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{P2} UE2.1 > Biotech : Culture de cellules végétales > Flashcards

Biotech : Culture de cellules végétales Flashcards

(60 cards)

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1
Q

Quel est le double intérêt des culture de cellules végétale en agri et horticulture ?

A
  • µproparagtion
  • Eradiquer les maladies
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Q

Qu’est-ce que la µpropagation ?

A

Subdiviser le plantes et les remettre en cultures

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Q

Quels sont les objectifs de la culture cellulaire (agriculture et médecine) ?

A
  • Product° à grande échelle de métabolite secondaires
  • Effectuer des biotrnsformation
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4
Q

En quoi consistent les biotransformations ?

A

Utiliser l’équipement enzymatique de la plante pour transformer des substrats en produite

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Q

Quelle est la technique générale de culture des cellules végétales ?

A

Explant → stérilisation → Cal → Isolation des cals → mise en suspention

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6
Q

Que sont les cals ?

A

Masse cellulaire indifférenciée

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7
Q

Comment obtient on des cals ?

A

Si le milieu est bien choisit → semis solide → Cals à la surface de celui-ci

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8
Q

Principale différence entre la fermentation et la culture cellulaire végétale ?

A

Pas de fermenteur mais des bioréacteur → besoin en O

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9
Q

Quels sont les choix devant être fait pour sélectionner et préparer l’explant ?

A
  • Réactivité : division cell rapide
  • Influence de la saison → modifiable (T°, lumière…)
  • Absence de contamination
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10
Q

Quelles sont les parties les plus réactives des plantes (meilleurs explants) ?

A

Partie jeune de la plante → Feuilles ou Racines

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11
Q

Quels sont les deux objectif de l’explant ?

A

→ 2 objectifs
* Créer une culture de masse
* Exploiter cette culture de masse →production ou transformation de produits

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12
Q

Quelles sont les deux formes des cellules dans les deux étapes de la culture cellulaire ?

A

1) Cellules indifférenciées → division rapide
2) Cellules différenciées →division ralentie

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13
Q

Comment se fait la préparation de l’explant ?

A
  • Préstérilisation
  • Stérilisation
  • Rinçage (x5)
  • Scarification de l’explant
  • Mise en culture (1 à 5 semaine)
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14
Q

Condition de mise en culture des explant ?

A

→ 1 à 5 semaine
→ 25°C
→Obscurité

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15
Q

Pourquoi les explant sont ils mis en culture dans l’obscurité ?

A

Pour ne pas réaliser la photosynthèse → amènerais une différenciation

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16
Q

Comment se fait la préstérilisation ?

A

Trempage de la feuille dans l’éthanol

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17
Q

Comment se fait la stérilisation de l’explant ?

A
  • Solution d’ATB
  • Eau de javel (hypochlorite de sodium)
  • Eau oxygénée (H2O2)
  • Solution de nitrate d’Ag
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18
Q

A quoi sert la scarification ?

A
  • Eliminer la nécrose par stérilisation
  • Apporter une réaction de cicatrisation → division cell amorcée
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19
Q

Rôle du milieu de culture dans la production du cal ?

A

Primordial !!

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20
Q

Composition du milieu de culture des cals ?

A
  • Sels miné
  • Substances organiques (glucide)
  • Régulateurs de croissance
  • Produits naturels complexe
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21
Q

Quels sont les régulateurs de croissances utilisés dans la cultures des cals ?

A
  • Auxines
  • Gibbérellines
  • Cytokinines
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22
Q

Un milieu ou on diminue l’auxine donne…

A

Apparition de tige

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23
Q

Un milieu ou on diminue les cytokinines donne…

A

Des racines

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24
Q

Un milieu sans auxine donne ….

