biolystique
  • Protoplaste
52
Q

Principe de la biolystique ?

A

Transfert de gène par le biais d’un canon à particules
→ µbilles en or recouvertes d’ADN recombinant

53
Q

Rôle de l’accélérateur dans la biolystique ?

A

Permet le passage de quelques µbilles au niveau intracellulaire des cellules végétales

54
Q

Quelles sont le particularités des cellules végétales ?

A
  • Parois pectocellulosique
  • Gorgée d’eau
  • Plusieurs vacuoles
  • Présence de chloroplastes
55
Q

Rôle des parois pectocellulosiques ?

A
  • Rigidité
  • Obstacle aux interventions extérieures
56
Q

Caractéristiques des parois pectocellulosiques ?

A
  • Parois très rigides
  • Très strucurées
57
Q

Qu’engendre la présence d’eau et de vacuoles dans les cellules végétales ?

A

Turgescence → pression très importante sur la parois

58
Q

Inconvénients de la biolystique ?

A
  • On ne sais pas où les billes arrivent
  • Besoin de “chance”
  • 2 chances nécessaire : parois + noyau
59
Q

Que se passe-t-il quand la µbille atteint le noyau ?

A

1) libération de l’ADN
2) si “chance” insertion dans le génome + expression
3) Expulsion des µbilles lors de la division cellulaire
→ modifications génétiques

60
Q

Que permet le bombardement de certaines zone spécifiques de végétaux (biolystique) ?

A

Effectuer des croisement pour végétaux transgénique

61
Q

Avantage de la biolystique ?

A

+ facile que la transgénèse indirecte par bactérie

62
Q

Qu’est-ce qu’un protoplaste ?

A

Cellule végétale sans parois

63
Q

Que permettent les protoplastes ?

A

Accès plus facile à l’intérieur de la cellule

64
Q

Etape primordiale avant la suppression de la parois des cellules végétales ?

A

Diminuer la taille des vacuoles par plasmolyse

65
Q

Qu’est-ce que la plasmolyse ?

A

En diminuant la taille de la vacuole on décolle la membrane plasmique de la parois en réduisant la taille de la cellule

66
Q

Après la réduction de la taille de la cellule comment obtient on un protoblaste ?

A

Utilisation des pectinases qui détruise les pectines + des cellulase qui détruisent les celluloses

67
Q

Comment diminuer la taille des vacuoles ?

A

En évacuant l’eau par diffusion simple : placer la cellule dans un milieu concentré en sucre (mannitol +++)

68
Q

Quand est ce que le protoplaste est modifié génétiquement ?

A

Pas immédiatement mais /!\ au bout de quelques jours la cellule retrouve sa parois

69
Q

Quelles sont les possibilité de travaille avec les protoplastes ?

A
  • Fusion inter espèce
  • Electroporation
  • Lipotransfection
  • Microinjection
70
Q

Caractéristiques de la fusion inter espèce ?

A
  • Technique la + ancienne
  • Avec 2 espèce différentes mais assez voisines
  • “Utilisation” des 3 organites contenant de l’ADN : mito, noyau, chloro
71
Q

Lors de la fusion inter-espèce, quels sont les ADN qui vont être “échangés” ?

A

Nucléaire + mitochondrial + chloroplasmique

72
Q

Quelles sont les possibilité de fusion inter-espèce ?

A

Avec :
* agent chimique
* choc électrique

73
Q

Quel est l’agent chimique utilisé pour la fusion inter-espèce ?

A

PEG : polyéthylène glycol → agent déstabilisant de la membrane

74
Q

En quoi consiste le choc électrique ?

A

Etablissement d’un courant → allignement des cellules → choc électrique → fusion des membranes

75
Q

Impact de la fusion des mitochondries ?

A

Responsable de la stérilité mâle → empêche la formation de pollen

76
Q

Utilité de la fusion des mitochondries ?

A

Bcp d’OGM = stérile → évite contamination de l’environnemment

77
Q

Fusion des chloroplastes ?

A

Ils ne fusionnement pas entre eux

78
Q

Rôles des gènes portés par les chloroplastes ?

A

Résistance au herbicides

79
Q

Quels sont les résultats possible de la fusion inter-espèce ?

A

Création de fusion aléatoire

80
Q

Qu’est-ce que l’électroporation ?

A

Création de pores au niveau de la MP sous l’effet de choc électriques

81
Q

Principe de l’électroporation ?

A

Grâce au pores : ADN recombinant va penetrer dans les protoplaste (Nucléaire)

82
Q

Principe de la lipotransfection ?

A
  • Utilisation des liposomes pour transférer l’ADN dans les protoplastes
  • Fusion des liposome avec MP protoplastes
    → Comme endocytose
83
Q

Que sont les liposomes ?

A

Membranes plasmique artificielle qui simule une double couche phospholipidique

84
Q

Comment se fait la µinjection ?

A

Sous µscope

85
Q

Principe de la µinjection ?

A

Introduction de l’ADN grâce à une µpipette en intracellulaire → injection directe

86
Q

Qu’arrive-t-il dans la cellule une fois que l’ADN est dedans ?

A

Intégration au génome

87
Q

Quels sont les domaines concernés par la transgénèse végétale ?

A
  • Agriculture
  • Production :
    • de médicaments
    • de production alimentaire
  • Santé
  • Industrie
  • Agronomie
88
Q

Utilisation de la transgénère végétale en agriculture ?

A

Optimisation de la production

89
Q

Amélioration grâce à la TV en alimentation ?

A
  • Qualité nutritionnelles
  • Maturation des fruits
  • Transformation agro-alimentaire
90
Q

Amélioration grâce à la TV en santé ?

A
  • Pdt sanguins
  • vaccins
  • protéines humaines
91
Q

Amélioration grâce à la TV en Industrie ?

A
  • Pâtes à papier
  • Huiles industrielles
  • Colorant
92
Q

Amélioration grâce à la TV en agronomie ?

A
  • Résistance aux insectes
  • Résistance aux maladies
  • Résistance herbicides
93
Q

Caractéristiques des protéines recombinantes (production) ?

A
  • PRODUCTION : moyenne
  • COUT : faible
94
Q

Quelles sont les plantes les plus utilisé pour la production de molécules d’intérêts ?

A
  • Tabac
  • Pomme de terre
  • Tomate
95
Q

Qu’est-ce que le molecular pharming ?

A

Culture de plante en serre à but de production de médicaments
→plantes à usage pharmaceutiques