Biotech : Fermentation n°2

Question 1

Procédé majoritaire de fermentation ?

Answer 1

Batch = en lots

Question 2

Déroulé de la fermentation batch ?

Answer 2

Elément nutritif + inoculum → agents anti-mousse → Récupération du contenu + extraction → Nettoyage, stérilisation, préparation d’un autre lot

Question 3

Cinétique de la fermentation ?

Answer 3

1 : Phase de latence
I : Phase de transition
2 : Phase exponentielle
3 : Phase stationnaire
4 : Phase de mort cellulaire

Question 4

Différence entre batch et fed batch ?

Answer 4

Addition contrôlée de nutriments en cours de fermentation

Question 5

Mode continu ?

Answer 5

=> Recherche+++
=> Ajout et prélèvement

Question 6

Quelles sont les différentes condition de fermentation ?

Answer 6

• Fermentation en aérobie : mdt +++
• Fermentation en anaérobie : ac lactique, éthanol…

Question 7

Quelles sont les produit désirés en production industrielle ?

Answer 7

• Métabolites primaire (phase de croissance)
• Métabolite secondaire (phase stationnaire)

Question 8

Caractéristiques des fermenteurs industriels ?

Answer 8

• Cuve en inox
• V : 1L à 500m3
• Capacité : 100 kg poid sec/m3
• Qté de pdt : 10mg/L à 200g/L
• Stérilisation par vapeur
• Système de refroidissement ou de chauffage
• pH contrôlé

Question 9

Qu’est-ce qu’un milieu définit ?

Answer 9

Milieu qui répond aux besoins nutritionnels, hormonaux…

Question 10

Composition des milieux de culture ?

Answer 10

• Macronutriments
• µnutriment
• Facteur additionnels
  (* Oxygène)

Question 11

Impact de la modification du milieu de culture ?

Answer 11

Peut modifier :
* Stabilité
* Qualité
* Rendement
* Paramètres opérationnels

Question 12

Inoculum définition ?

Answer 12

Substance /culture cellulaire qui est ajoutée dans le milieu

Question 13

Quels sont les actions réalisable pour optimiser la souche cellulaire ?

Answer 13

• Adaptation du milieu
• Mutation des souches ( Radiation X, UV ou utilisation d’agents mutagènes chimiques ou biologiques)

Question 14

Agents mutagènes chimiques ?

Answer 14

• Nitrites
• Alcalinisant
• Analogues de bases
• Orange acridine

Question 15

Agents mutagène biologiques ?

Answer 15

Transposons

Question 16

Que doit on purifier après la fermentation ?

Answer 16

• Bouillon de culture ou milieux complexe et défini
• matériel biologique
• Concentration de produit très dilué

Question 17

Quelles sont les propriétés des produit utilisé en bioséparation ?

Answer 17

• Taille
• Densité
• Solubilité
• Coefficient de partage
• Charges
• Interaction hydrophobe…

Question 18

Quelle est la première étape de bioséparation ?

Answer 18

La centrifugation

Question 19

Quand peut on réaliser une extraction liquide-liquide ?

Answer 19

Quand le composé est assez soluble avec le milieu de culture en phase organique

Question 20

Quels sont les paramètres qui définissent la qualité du produit ?

Answer 20

• Leur activité
• Leur pureté
• La présence de contaminant

Question 21

Quelles sont les étapes de bioséparation ?

Answer 21

(* Homogénéisation (si pdt intracellulaire)
* Séparation/clarification
* Concentration
* Purification

Question 22

Objectif de la séparation/ clarification ?

Answer 22

Séparer les cellules du surnageant et de conserver la fraction d’intérêt

Question 23

Objectif de l’homogénéisation ?

Answer 23

Briser des cellules pour récupérer un produit intracellulaire

Question 24

Méthodes de purification ?

Answer 24

• Extraction liquide/liquide
• Chromatographie
• Absorption, précipitation, cristallisation…

Question 25

Quelles sont les différentes méthode de purification avec les support en résine ?

Answer 25

• Chromatographie échangeuses d’ion (charge)
• Chromatographie par gel filtration (taille)
• Chromatographie par affinité

Question 26

Quel sont les bonne pratiques de fabrication qui assurent le contrôle qualité ?

Answer 26

• Protocole d’opération normalisé
• Validation des procédés
• Documentation bien définie

Question 27

Comment à été permise la production à grande échelle de la pénicilline ?

Answer 27

• Sélection de lignées cellulaire
• Optimisation du milieu de culture
• Développement du procédé
• Production en milieu indus de la pénicilline G