A

Un arrêt de la division cellulaire

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25
Comment se fait la subculture ?
Isolation du cal → subdivis° et remise en culture → prolifération cellulaire → Repiquages
26
Temps entre deux repiquages ?
2 mois
27
Comment obtient on des cellules en suspension ?
Dissociation des cals → cellules isolée → filtration → agitation (milieu liquide)
28
Comment est réaliser la dispersion des cals ?
Méthodes mécaniques d'agitation en milieu liquide
29
Différence entre le temps de division d'un µorganisme et des cellules végétales ?
Beaucoup plus long avec les cellules végétales → risque de contamination
30
Différence entre la taille des µorganisme et des cellules végétales ?
Végé → beaucoup + importante → Vacuoles + pression importante
31
Difficulté lors de l'agitation des cellules végétales ?
Sédimentation rapide mais sensibles aux cisaillements → si agitation trop forte → éclatent
32
Isolation des métabolites secondaire chez les cellules végé ?
Stockés dans vacuoles → isolation risquée et couteuse
33
Cinétiques de la croissance des cellules végétales ?
* Phase de latence initiale * Phase de croissance exponentielle * Phase de plateau * Phase de déclin
34
A qui sert la connaissance des phases de croissance cellulaires végé ?
Changer le milieux au bon moment
35
Quelles sont les différentes méthodes d'estimation de croissance des cellules végétales ?
* Estimation poids sec / poids frais * Numération des cellules * Estimation de la viabilité * Estimation index mitotique
36
Quelles sont les application de la culture de cellules végétales ?
* Récupération des métabolites II * Biotransformation
37
Quels sont les rôles des métabolites secondaires ?
* Défense * Toxique * Adaptation → Propriétés exploitables en médecine, industrie, parfum, cosmétique...
38
En culture végétale, comment est rendu optimale et rentable la prolifération des cellules et l'acquisition de caractères différenciés ?
Utilisation de deux bioréacteurs en bioréacteur continu
39
Quels sont les bioréacteurs utilisés dans la culture des cellules végétale ?
* Bioréacteur de masse * Bioréacteur de production
40
Utilisation d'un bioréacteur de masse ?
Prolifération des cellules avec un milieu de culture adapté à la division cellulaire
41
Utilisation d'un bioréacteur de production ?
Production permettant la différentiation des cellules et donc la production des substance d'intérêt
42
Principe des bioréacteur en système continu ?
Temps nécessaire à la production (réacteur 2) permet de reconstituer la biomasse dans le réacteur 1 sans interrompre la culture
43
Quand utilise-t-on les bioréacteurs continu ?
Lorsqu'on ne peut pas les synthétiser chimiquement
44
Comment se fait l'estimation de l'index mitotique
* Coloration du noyau * Estimation au µscope du nm de noyaux en division * Rapport au nombre total de noyaux comptés
45
Relation entre l'index mitotique et la croissance des cellules ?
+ l'index est élevé + les cellules sont en phase de croissance
46
Quelles sont les applications de la culture de cellules végétales ?
Domaine industriel → production de composés d'intérêts thérapeutique : * Récupération métabolites secondaire * Biotransformation
47
Que produisent les cellules végétales en industrie ?
Métabolites : primaire ou secondaire
48
Rôles des métabolites secondaire ?
* Rôle défense → action active + toxique * Rôle d'adaptation
49
Quels sont les métabolites qui permettent l'adaptation du végétal dans l'environnement ?
* Filtres solaire * Piégeurs de radicaux libres
50
Quels sont les domaines où les métabolites secondaires sont exploitables ?
* Médecine * Industrie du parfum * Cosmétique
51
Quel est le problème des métabolites secondaires des cellules végétales ?
Leur localisation intra-vacuolaire → nécessite destruction de la culture
52
A quoi s'intéresse-t-on quand on s'intéresse à la biotransformation ?
A l'équipement enzymatique
53
Importance de l'équipement enzymatiques dans la culture des cellules végétales ?
Chargée de transformer un substrat en un produit d'intérêt
54
Que se passe-t-il dans les bioréacteurs ?
Le substrat est censée pénétrer les cellules
55
Quelles sont les contrainte de culture dans un bioréacteur ?
* Choisir un substrat compatible et non toxique * Pouvoir isoler le produit en fin de réaction
56
Variante de la biotransformation ?
* Enzymes isolées + immobilisées matrice * Ajout des substrats compatibles
57
Quel est le problème avec les parois pectocellulosiques retrouvées dans les cellules végétales ?
Obstacle à l'insertion des gènes = transgénèse
58
Comment faciliter la transgénèse des cellules végétales ?
Fabrication de protoplastes
59
Que sont les protoplastes ?
Cellules végétales dépourvues de parois
60
Comment fabrique-t-on des protoplastes ?
* "Sucre" à l'extérieure de la cellule → vide de son eau * Digestion de la parois par des pectinases

{P2} UE2.1 (8 decks)

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