Biotech : Fermentation n°2 Flashcards
Procédé majoritaire de fermentation ?
Batch = en lots
Déroulé de la fermentation batch ?
Elément nutritif + inoculum → agents anti-mousse → Récupération du contenu + extraction → Nettoyage, stérilisation, préparation d’un autre lot
Cinétique de la fermentation ?
1 : Phase de latence
I : Phase de transition
2 : Phase exponentielle
3 : Phase stationnaire
4 : Phase de mort cellulaire
Différence entre batch et fed batch ?
Addition contrôlée de nutriments en cours de fermentation
Mode continu ?
=> Recherche+++
=> Ajout et prélèvement
Quelles sont les différentes condition de fermentation ?
- Fermentation en aérobie : mdt +++
- Fermentation en anaérobie : ac lactique, éthanol…
Quelles sont les produit désirés en production industrielle ?
- Métabolites primaire (phase de croissance)
- Métabolite secondaire (phase stationnaire)
Caractéristiques des fermenteurs industriels ?
- Cuve en inox
- V : 1L à 500m3
- Capacité : 100 kg poid sec/m3
- Qté de pdt : 10mg/L à 200g/L
- Stérilisation par vapeur
- Système de refroidissement ou de chauffage
- pH contrôlé
Qu’est-ce qu’un milieu définit ?
Milieu qui répond aux besoins nutritionnels, hormonaux…
Composition des milieux de culture ?
- Macronutriments
- µnutriment
- Facteur additionnels
(* Oxygène)
Impact de la modification du milieu de culture ?
Peut modifier :
* Stabilité
* Qualité
* Rendement
* Paramètres opérationnels
Inoculum définition ?
Substance /culture cellulaire qui est ajoutée dans le milieu
Quels sont les actions réalisable pour optimiser la souche cellulaire ?
- Adaptation du milieu
- Mutation des souches ( Radiation X, UV ou utilisation d’agents mutagènes chimiques ou biologiques)
Agents mutagènes chimiques ?
- Nitrites
- Alcalinisant
- Analogues de bases
- Orange acridine
Agents mutagène biologiques ?
Transposons
Que doit on purifier après la fermentation ?
- Bouillon de culture ou milieux complexe et défini
- matériel biologique
- Concentration de produit très dilué
Quelles sont les propriétés des produit utilisé en bioséparation ?
- Taille
- Densité
- Solubilité
- Coefficient de partage
- Charges
- Interaction hydrophobe…
Quelle est la première étape de bioséparation ?
La centrifugation
Quand peut on réaliser une extraction liquide-liquide ?
Quand le composé est assez soluble avec le milieu de culture en phase organique
Quels sont les paramètres qui définissent la qualité du produit ?
- Leur activité
- Leur pureté
- La présence de contaminant
Quelles sont les étapes de bioséparation ?
(* Homogénéisation (si pdt intracellulaire)
* Séparation/clarification
* Concentration
* Purification
Objectif de la séparation/ clarification ?
Séparer les cellules du surnageant et de conserver la fraction d’intérêt
Objectif de l’homogénéisation ?
Briser des cellules pour récupérer un produit intracellulaire
Méthodes de purification ?
- Extraction liquide/liquide
- Chromatographie
- Absorption, précipitation, cristallisation…
Quelles sont les différentes méthode de purification avec les support en résine ?
- Chromatographie échangeuses d’ion (charge)
- Chromatographie par gel filtration (taille)
- Chromatographie par affinité
Quel sont les bonne pratiques de fabrication qui assurent le contrôle qualité ?
- Protocole d’opération normalisé
- Validation des procédés
- Documentation bien définie
Comment à été permise la production à grande échelle de la pénicilline ?
- Sélection de lignées cellulaire
- Optimisation du milieu de culture
- Développement du procédé
- Production en milieu indus de la pénicilline G
